2. 上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心, 上海 201306
鲢是我国产量最大的淡水鱼种之一,但由于其肌间刺较多且土腥味较重,使得其接受程度不高,导致了价格低廉的现状[1]。目前,主要的解决方式是将鲢制成鱼糜产品,以增加其工业价值,并且能够提升其品质和贮藏特性 [2]。超高压技术被列为当前食品工业“七大技术热点”和21世纪“十大尖端科技之一”[3-4]。作为一种非热加工技术,超高压技术的最显著优势在于其对食品原有的色、香、味以及营养成分影响较小[5]。研究表明,超高压处理可有效提高鱼糜的品质特性,并延长鱼糜的保质期[5-6]。
国内外已有许多研究将超高压应用于鱼糜制品的加工[6-9],而对于其在鲢鱼糜中的应用,也有一定程度的探索,但现有研究仅涉及鱼糜制品的凝胶特性或色泽品相等方面,仍有许多科学问题尚未进行全面系统地阐述。本研究在前人研究的基础之上,较为系统地探讨了不同超高压压力对鲢鱼糜品质和贮藏特性的影响,旨在为超高压技术的实际工业化应用提供理论基础和实践依据。
1 材料与方法 1.1 实验材料与试剂主要材料与试剂:新鲜鲢(购于上海市浦东新区临港新城古棕路菜市场),蔗糖、山梨醇、焦磷酸钠、多聚磷酸钠、淀粉、食盐均为食品级,肠衣,真空包装袋,去离子水,戊二醛,乙醇,铝制坩埚等。
1.2 实验设备主要设备:HPP.L2-600/2超高压处理设备,天津华泰森淼有限公司;TA-XT Plus质构仪,英国Stable Micro System公司;CHROMA METER CR-400色彩色差计,日本Minolta公司;Hitachi S-3400N Ⅱ型扫描电镜,上海日立高新技术有限公司;DZ-400-2D真空包装机,温州市鹿城区黄龙华能机械厂;DSC 823e差式扫描量热仪,瑞士梅特勒托利仪器有限公司。
1.3 实验方法 1.3.1 鲢鱼糜的制作工艺:鲜活鲢→去鳞、内脏、头、尾→清洗→采肉→精滤→漂洗(鱼肉与水的比例1:5,漂洗3次,水温低于10 ℃)→离心脱水→斩拌(添加剂:4%蔗糖、4%山梨醇、0.3%焦磷酸钠、0.3%三聚磷酸钠)→装袋密封包装→-20 ℃冷藏备用。
1.3.2 鱼肉肠的制备工艺:冷冻鱼糜→解冻→斩拌(加盐和淀粉等)→灌肠→真空包装→超高压处理。
1.3.3 样品超高压处理将样品分别在100、200、300、400、500 MPa的耐压釜中保压10 min,温度为25 ℃,取出后迅速用冰水冷却,4 ℃放置等待处理。
1.3.4 鱼肠热处理采用二段加热法,先在30℃条件下凝胶化1 h,再90 ℃加热20 min;加热后避免褶皱现象立即置于冰水中冷却。
1.4 分析方法 1.4.1 凝胶强度测定将鱼肠切成25 mm长的圆柱形片段,使用质构仪测定。采用直径为5 mm的球形探头(P/5S),测前速度:2.0 mm/s,测试速度:1.0 mm/s,测后速度10 mm/s,下压距离15 mm,触发值10 g,数据采集速度100 pps。
凝胶强度(g·cm)=凝胶破断强度(g)×凝胶形变距离(cm)。
1.4.2 色差值测定将鱼肠切成厚度为5 mm的薄片,在室温下使用色彩色差计测定样品色度。测出样品的L*(明亮度)、a*(红绿偏差)和b*(黄蓝偏差)值。计算公式:白度W=100-[(100-L*)2+a*2+b*2]1/2。
1.4.3 差示扫描量热法分析(DSC)本实验采用差示扫描量热法检测鲢鱼糜肌原纤维蛋白变性温度的变化,以探讨超高压处理对鱼糜凝胶热稳定性的影响。设置程序降温至10 ℃,恒温5 min,温度扫描范围为10~100 ℃,升温速率为10 ℃/min[6]。
1.4.4 菌落总数与挥发性盐基氮(TVB-N)含量的测定将不同处理压力的鲢鱼糜制品分别装入无菌袋中,封口后在4 ℃恒温培养箱内贮藏16 d。在贮藏过程中对各组进行抽样,进行菌落总数与挥发性盐基氮(TVB-N)含量的测定。菌落总数按GB/T4789.2—2008《食品卫生微生物学检验-菌落总数测定》进行测定[10],TVB-N按GB 2733—2005《鲜冻动物性水产品卫生标准》[6]进行测定。
