2. 中国水产科学院黄河水产研究所, 陕西西安 710086
秦岭细鳞鲑(以下简称细鳞鲑)(Brachymystax lenok tsinlingensis)俗称花鱼[1]、五色鱼、金板鱼、闾花鱼、五色鱼、闾鱼[2]、寒水鱼、梅花鱼和太白雪鱼[3],属于鲑科(Salmonidae)、细鳞鲑属(Brachymystax Günther),是中国特有的冷水性鱼类,由于分布范围狭窄、天然种群稀少[4],加之近年来栖息地环境日益退化,分布区域缩小,已到了濒临灭绝的边缘[5]。杨德国等[6]在秦岭太白段调查发现,当地资源状况已不容乐观。任剑和梁钢[7]在陕西黑河流域调查时发现,该地区细鳞鲑的亲鱼个体趋向小型化,种群数量明显减少。侯峰[8]和王丰[9]对甘肃东部细鳞鲑调查发现其栖息地面积在不断减小,一旦破坏将很难恢复。中国野生动物保护法已将其列为国家二级重点保护水生野生动物[10]。细鳞鲑肉质鲜美,营养丰富[11]。但由于人工养殖尚不成熟,规模化繁育养殖鲜有报道。本文主要探讨细鳞鲑的培育和催产等环节中的技术难点,为细鳞鲑大规模养殖推广提供有关数据和方法指导。
1 材料与方法 1.1 亲鱼培育由于细鳞鲑群体在垂直分布上表现出高年龄个体多分布于海拔高处的趋势[12],所以试验点选在太白县白云峡细鳞鲑养殖场。在溪流中,捕获细鳞鲑性成熟亲鱼[13],筛选出体质健壮,体型、色泽优良的个体,在池塘或网箱中精心投喂,强化培育[14]。参照张美昭等[15]对花鲈亲鱼培养环节提出的技术研究,根据细鳞鲑性腺发育规律,总结得出“冬护、春繁、夏壮、秋养”4个培育环节。
冬护:冬季由于水温低,亲鱼进食减弱,做好防护,确保亲鱼安全越冬。随时测量进出水口溶解氧含量,防止水面结冰造成缺氧[16],选择高蛋白饲料每天根据亲鱼摄食情况定时适量投喂,避免饲料浪费污染水质。
春繁:细鳞鲑繁殖期比较长,2013年调查发现秦岭南麓(华阳、黄柏塬)细鳞鲑种群繁殖时间大概为3月15日-3月25日;秦岭北麓(白云峡)种群繁殖时间在4月20日-5月10日。主要是地域水温差异所致,经测量,两个地方细鳞鲑繁殖时期区间水温均为9~12 ℃。越冬后的亲鱼体质虚弱,开春后应对亲鱼加强营养,让亲鱼慢慢恢复体质。经常巡塘观察亲鱼的摄食情况及体型变化,准备进行人工催产。
夏壮:夏天水温适合鱼类生长,投喂健康适口的优质饵料不仅有利于细鳞鲑的良好成长,也为产后亲鱼的恢复打好基础。因此整个夏季要抓好生产和管理,做好疾病防控工作,定期消毒投喂药饵。育苗室水温不要超过18 ℃,成鱼养殖水温不能超过22 ℃。同时注意防洪防汛。
秋养:进入秋季,水温开始下降,是亲鱼性腺发育的关键期,选择高蛋白低脂肪饵料进行亲鱼培育,为亲鱼安全越冬做好准备。秋季落叶比较多,适当增加巡塘次数,避免树叶堵塞进水口造成鱼池缺氧。
亲鱼培育要求水质清澈流动,流速2~3 cm/s,水温8~18 ℃,日温差小于3 ℃,pH7.2~8.0,溶氧5.5 mg/L以上,还要做好病害的防治工作。隔半月喂一次药饵(连续3 d)。定期给鱼池泼洒二氧化氯或聚维酮碘,防止细菌性疾病的发生;鱼苗培育期间每周定期消毒,特别注意小瓜虫和三代虫的寄生,遇此情况,可用1%~3%盐水浸泡鱼体1 min[17]或0.5‰浓度的福尔马林溶液药浴10~15 min,连续3~6 d[18]。
1.2 人工催产使用宁波市三生药业有限公司生产的马来酸地欧酮(DOM)和鲑鱼促性腺激素释放激素类似物(S-GnRHa),当亲鱼性腺发育至Ⅳ期中后期时,进行胸腔注射。通过预试验,发现DOM 注射剂量为2.5 mg/kg,S-GnRHa注射剂量为3 μg/kg,3 d后效果明显,对于效果不明显的亲鱼第二次催产药量减半。催产后亲鱼按照雌雄分池放养。
1.3 人工授精注射激素后,效应期内随时观察亲鱼的活动情况,当腹部膨大松软,表明鱼卵可能已经分离,此时应该挤卵检查。当挤出的卵子大部分圆润、饱满、橙黄,直径在4 mm左右,表示卵子已经成熟,可进行人工授精。
采用人工室内干导法授精[19]。先将雄鱼精液挤入干净的烧杯内,再将成熟雌亲鱼提起,将鱼体擦净,缓缓从胸鳍向尾部推挤腹部,使成熟的卵子流入盛卵器中,如果有粪便等需要用等渗液洗卵,洗完卵后将等渗液滤掉,用吸管吸取适量精液滴入鱼卵,用羽毛轻轻搅拌1~2 min,使精卵混合均匀,再加入少量清水,顺时针方向匀速搅拌30 s后静置1~2 min。然后用清水洗去多余的精液,计数后移入孵化器中孵化。等渗液可参考虹鳟等渗液配方[20],精液用量一般为10毫升配1.2万粒鱼卵。
