Fe是鱼类必需的微量元素之一，在鱼体内具有多种生理作用。例如Fe是鱼体血红蛋白的重要组成成分，参与氧气的运输，同时也是细胞色素、过氧化氢酶的重要组成成分,在氧化还原反应中起传递氢的作用。Fe在鱼类免疫活动过程中也起到了重要的作用，能调节鱼类的非特异性免疫反应。团头鲂(Megalobrama amblycephala)隶属鲤形目(Cypriniformes)，鲤科(Cyprinidae)，鳊亚科，鲂属(Megalorama),是我国重要的淡水经济鱼类之一。关于鱼类对饲料中Fe需要量的研究，王辉亮等^[1]报道了黑鲷(Sparus macrocephlus)对Fe的需要量为89 mg/kg。黄耀桐和刘永坚^[2]研究了草鱼(Ctenopharyngodon idellus)对Fe的适宜添加量为900 mg/kg。陈冬梅和刘维德^[3]认为鲤鱼(Cyprinus carpio)对Fe的最适需要量为141.7 mg/kg。蒋蓉^[4]的研究表明黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)饲料中Fe的最适添加量为80 mg/kg。本研究主要通过养殖实验，在实验结束时通过测定团头鲂生长、形体骨骼指标、常规体成分、蛋白沉积率、脂肪沉积率的含量，确认团头鲂饲料中Fe的需要量。

团头鲂(Megalobrama amblycephala)为浙江一星饲料集团海盐实验基地池塘养殖1冬龄鱼种，实验团头鲂初始平均体重为50 g,经2周暂养、驯化后，选择体格健壮、规格整齐的鱼种400尾，随机分成5组，每组设4个重复，每个重复放20尾鱼。

以酪蛋白、秘鲁鱼粉、豆油、糊精、淀粉和纤维素为原料配置半纯化饲料，以FeSO₄·H₂O(四川龙蟒钛业股份有限公司，饲料级)为Fe源，分别添加0、0.4、0.8、1.2、1.6 g/kg FeSO₄·H₂O，饲料中无机Fe补充量分别为0、120、240、360、480 mg/kg的5种半纯化饲料，实验饲料组成及营养水平见表1。饲料原料经粉碎过60目筛，混合均匀后加适量水搅拌，

用小型面条加工机加工成1.5 mm粗细的条状料，电风扇吹干后再手工搓碎，筛选2~3 mm长的颗粒饲料置于冰箱中，-20 ℃密封保存。

表1(Tab. 1)

表1 实验饲料组成及营养水平Tab. 1 Composition and nutrient levels of experimental diets ‰ 原料material Fe 组别/(mg/kg) Fe Group 0 120 240 360 480 酪蛋白 casein 213 213 213 213 213 秘鲁进口蒸汽鱼粉 fish meal 205 205 205 205 205 磷酸二氢钙 Ca(H2PO4)2·H2O 30 30 30 30 30 豆油 soybean oil 50 50 50 50 50 大豆磷脂 soy lecithin 10 10 10 10 10 氯化胆碱 choline chloride 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 维生素预混料 vitamin premix1 1 1 1 1 1 矿物质预混料 mineral premix2 5 5 5 5 5 糊精 dextrin 100 100 100 100 100 α-淀粉 α-starch 255 255 255 255 255 微晶纤维素 microcrystalline cellulose 29.5 29.1 28.7 28.3 27.9 羧甲基纤维素carboxymethyl cellulose 100 100 100 100 100 ZnSO4·H2O(Zn 34.4%) 0 0.4 0.8 1.2 1.6 合计 1 000 1 000 1 000 1 000 1 000 营养水平 nutrient levels3 粗蛋白 CP/% 31.42 31.32 32.47 31.76 31.93 粗脂肪 EE/% 9.56 9.58 9.61 9.63 9.59 灰分 ash/% 8.11 8.12 8.32 7.99 8.09 钙 calcium content 1.05 1.06 1.11 1.15 1.09 磷 phosphor content 1.81 1.99 1.85 1.90 1.91 注：1. 维生素预混料为每千克日粮提供VA 10 mg；VB1 8 mg；VB2 8 mg；VB6 20 mg；VB12 0.1 mg；VC 250 mg；泛酸钙 20 mg；烟酸 25 mg；VD3 4 mg；VK3 6 mg；叶酸 5 mg；肌醇 100 mg。2. 矿物质预混料为每千克日粮提供Cu 4 mg； Mn 30 mg；Zn 120 mg；I 0.65 mg；Se 0.5mg；Co 0.17 mg；Mg 300 mg，Fe按照各实验组设计。3. 实测值。 1. The vitamin premix provided following for per kg of feedVA 10 mg；VB1 8 mg；VB2 8 mg；VB6 20 mg；VB12 0.1 mg；VC 250 mg；calcium pantothenate 20 mg；niacin 25 mg；VD3 4 mg；VK3 6 mg；folic acid 5 mg；inositol 100 mg .2. The Mineral premix provided following for per kg of feed Cu 4 mg； Mn 30 mg；Zn 120 mg；I 0.65 mg；Se 0.5mg；Co 0.17 mg；Mg 300 mg.3. Measured values．