1.5 数据处理实验数据均以平均数±标准差(
由图 1可以看出,与未经超高压处理的鱼糜相比,超高压处理后的鱼糜凝胶强度显著增强。凝胶强度随着压力的增大呈现出先增大后减小的趋势,在400 MPa时,凝胶强度达到最大值。胡飞华等[7]的研究也表明,随着压力的逐渐增大,导致肌球蛋白变性,包括蛋白质构型的改变与肽链的解开,同时超高压处理还可使蛋白质分子结构中暴露出更多的巯基基团,巯基含量的增多促使蛋白质凝胶性能得到改善;而压力继续增大会影响物质分子间结合形式,导致键的破坏与重组,从而使大分子功能特性也随之发生变化,形成了有序的三维网络结构,从而具有较高的鱼糜凝胶强度。当压力达到500 MPa时,凝胶强度相对降低,可能是由于在500 MPa时压力过大导致蛋白分子内部化学键断裂,鱼糜的凝胶网络结构交联度降低,从而使鱼糜凝胶强度降低。
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图 1 不同压力对鲢鱼糜的凝胶强度的影响
Fig. 1 Gel strength of silver carp surimi prepared under different pressure
* 表示400 MPa压力组与其他组间均存在显著性差异(P < 0.05),图 2同。
* indicates there were significant differences between the group of 400 MPa and the other groups (P < 0.05),the same in Fig.2. |
由图 2可以看出,鲢鱼糜的白度值随着压力的增大也显著增加,且压力越大白度值越大,但在400~500 MPa增加缓慢。罗晓玲等[10]用超高压处理复合马鲛鱼鱼糜时,同样发现了随着压力的增加,复合马鲛鱼鱼糜的白度值明显升高。超高压处理引起鱼糜凝胶色泽变化可能有以下两种原因:(1)超高压导致肌球蛋白变性,或诱导肌红蛋白中的亚铁血红素失去或被取代,形成一个均匀不透明的凝胶体,从而导致L*的增加;(2)超高压处理减少了鱼糜中O2的分压,肌红蛋白和氧合肌红蛋白转化为高铁肌红蛋白,促使鱼糜凝胶中高铁肌红蛋白含量增加,而凝胶中此蛋白的升高会导致红值a*、b*降低[6]。
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图 2 不同压力对鲢鱼糜白度的影响
Fig. 2 Whiteness of gels from silver carp surimi prepared under different pressure
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从表 1可以看出,鲢鱼糜在经过超高压处理后,均明显提高了其肌原纤维蛋白的热变性温度,提高幅度为0.58~2.07 ℃。从表 1可见,随着超高压压力的增大,鲢鱼糜的肌原纤维蛋白的热变性温度呈现先升高后降低的趋势,当压力超过200 MPa时,肌原纤维蛋白的变性温度提高迅速,这是由于超高压处理导致鱼糜肌原纤维蛋白构象发生了显著变化,致使鱼糜凝胶网络结构变得稳定;当压力升高至400 MPa时,热变性温度达到最高值72.16 ℃,之后热变性温度呈现降低的趋势,这是由于在较高压力下,肌原纤维蛋白发生了聚合,致使其交联度的降低[7-9, 11]。
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表 1 不同压力下盐溶性蛋白质变性温度的变化 Tab.1 Change of denatured temperature of salt-soluble protein under different pressure |
不同压力处理后的鲢鱼糜制品在4 ℃下微生物的变化如图 3所示:未经超高压处理的鲢鱼糜中初始细菌总数为5.58 log CFU/g,经0、100、200 MPa高压处理后,菌落总数分别减少为4.15、3.03 log CFU/g;经300、400、500 MPa高压处理后,通过平板计数法没有检测到细菌的存在,由此可证明超高压的灭菌效果显著。文献显示,300~600 MPa的压力可以使绝大多数细菌死亡[12],这与本试验的研究结果相吻合。