2 结果 2.1 亲鱼培育与催产情况2013年3月检查亲鱼,共选出成熟雌鱼68尾、雄鱼32尾。2014年选出成熟雌鱼210尾、雄鱼270尾(表1)。雌鱼外观腹部隆起,生殖孔红肿且稍外突,大部分雄鱼可挤出精液。
|   | 表1 2014年亲鱼体长体质量 Tab. 1 The length and weight of parental fish in 2014 | 
至2013年5月2日采卵结束,共获取受精卵45 600粒,受精率为80.0%,5月26日全部上浮,共孵化仔鱼23 000万尾,孵化率为63.0%。2014年4月底至6月初,每隔2~3 d检查一次亲鱼,共进行了6批次的采卵和授精,获得受精卵8万余粒(表2),出膜仔鱼4.8万余尾,受精率最低为60.5 %,最高为98.5 %,平均约为85.5 %,孵化率约为62.5 %。截至6月底,鱼苗总量为4万余尾。
|   | 表2 2014亲鱼产卵数量统计表 Tab. 2 The statistical table of parental fish spawning quantity in 2014 | 
细鳞鲑上浮达到40%后开始慢慢进行开口驯化。选择卤虫作为开口饵料,养殖密度控制在5 000尾/m3[21],投喂量以稚鱼腹部出现微微隆起最好,主要根据观察和经验控制,通过实验发现稚鱼采食率能达到95%以上,驯化效果比较理想。开口后,慢慢加入粉碎的水蚯蚓进行投喂,由于水蚯蚓生长环境污物比较多,因此投喂前必须进行清洗和消毒。人工配合饵料的添加和转口[22]选择在开口后的30 d以后进行最好。
3 讨论 3.1 亲鱼的成熟度检验和催产本研究的主要内容之一是亲鱼性腺成熟度的检查和如何提高催产率。可以说亲鱼的培育是育苗工作成功的最关键一环,亲鱼培育好了,后期的育苗工作就成功了一半,研究发现细鳞鲑的仔稚鱼对外界病原体的抵御能力应主要依靠自身的非特异性免疫和来自母体的特异性免疫[23]。因此,必须重视亲鱼(母本)阶段培育,进而提高卵子质量,为细鳞鲑早期发育获得有效的免疫保护打好基础,解决稚幼鱼培育成活率不高的难题。为此通过经验总结得出“冬护、春繁、夏壮、秋养”八字措施。
2013年催产中发现,很多亲鱼经过多次催产仍无法产卵,对死亡个体解剖发现,性腺发育还处在Ⅱ期、Ⅲ期,甚至个别还没有发育。这种情况下催产不但不会成功,还会对亲鱼造成反复的伤害,因此亲鱼的培育和筛选很重要。
3.2 催产用激素的种类与剂量由于细鳞鲑亲鱼性腺发育的不同步性比较大,为促使亲鱼能集中产卵,满足生产性育苗的需求,故需采取适当生理、生态学调控措施,其中以性激素及其类似物进行促熟催产较普遍。有关细鳞鲑促熟催产所用激素的种类,目前还没有统一规范,报道的也不是很多,李勤慎等[24]曾采用哲罗鱼人工催产的方法,进行催产,效果未见说明。2013年我们曾注射激素HCG、LRH-A2进行催产,催熟效果不明显,后来改用DOM和S-GnRHa,用生理盐水稀释混合后胸腔注射,催产效果较为理想,胸腔注射很容易扎到心脏导致亲鱼死亡,因此对注射要求技术比较高。催产后12 h、24 h、48 h各检查一次亲鱼,48 h后可以根据亲鱼情况对未产亲鱼进行第二次注射催产。雄鱼的催产根据情况而定,一般雄鱼性腺成熟比较早,精液易于获取,可以不用催产,后期如果雄鱼精液减少,可以把催产激素剂量减半给雄鱼注射。
3.3 鱼苗开口技术根据徐革锋等[25]研究发现,上浮一周稚鱼胃固有膜内出现胃腺,30天幽门盲囊分化完毕,肝和胰脏功能完善,因此前期的开口饵料选择很关键,最好选择易于稚鱼扑食且营养丰富的鲜活饵料,如卤虫、轮虫、水蚯蚓等。由于卤虫营养丰富、生产方便、易于鱼苗扑食,所以选择卤虫作为开口饵料较佳。根据徐革锋等对细鳞鲑免疫器官的研究发现[23],细鳞鲑的免疫器官50日龄才发育完善,因此育苗前2个月必须做好疾病防控,定期对稚鱼消毒,同时向饵料中添加适量Vc、Ve等提高稚鱼免疫抵抗力。根据不同温度条件下运动和摄食对细鳞鲑幼鱼代谢模式的影响[26],把水温调整在15~17 ℃,确保幼鱼处在代谢率和生长率最佳的生长条件下。
| [1] | 陕西省水产研究所,陕西师范大学生物系.陕西鱼类志[M].西安:陕西科学技术出版社, 1992:9-10.Shaanxi Fisheries Institute, Department of Biology Shaanxi Normal University. Fishes of Shaanxi[M]. Xi'an:Shaanxi Science and Technology Press, 1992:9-10. | 