表1 实验饲料组成及营养水平 Tab. 1 Composition and nutrient levels of experimental diets

各实验组饲料Fe含量的实测值分别是391.40、492.29、585.98、681.85、776.46 mg/kg。因此，对饲料Fe补充量与实际测定值进行分析，得到饲料中总Fe含量(y)与饲料中Fe的补充量(x)之间的关系式是：y=0.7997x+393.66，R²=0.9999。

养殖实验在5个667 m²的池塘网箱(网箱规格为1 m×1 m×1.5 m)中进行，以海盐县长山河河水为水源，池塘中设置两台1.5 kW叶轮式增氧机，每天运行8 h。日投喂2次，每天8:00、15:00定时投喂，日投喂量为鱼体重的3%～5%。每两周根据估算的鱼体重增加量调整投喂量。整个养殖实验期间，随季节变化，池塘水温逐渐升高，水温日变化趋势见图1。养殖实验期间，水温21～32.9 ℃、溶氧>7.0 mg/L、pH 7.0～7.4、 氨氮0.20～0.30 mg/L、硫化物<0.05 mg/L。正式养殖实验共计43 d。

图1(Fig.1)

图1 水温日变化曲线图 Fig.1 Daily variation of water temperature

养殖过程中，每10天从塘口取5份水样，采用原子吸收分光光度计(型号 GGX-9，北京海光仪器公司)测定水体中Fe、Cu、Mn、Zn的含量^[11]，结果见表2。通过单因素方差分析得出各实验组间无显著性差异(P>0.05)，水体微量元素含量远小于饲料中微量元素的含量，所以可以认为水体中Fe、Cu、Mn、Zn含量对于鱼体饲料中微量元素吸收利用率的影响很小，故认为水体Fe、Cu、Mn、Zn对鱼体吸收无影响。

表2(Tab. 2)

表2 养殖水体Fe、Cu、Mn、Zn、Mg含量Tab. 2 Content of Fe,Cu,Mn,Zn in breeding aquatics water mg/10L 组别/(mg/kg)group Fe实测值/(mg/kg) values of Fe Fe Cu Mn Zn 0 391.40 0.32± 0.03 0.30± 0.03 0.03± 0.01 0.35± 0.06 120 492.29 0.32± 0.05 0.29± 0.04 0.03± 0.01 0.36± 0.07 240 585.98 0.31± 0.01 0.30± 0.02 0.02± 0.02 0.37± 0.02 360 681.85 0.33± 0.02 0.31± 0.05 0.02± 0.03 0.37± 0.03 480 776.46 0.33± 0.05 0.30± 0.04 0.03± 0.02 0.36± 0.05

表2 养殖水体Fe、Cu、Mn、Zn、Mg含量 Tab. 2 Content of Fe,Cu,Mn,Zn in breeding aquatics water

饲养实验结束时，统计每个重复实验的饲料日摄入量。禁食24 h后称量每个养殖网箱鱼体总重和计数鱼尾数，计算成活率、增重率、饲料系数；随机从每个养殖网箱里抽取6尾鱼测量体长、体重、鳞片重、脊椎骨重、脊椎骨长，计算肥满度、特定生长率、体重/体长、鳞片重/体重。开水剥离鱼肉等其他部分，留取脊椎骨，用水冲洗干净，纸巾吸干水分，测量长度并称重，以长度比、重量比判断主轴骨骼生长情况，计算脊椎骨长/体长、脊椎骨重/体重。解剖取内脏团称重，计算内脏指数。计算公式如下：