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图 3 不同压力对冷藏期间鲢鱼糜菌落总数变化的影响
Fig. 3 Change of total bacterial amount in silver carp surimi under different pressure during cold storage
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图 3中100、200 MPa高压处理组总菌数的增长速率均比对照组快,而且与对照组同时在贮藏10天后进入稳定期,这可能是由于超高压处理虽然对微生物具有杀灭作用,但是高压会导致鱼肉细胞的破裂,释放肽段、氨基酸、核酸等物质,从而使这些物质更容易被微生物利用,致使残存的微生物在处理后的贮藏过程中迅速生长[13]。但是由图 3可知300、400、500 MPa的压力处理组具有更长的延滞期,并在冷藏12 d后才达到稳定期,这说明300~500 MPa超高压处理对鱼糜制品中的细菌生长有良好的控制作用,可抑制细菌的生长,使其推迟进入稳定期。综上所述,超高压处理不仅能够杀灭鱼糜制品中的微生物,而且对残存微生物的生长起到抑制作用,由此反映出超高压处理对提升鱼糜制品的贮藏特性具有良好效果。
2.2.2 不同压力对冷藏期间鲢鱼糜挥发性盐基氮含量的影响由图 4可知,未经超高压处理的鱼糜在第8天TVB-N含量已经达到11.87 mg/100g,在第16天TVB-N含量已经超过水产品卫生标准,当超高压压力大于100 MPa时鱼糜的TVB-N含量在考察范围内显著低于对照组,且随着超高压压力的增大,TVB-N含量的增长速度越慢,经400 MPa处理的鱼糜在第16天TVB-N含量仅为11.52 mg/100g。但是,当压力为100 MPa时,鱼糜在第8天的TVB-N含量高于对照组,有学者认为这是由于100 MPa时的压力并没有使组织蛋白酶失活,反而提高了酶活性,从而导致了TVB-N含量增长速率的增加[14-15]。
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图 4 不同压力对冷藏期间鲢鱼糜TVB-N含量的影响
Fig. 4 Change of TVB-N in silver carp surimi under different pressure during cold storage
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总之,超高压处理不仅能够显著改善鲢鱼糜的品质,而且能够延长其冷藏货架期,在鲢鱼糜加工与生产中具有良好的应用前景。超高压处理对鲢鱼糜的品质特性影响具体如下:
(1)凝胶特性:鲢鱼糜的凝胶强度随着压力增加呈现先升高后降低的变化趋势,在400 MPa压力下达到最大值。
(2)白度:鲢鱼糜的白度值随压力增加而增加,但在400~500 MPa增加缓慢。
(3)肌原纤维蛋白热变性温度:DSC图谱显示超高压处理能够显著提升鲢鱼糜制品的肌原纤维蛋白热变性温度(P < 0.05)。
超高压处理对鲢鱼糜的贮藏特性影响具体表现为:冷藏条件下,超高压处理可以有效地杀灭鱼糜中大部分细菌,抑制贮藏过程中挥发性盐基氮的积累,从而延长鲢鱼糜的货架期,而且随着处理压力的增高货架期的延长效果越显著。
综上所述,处理压力为400 MPa,处理时间为10 min时,超高压对于鲢鱼糜品质和贮藏特性的改善最为显著。该条件处理后的鱼糜制品不仅具有良好的凝胶特性、色泽品相和热变性温度,而且能够延长其冷藏货架期,抑制贮藏过程中挥发性盐基氮的积累,是理想鲢鱼糜超高压处理条件。
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