马银花(Rhododendron ovatum Planch.)为杜鹃花属(Rhododendron)马银花亚属(Subgen. Azaleastrum)植物^[1]，中国特有种，在中国东南部、南部、西南部十几个省份均有分布。马银花具有适应低海拨气候、常绿、耐修剪、萌枝能力强、抗污染^[2]等优点，同时，其花量大、花色雅、有香味^[3]，适合在园林绿化中应用，是一种具有开发价值的杜鹃花。然而目前对马银花的研究较少，集中在植物学特性^{[4, 5]}及繁殖技术^{[3 ,6]}两方面。

花朵的香气是花卉植物的重要的经济学性状之一，桂花、栀子、腊梅等花卉深受人们喜爱，其中一个重要原因就是人们偏爱这些观赏植物花朵释放的香气。这些香气成分是植物次生代谢产物，主要由芳香族化合物、萜烯类化合物和脂肪酸衍生物等分子量较低(30-300)、易挥发的化合物构成。目前关于观赏植物的香气研究已有较多报道^{[7, 8, 9, 10]}，而对杜鹃花属植物的香气研究主要集中在挥发油成分分析^{[11, 12]}，气态的花朵挥发性成分分析少有报道^[13]。笔者通过SPME-GC-MS联用仪，对马银花花朵开放过程挥发性成分及其变化进行分析，为其他种类的杜鹃花花香研究提供参考，也为评价马银花园林应用前景提供依据。

马银花种植于浙江省林业科学研究院苗圃(30°13′09″ N，120°01′26″ E)，海拔24 m，年平均气温16.2 ℃，年平均降水量1 500 mm，土壤为黄壤。4月初开花，清晨采集处在不同开放过程的同一株马银花上的花1朵，立刻放入15 mL的采样瓶，密封，供试验所用，重复3次。样品采集依开花阶段确定为5个批次 ： 花蕾期(花朵的苞片基本打开，花瓣未打开的状态)；半开放期(花朵的苞片已打开，花瓣略为打开一点的状态)；开放1 d(花瓣完全打开的当天)；开放2 d(花瓣完全打开的第2天)；凋落期(花瓣萎蔫即将掉落的状态)。

采用supelco公司手动固相微萃取(solid phase microextraction ,SPME)装置，100 μm聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane ,PDMS)萃取头。使用前先将SPME的萃取头在气相色谱进样口老化10 min，老化温度为250 ℃，载气体积流量为1.0 mL · min^-1。取放置了马银花的样品瓶，插入萃取纤维头，于50 ℃下平衡10 min，顶空萃取30 min，取出后立即插入色谱仪进样口(温度250 ℃)脱附3 min。

分析采用美国安捷伦科技有限公司7890A-5975C气相色谱仪-质谱联用仪，HP-5MS石英毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25 m)，载气为氦气，柱流量1 mL · min^-1，不分流。进样口温度250 ℃。色谱柱程序升温 ： 50 ℃保持2 min；以8 ℃ · min^-1升至180 ℃，保持5 min；再以10 ℃ · min^-1升至250 ℃，保持8 min。EI电离源，电离能量70 eV；离子源温度230 ℃，接口温度280 ℃，质量扫描范围20-480 amu。质谱NIST谱库检索。

在气相色谱和质谱条件下进行鉴定，根据各自的总离子流图分离出的各组分提取质谱图，经质谱NIST谱库检索，并辅助以人工解析鉴定出花朵挥发性成分，挥发性成分占色谱总馏出峰面积的99.84%-100%，采用气相色谱处理系统，以面积归一化法测得各组分相对质量分数，结果见表 1。

从表 1可知，花朵开放各过程挥发性成分种类呈升高-降低的变化趋势。在整个花朵开放过程中，共检测出57种化合物。开花第1天，花朵挥发性成分的种类最多，有28种，花蕾状态时花朵挥发性成分的种类最少，只有17种，2个过程释放出的化合物相差11种。有31种化合物只在其中一个过程中出现。

从表 2可知，在整个花朵开放过程中，花朵挥发性成分可以归为9类化合物，种类最多的化合物为苯环类化合物(19种)，占总化合物数量的33.33%；其次是醇类化合物(7种)，占总化合物数量的12.28%；醚类化合物和酮类化合物最少，仅各出现1种。