| [2] | 秦勇.秦岭细鳞鲑人工繁殖技术[J].甘肃畜牧兽医, 2014, 44(2):61.QIN Y. Brachymystax lenok artificial breeding technology[J]. Gansu Animal and Veterinary Sciences, 2014, 44(2):61. | 
| [3] | 陈黎.秦岭细鳞鲑人工繁殖技术初探[J].河北渔业, 2013(9):49-50.CHEN L. Brachymystax lenok artificial breeding technology[J]. Hebei Fisheries, 2013(9):49-50. | 
| [4] | 王亚洲.秦岭细鳞鲑种质特性及保护对策[J].家畜生态学报, 2008, 29(1):103-105.WANG Y Z. Species characteristics and Protective Counter measures of Qinling Lenok[J]. Acta Ecologiae Animalis Domastici, 2008, 29(1):103-105. | 
| [5] | 张乾昌,张小虎.秦岭细鳞鲑种质资源与保护[J].中国畜牧兽医文摘, 2013, 29(8):45.ZHANG Q C, ZHANG X H. Germplasm resources protection of Brachymystax lenok[J]. Chinese Abstracts of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, 2013, 29(8):45. | 
| [6] | 杨德国,危起伟,李绪兴,等.秦岭湑水河太白段珍稀水生动物分布现状及保护对策[J].中国水产科学, 1999, 6(3):123-125.YANG D G, WEI Q W, LI X X, et al. The distributing actuality and protecting countermeasure of rare aquatic animals in Xushui River of Qinling mountains[J]. Journal of Fishery Sciences of China, 1999, 6(3):123-125. | 
| [7] | 任剑,梁钢.千河流域细鳞鲑资源调查报告[J].陕西师范大学学报:自然科学版, 2004, 32(S):165-168.REN J, LIANG G. Resource survey report of Brachymystax lenok tsinlingensi in Qianhe River valleys of Qinling mountains[J]. Journal of Shaanxi Normal University:Natural Science, 2004, 32(S):165-168. | 
| [8] | 侯峰.甘肃秦岭细鳞鲑保护生物学研究[D].兰州:西北师范大学, 2009:1-63.HOU F. Study on the conservation biology of Brachymystax lenok tsinlingensis in Gansu province[D]. Lanzhou:Northwest Normal University, 2009:1-63. | 
| [9] | 王丰.秦岭细鳞鲑的研究进展[J].陕西农业科学, 2011(5):181-183.WANG F. Research progress of Brachymystax lenok tsinlingensis[J]. Shaanxi Journal of Agricultural Sciences, 2011(5):181-183. | 
| [10] | 汪松,乐佩琦,陈宜瑜.中国濒危动物红皮书-鱼类[M].北京:科学出版社, 1998:35-37.WANG S, LE P Q, CHEN Y Y. China Red Data Book of Endangered Animals[M]. Beijing:Science Press, 1998, 35-37. | 
| [11] | 郑雪莉,段敏,卜书海,等.秦岭细鳞鲑肌肉营养成分的分析[J].营养学报, 2010, 32(5):516-520.ZHENG X L, DUAN M, BU S H, et al. Analysis of the nutritional components of muscle of Brachymystax lenok from Qinling mountains[J]. Acta Nutrimenta Sinica, 2010, 32(5):516-520. | 
