上海海洋大学学报  2015, Vol. 24 Issue (6): 841-846   PDF    
秦岭细鳞鲑亲鱼培育和人工繁育技术研究
李平1, 王丰1, 2 , 问思恩1, 2    
1. 陕西省水产研究所, 陕西西安 710086;
2. 中国水产科学院黄河水产研究所, 陕西西安 710086
摘要:研究了秦岭细鳞鲑亲本人工驯化、催产、孵化和育苗的关键技术以及促熟催产中的外源性激素选择及用量。实验用野外捕捞秦岭细鳞鲑,从2011年3月开始逐年筛选,到2014年3月共培育5~9龄亲鱼580尾。实验显示,通过30 d有计划地添加黄粉虫投喂,可使野生亲鱼完全摄食人工配合饲料。注射马来酸地欧酮DOM(2.5 mg/kg)和鲑鱼促性腺激素释放激素类似物S-GnRHa(3μg/kg),促熟催产3 d后效果明显。2013年采卵约4.56×104粒,平均受精率为82.5%,平均孵化率为63.0%;2014年获得受精卵约8×104粒,平均受精率为85.5%,平均孵化率为62.5%。鱼苗上浮后的开口期和转口期最为重要,为育苗的关键时期。根据秦岭细鳞鲑亲鱼性腺发育的规律,提出了在人工培育过程中,通过加强"冬护、春繁、夏壮、秋养"4个环节,有助于提高精子和卵子质量;在人工培育关键期选择卤虫开口较为适合,在鱼苗消化系统和免疫器官发育完全后选择高蛋白人工配合饲料进行转口,有利于提高鱼苗的成活率。
研究亮点: 目前对秦岭细鳞鲑人工繁育的研究比较零散,没有系统完善的文章叙述。本文通过长年的经验和研究积累,对秦岭细鳞鲑亲鱼培育、人工催产、孵化开口、仔鱼培育等进行了系统化研究和讨论。为秦岭细鳞鲑的繁育研究和养殖生产提供准确科学的基础资料和指导帮助。
关键词秦岭细鳞鲑    人工育苗    催产    驯化    

秦岭细鳞鲑(以下简称细鳞鲑)(Brachymystax lenok tsinlingensis)俗称花鱼[1]、五色鱼、金板鱼、闾花鱼、五色鱼、闾鱼[2]、寒水鱼、梅花鱼和太白雪鱼[3],属于鲑科(Salmonidae)、细鳞鲑属(Brachymystax Günther),是中国特有的冷水性鱼类,由于分布范围狭窄、天然种群稀少[4],加之近年来栖息地环境日益退化,分布区域缩小,已到了濒临灭绝的边缘[5]。杨德国等[6]在秦岭太白段调查发现,当地资源状况已不容乐观。任剑和梁钢[7]在陕西黑河流域调查时发现,该地区细鳞鲑的亲鱼个体趋向小型化,种群数量明显减少。侯峰[8]和王丰[9]对甘肃东部细鳞鲑调查发现其栖息地面积在不断减小,一旦破坏将很难恢复。中国野生动物保护法已将其列为国家二级重点保护水生野生动物[10]。细鳞鲑肉质鲜美,营养丰富[11]。但由于人工养殖尚不成熟,规模化繁育养殖鲜有报道。本文主要探讨细鳞鲑的培育和催产等环节中的技术难点,为细鳞鲑大规模养殖推广提供有关数据和方法指导。

1 材料与方法 1.1 亲鱼培育

由于细鳞鲑群体在垂直分布上表现出高年龄个体多分布于海拔高处的趋势[12],所以试验点选在太白县白云峡细鳞鲑养殖场。在溪流中,捕获细鳞鲑性成熟亲鱼[13],筛选出体质健壮,体型、色泽优良的个体,在池塘或网箱中精心投喂,强化培育[14]。参照张美昭等[15]对花鲈亲鱼培养环节提出的技术研究,根据细鳞鲑性腺发育规律,总结得出“冬护、春繁、夏壮、秋养”4个培育环节。

冬护:冬季由于水温低,亲鱼进食减弱,做好防护,确保亲鱼安全越冬。随时测量进出水口溶解氧含量,防止水面结冰造成缺氧[16],选择高蛋白饲料每天根据亲鱼摄食情况定时适量投喂,避免饲料浪费污染水质。

春繁:细鳞鲑繁殖期比较长,2013年调查发现秦岭南麓(华阳、黄柏塬)细鳞鲑种群繁殖时间大概为3月15日-3月25日;秦岭北麓(白云峡)种群繁殖时间在4月20日-5月10日。主要是地域水温差异所致,经测量,两个地方细鳞鲑繁殖时期区间水温均为9~12 ℃。越冬后的亲鱼体质虚弱,开春后应对亲鱼加强营养,让亲鱼慢慢恢复体质。经常巡塘观察亲鱼的摄食情况及体型变化,准备进行人工催产。