从表 1可知，α-金合欢烯和十五烷2种化合物在花朵开放过程中都被检出，并基本呈升高-降低的变化趋势。肉桂醇、肉桂酸甲酯、邻甲氧基苯甲酸甲酯、异榄香脂素4种化合物除了在花蕾期未检出，其它过程都被检出，并基本呈升高-降低的变化趋势。在马银花花蕾期检测到吲哚0.44%，但在其它植物花朵挥发性成分的研究中少有报道。从表 2可知，不同开放阶段，苯环类、醇类、烷烃类、烯烃类化合物含量呈增加-减少的变化趋势，萜类化合物含量呈减少-增加的变化趋势，醚类、醚类、酮类化合物含量变化无明显规律。花蕾期、半开放期、凋落期都以萜类化合物为主，分别占了90.35%、71.46%、73.81%，其中1S-α-蒎烯和1R-α-蒎烯是含量最高的化合物。开放1 d时以肉桂酸甲酯为主的酯类化合物含量最高，达到48.05%；含量次高的是萜类化合物，占20.73%。开放2 d时烯烃类化合物含量最高，主要是6 ,9-十七碳二烯，占38.02%；含量次高的是萜类化合物，占21.16%。

在马银花花朵开放过程中，挥发性成分的种类呈升高-降低的变化趋势，这与菊花^[14]、腊梅^[15]等观赏植物的变化趋势一致。不同开放阶段，苯环类、醇类、烷烃类、烯烃类化合物含量呈增加-减少的变化趋势，萜类化合物含量呈减少-增加的变化趋势，醚类、醚类、酮类化合物含量变化无明显规律。马银花开花的不同阶段，花朵挥发性成分的种类和相对含量的差异变化，可能与花香调节模式有一定的关系，特别是对吸引传粉者十分重要，这关系到它是否可以成功地繁衍后代。本研究对单株马银花花朵开放过程挥发性成分变化进行分析，不同植株、不同地域的马银花花朵可能存在一定的差异，可作进一步深入研究。

在整个马银花花朵开放过程中，共检测出57种挥发性成分，其中苯环类化合物19种，醇类化合物7种，醚类化合物1种，醛类化合物3种，萜类化合物6种，酮类化合物1种，烷烃类化合物9种，烯烃类化合物8种，酯类化合物3种。从含量上看，虽然萜类化合物种类不是最多，但不同开放阶段中含量都占据了重要的比重，说明它是马银花挥发性成分中主要的一类化合物。萜类化合物广泛存在于自然界，是构成某些植物的香精、树脂、色素等的主要成分，是一类重要的天然香料。萜类化合物也是中草药中的一类比较重要的化合物，有祛痰、止咳、驱风、发汗、驱虫、镇痛等生理活性。α-蒎烯在马银花花朵开放过程中有R和S两种构型，它具有明显镇咳、祛痰功效，并具有抗真菌作用，有松木、针叶及树脂样的气息，研究发现低浓度α-蒎烯的吸入可使人的精神性发汗减少，指尖血流量增加，脉搏少而稳定，可抑制交感神经的兴奋，促进副交感神经的作用，使人趋于放松，减轻疲劳感^[16]。马银花花朵开放的蕾期、半开放期、凋落期过程中都有检测到高含量的α-蒎烯这个萜类化合物，其中蕾期的1S- α -蒎烯是所有检测成分中含量最高的，达到72.54%，说明α-蒎烯是马银花的主要特征性挥发成分。具有香气阈值相对较小的α-蒎烯^[17]，在无鲜艳的花瓣的情况下，对吸引传粉者十分重要。开放1 d时以肉桂酸甲酯为主的酯类化合物含量最高。肉桂酸甲酯用于香料工业作定香剂，常用于调配康乃馨、东方型花香香精，用于肥皂、洗涤剂，也用于风味剂和糕点。作为有机合成中间体，主要用于医药工业，对抑制白癜风、美白防晒都有积极的作用。马银花在花朵开放过程中都有检测到α-金合欢烯，它具青香、花香并伴有香脂香气，是倍半萜类香料成分，可用于皂、洗涤剂香精和日化香精中。从各成分来看，马银花花香并不具有明显的有毒成分，对环境无特别的破坏性，它的香味能给人舒服的感觉，这对园林绿化应用是十分有利的，可以在适宜的地段进行配置种植。