| [12] | 郑雪莉,卜书海,代栓发,等.细鳞鲑在太白山南坡的适应性生长研究[J].西北农林科技大学学报:自然科学版, 2010, 38(3):52-58.ZHENG X L, BU S H, DAI S F, et al. Ecological adaptations of Brachymystax lenok to the south Taibai mountain[J]. Journal of Northwest A&F University:Natural Science, 2010, 38(3):52-58. | 
| [13] | 靳建波,危起伟,孙庆亮,等.茜素络合物浸泡标记秦岭细鳞鲑发眼卵及仔鱼耳石[J].淡水渔业, 2011, 41(2):10-17.JIN J B, WEI Q W, SUN Q L, et al. Alizarin marking of otolith at eyed eggs and larvae stages in Brachymystax lenok tsinlingensis[J]. Freshwater Fisheries, 2011, 41(2):10-17. | 
| [14] | 刘希泰,曹杰英,张子珍,等.野生细鳞鱼池塘驯养及人工繁殖技术研究[J].淡水渔业, 2000, 30(12):3-6.LIU X T, CAO J Y, ZHANG Z Z, et al. Study of captivity and artificial propagation of wild Brachymystax lenok in pond[J]. Freshwater Fisheries, 2000, 30(12):3-6. | 
| [15] | 张美昭,高天翔,阮树会,等.花鲈亲鱼人工培育与催产技术研究[J].青岛海洋大学学报, 2001, 31(2):195-200.ZHANG M Z, GAO T X, RUAN S H, et al. Study on artificial cultivation and spawning inducement technique of Lateolabrax japonicus[J]. Journal of Ocean University of Qingdao, 2001, 31(2):195-200. | 
| [16] | 王高学,周继术,强晓鸣.秦岭细鳞鲑耗氧率和窒息点的初步研究[J].动物学杂志, 2006, 41(2):72-75.WANG G X, ZHOU J S, QIANG X M. Preliminary studies on oxygen consumption rate and suffocated point of Brachymystax lenok tsinlingensis[J]. Chinese Journal of Zoology, 2006, 41(2):72-75. | 
| [17] | 刘霞,崔存河,吕延玲.细鳞幼鱼小瓜虫病的防治[J].科学养鱼, 2011, (5):55.LIU X, CUI C H, LV Y L. The prevention and control of Ichthyophthirius multifiliis disease Brachymystax lenok Pallas juvenile[J]. Scientific Fish Farming, 2011, (5):55. | 
| [18] | 李海波,李壮.细鳞鱼几种常见病的诊断与防治[J].科学养鱼, 2013(3):60.LI H B, LI Z. Diagnosis and treatment of several common diseases of Brachymystax lenok[J]. Scientific Fish Farming. 2013(3):60. | 
| [19] | 范兆廷,姜作发,韩英.冷水性鱼类养殖学[M].北京:中国农业出版社, 2008:85-85.FAN Z T, JIANG Z F, HAN Y. Cold water fishes aquaculture science[M]. Beijing:Chinese Agriculture Press, 2008:85-85. | 