夏壮:夏天水温适合鱼类生长,投喂健康适口的优质饵料不仅有利于细鳞鲑的良好成长,也为产后亲鱼的恢复打好基础。因此整个夏季要抓好生产和管理,做好疾病防控工作,定期消毒投喂药饵。育苗室水温不要超过18 ℃,成鱼养殖水温不能超过22 ℃。同时注意防洪防汛。

秋养:进入秋季,水温开始下降,是亲鱼性腺发育的关键期,选择高蛋白低脂肪饵料进行亲鱼培育,为亲鱼安全越冬做好准备。秋季落叶比较多,适当增加巡塘次数,避免树叶堵塞进水口造成鱼池缺氧。

亲鱼培育要求水质清澈流动,流速2~3 cm/s,水温8~18 ℃,日温差小于3 ℃,pH7.2~8.0,溶氧5.5 mg/L以上,还要做好病害的防治工作。隔半月喂一次药饵(连续3 d)。定期给鱼池泼洒二氧化氯或聚维酮碘,防止细菌性疾病的发生;鱼苗培育期间每周定期消毒,特别注意小瓜虫和三代虫的寄生,遇此情况,可用1%~3%盐水浸泡鱼体1 min[17]或0.5‰浓度的福尔马林溶液药浴10~15 min,连续3~6 d[18]

1.2 人工催产

使用宁波市三生药业有限公司生产的马来酸地欧酮(DOM)和鲑鱼促性腺激素释放激素类似物(S-GnRHa),当亲鱼性腺发育至Ⅳ期中后期时,进行胸腔注射。通过预试验,发现DOM 注射剂量为2.5 mg/kg,S-GnRHa注射剂量为3 μg/kg,3 d后效果明显,对于效果不明显的亲鱼第二次催产药量减半。催产后亲鱼按照雌雄分池放养。

1.3 人工授精

注射激素后,效应期内随时观察亲鱼的活动情况,当腹部膨大松软,表明鱼卵可能已经分离,此时应该挤卵检查。当挤出的卵子大部分圆润、饱满、橙黄,直径在4 mm左右,表示卵子已经成熟,可进行人工授精。

采用人工室内干导法授精[19]。先将雄鱼精液挤入干净的烧杯内,再将成熟雌亲鱼提起,将鱼体擦净,缓缓从胸鳍向尾部推挤腹部,使成熟的卵子流入盛卵器中,如果有粪便等需要用等渗液洗卵,洗完卵后将等渗液滤掉,用吸管吸取适量精液滴入鱼卵,用羽毛轻轻搅拌1~2 min,使精卵混合均匀,再加入少量清水,顺时针方向匀速搅拌30 s后静置1~2 min。然后用清水洗去多余的精液,计数后移入孵化器中孵化。等渗液可参考虹鳟等渗液配方[20],精液用量一般为10毫升配1.2万粒鱼卵。

2 结果 2.1 亲鱼培育与催产情况

2013年3月检查亲鱼,共选出成熟雌鱼68尾、雄鱼32尾。2014年选出成熟雌鱼210尾、雄鱼270尾(表1)。雌鱼外观腹部隆起,生殖孔红肿且稍外突,大部分雄鱼可挤出精液。

表1 2014年亲鱼体长体质量 Tab. 1 The length and weight of parental fish in 2014
2.2 产卵情况

至2013年5月2日采卵结束,共获取受精卵45 600粒,受精率为80.0%,5月26日全部上浮,共孵化仔鱼23 000万尾,孵化率为63.0%。2014年4月底至6月初,每隔2~3 d检查一次亲鱼,共进行了6批次的采卵和授精,获得受精卵8万余粒(表2),出膜仔鱼4.8万余尾,受精率最低为60.5 %,最高为98.5 %,平均约为85.5 %,孵化率约为62.5 %。截至6月底,鱼苗总量为4万余尾。

表2 2014亲鱼产卵数量统计表 Tab. 2 The statistical table of parental fish spawning quantity in 2014
2.3 鱼苗开口和培育

细鳞鲑上浮达到40%后开始慢慢进行开口驯化。选择卤虫作为开口饵料,养殖密度控制在5 000尾/m3[21],投喂量以稚鱼腹部出现微微隆起最好,主要根据观察和经验控制,通过实验发现稚鱼采食率能达到95%以上,驯化效果比较理想。开口后,慢慢加入粉碎的水蚯蚓进行投喂,由于水蚯蚓生长环境污物比较多,因此投喂前必须进行清洗和消毒。人工配合饵料的添加和转口[22]选择在开口后的30 d以后进行最好。