| [20] | 沈希顺,叶远涛.虹鳟鱼实用养殖技术[M].北京:台海出版社, 2000:47-48.SHEN X S, YE Y T. Rainbow trout aquaculture technology practical[M]. Beijing:Taihai Press, 2000:47-48. | 
| [21] | 孙庆亮,危起伟,薛超,等.养殖密度对秦岭细鳞鲑稚鱼生长的影响[C]//中国海洋湖沼学会鱼类学分会、中国动物学会鱼类学分会2012年学术研讨会.兰州:中国海洋湖沼学会, 2012:188-189.SUN Q L, WEI Q W, XUE C, et al. Effect of stocking density on growth of Brachymystax lenok tsinlingensis juvenile[C]//Chinese Society for Oceanology and Limnology and China Zoological Society In 2012 the Symposium on Assembly.Lanzhou:Chinese Society for Oceanology and Limnology. 2012:188-189. | 
| [22] | 杨小刚,王丰,陈黎.秦岭细鳞鲑较高温度下仔稚鱼培育[J].陕西水利, 2012, (1):151-152.YANG X G, WANG F, CHEN L. Brachymystax lenok tsinlingensis larvae cultivation under high temperature[J]. Shaanxi Water Resources, 2012, (1):151-152. | 
| [23] | 徐革锋,刘洋,牟振波,等.细鳞鲑早期发育过程中免疫器官发生[J].中国水产科学2012, 19(4):568-576.XU G F, LIU Y, MOU Z B, et al. Ontogeny of immune organs during early developmental stages of Brachymystax lenok[J]. Journal of Fishery Sciences of China, 2012, 19(4):568-576. | 
| [24] | 李勤慎,秦勇,张崇信,等.秦岭细鳞鲑人工繁殖及鱼苗培育技术[J].中国水产, 2013(4):55-56.LI Q S, QIN Y, ZHANG C X, et al. Brachymystax lenok tsinlingensis artificial breeding and fish cultivation technique[J]. China Fisheries, 2013(4):55-56. | 
| [25] | 徐革锋,刘洋,李永发,等.细鳞鲑早期发育过程中的消化系统发生[J].中国水产科学, 2013, 20(4):733-742.XU G F, LIU Y, LI Y F, et al. Organogenesis of the digestive system in Brachymystax lenok during early development[J]. Journal of Fishery Sciences of China, 2013, 20(4):733-742. | 
| [26] | 徐革锋,王裕玉,韩英,等.不同温度条件下运动和摄食对细鳞鲑幼鱼代谢模式的影响[J].应用生态学报, 2014, 25(4):1156-1162.XU G F, WANG Y Y, HAN Y, et al. Effect of locomotion and feeding on metabolic mode of juvenile lenok, Brachymystax lenok (Pallas) under different water temperatures[J]. Chinese Journal of Applied Ecology, 2014, 25(4):1156-1162. | 
2. Shaanxi Fisheries Institute, Xi'an 710086, Shaanxi, China
 2015, Vol. 24
 2015, Vol. 24 
  