3 讨论 3.1 亲鱼的成熟度检验和催产

本研究的主要内容之一是亲鱼性腺成熟度的检查和如何提高催产率。可以说亲鱼的培育是育苗工作成功的最关键一环,亲鱼培育好了,后期的育苗工作就成功了一半,研究发现细鳞鲑的仔稚鱼对外界病原体的抵御能力应主要依靠自身的非特异性免疫和来自母体的特异性免疫[23]。因此,必须重视亲鱼(母本)阶段培育,进而提高卵子质量,为细鳞鲑早期发育获得有效的免疫保护打好基础,解决稚幼鱼培育成活率不高的难题。为此通过经验总结得出“冬护、春繁、夏壮、秋养”八字措施。

2013年催产中发现,很多亲鱼经过多次催产仍无法产卵,对死亡个体解剖发现,性腺发育还处在Ⅱ期、Ⅲ期,甚至个别还没有发育。这种情况下催产不但不会成功,还会对亲鱼造成反复的伤害,因此亲鱼的培育和筛选很重要。

3.2 催产用激素的种类与剂量

由于细鳞鲑亲鱼性腺发育的不同步性比较大,为促使亲鱼能集中产卵,满足生产性育苗的需求,故需采取适当生理、生态学调控措施,其中以性激素及其类似物进行促熟催产较普遍。有关细鳞鲑促熟催产所用激素的种类,目前还没有统一规范,报道的也不是很多,李勤慎等[24]曾采用哲罗鱼人工催产的方法,进行催产,效果未见说明。2013年我们曾注射激素HCG、LRH-A2进行催产,催熟效果不明显,后来改用DOM和S-GnRHa,用生理盐水稀释混合后胸腔注射,催产效果较为理想,胸腔注射很容易扎到心脏导致亲鱼死亡,因此对注射要求技术比较高。催产后12 h、24 h、48 h各检查一次亲鱼,48 h后可以根据亲鱼情况对未产亲鱼进行第二次注射催产。雄鱼的催产根据情况而定,一般雄鱼性腺成熟比较早,精液易于获取,可以不用催产,后期如果雄鱼精液减少,可以把催产激素剂量减半给雄鱼注射。

3.3 鱼苗开口技术

根据徐革锋等[25]研究发现,上浮一周稚鱼胃固有膜内出现胃腺,30天幽门盲囊分化完毕,肝和胰脏功能完善,因此前期的开口饵料选择很关键,最好选择易于稚鱼扑食且营养丰富的鲜活饵料,如卤虫、轮虫、水蚯蚓等。由于卤虫营养丰富、生产方便、易于鱼苗扑食,所以选择卤虫作为开口饵料较佳。根据徐革锋等对细鳞鲑免疫器官的研究发现[23],细鳞鲑的免疫器官50日龄才发育完善,因此育苗前2个月必须做好疾病防控,定期对稚鱼消毒,同时向饵料中添加适量Vc、Ve等提高稚鱼免疫抵抗力。根据不同温度条件下运动和摄食对细鳞鲑幼鱼代谢模式的影响[26],把水温调整在15~17 ℃,确保幼鱼处在代谢率和生长率最佳的生长条件下。

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Study on parent fish cultivation and artificial propagation of Brachymystax lenok tsinlingensis
LI Ping1, WANG Feng1, 2 , WEN Si'en1, 2    
1. Yellow River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Xi'an 710086, Shaanxi, China;
2. Shaanxi Fisheries Institute, Xi'an 710086, Shaanxi, China
Abstract: The key technologues of Brachymystax lenok tsinlingensis were studied on parent fish domestication, artificial breeding and hatching. The appropriate varieties and dosages of exogenous hormones were explored for promoting maturation and spawning of parent fish. 580 five-to-nine -year -old parental fish were primarily acquired in the wild from March 2011 to March 2014. The results showed that through a 30-day-domesticated feeding Tenebrio molitor, the wild parental fish was totally accustomed to artificial food. And according to the results, treating the fish with exogenous hormone DOM (2.5 mg/kg) and S-GnRHa (3μg/kg) would accelerate the maturation of the parent fish. 4.56×104 eggs and 8×104 eggs were harvested artificially in 2013 and 2014 respectively. The average hatching rate was 63%, and the fertilization rate was 82.5% in 2013. The average hatching rate was 62.5%, and the fertilization rate was 85.5% in 2014. The periods when the fish-fry floated during initial food intake and feed conversion are critical. Based on the gonad development, a postulate-"protecting in winter, propagating in spring, growing in summer, cultivating in autumn" was proposed for the improvement of the quality of sperms and eggs during the artificial cultivation. Artemia was the better choice as initial feed during the period of critical artificial cultivation. Feeding high protein diets would improve survival rate during the period of food conversion after the complete maturation of the digestive and immune systems of the juvenile fish.
Key words: Brachymystax lenok tsinlingensis    artificial breeding    spawning inducement    domestication