采用常规的解剖方法获取肝胰脏、肌肉、全鱼用于测量鱼体常规体成分。采用105 ℃常压干燥法测定饲料、鱼体水分含量，凯氏定氮法测定粗蛋白质含量，索氏抽提法测定粗脂肪含量，高温消化炉550 ℃灼烧法测定粗灰分含量，分光光度法测定磷含量，乙二胺四乙二酸二钠滴定法测定钙含量。上述测定步骤均参照AOAC(1995)规定的方法进行。

实验数据用“平均值±标准差”表示，实验结果用SPSS 17.0软件进行统计分析，在One-Way ANOVA进行方差分析的基础上采用Duncan’s多重比较检验组间差异，实验数据表中同列上标为不同小写字母者表示有显著差异。以P<0.05表示差异显著。根据特定生长率、饲料系数、蛋白沉积率、脂肪沉积率的数据，采用一元三次模型分析团头鲂对饲料中Fe的需求量。

经过43 d的养殖实验，饲料Fe补充量对团头鲂生长速度和饲料系数的影响结果见表3。补充不同浓度的Fe对团头鲂鱼体的生长产生了不同的影响。当饲料中Fe补充量从0 mg/kg增加到120 mg/kg时，末体重和增重率均显著上升(P<0.05)、饲料系数显著下降(P<0.05)，从120 mg/kg增加到480 mg/kg时，末体重、增重率显著下降(P<0.05)、饲料系数显著上升(P<0.05)。团头鲂的特定生长率也随着饲料中Fe补充量的增加呈先升后降的趋势，120 mg/kg组的特定生长率显著高于0、360、480 mg/kg 3个组(P<0.05)。成活率在各组之间无显著性差异(P>0.05)。

表3(Tab. 3)

表3 饲料Fe含量对团头鲂生长性能的影响Tab. 3 Effects of dietary Fe content on growth performance of bluntnose black bream 组别/(mg/kg)group Fe实测值/(mg/kg)values of Fe 初体重/gIBW 末体重/gFBW 增重率/%WGR 成活率/%SR 饲料系数FCR 特定生长率/(%/d)SGR 0 391.40 50.15±0.24 105.15±1.58c 109.73±2.19c 98.75±2.17 1.95±0.04a 1.72±0.03c 120 492.29 49.90±0.29 112.45±3.57a 125.30±6.12a 100.00±0.00 1.71±0.08c 1.89±0.06a 240 585.98 50.08±0.29 110.03±1.18ab 119.70±2.15ab 100.00±0.00 1.78±0.03bc 1.83±0.02ab 360 681.85 50.13±0.33 107.63±1.46bc 114.70±2.51bc 98.75±2.17 1.87±0.04ab 1.78±0.03bc 480 776.46 49.85±0.37 104.50±3.62c 109.68±8.76c 100.00±0.00 1.94±0.15a 1.72±0.10c 注：同一列中上标为相同字母者表示差异不显著；上标为不同字母者表示差异显著(P<0.05)，显著水平为 α=0.05，表4、5同。

表3 饲料Fe含量对团头鲂生长性能的影响 Tab. 3 Effects of dietary Fe content on growth performance of bluntnose black bream

采用一元三次模型分析饲料Fe补充量、Fe总量与团头鲂饲料系数、特定生长率之间的关系(图2,3)。特定生长率的回归方程为y=0.0188x³-0.2x² + 0.6187x + 1.2885，R²=0.9589，计算得到当具有最大特定生长率时饲料中添加的Fe为124.55 mg/kg，依据饲料中补充Fe与饲料中总Fe的关系式(y=0.7997x + 393.66)，计算得到此时饲料中总的Fe含量为493.26 mg/kg。

图2(Fig.2)

图2 饲料Fe补充量(x)与饲料系数(y)的关系 Fig.2 Relationship between dietary Fe recruitment content (x) and FCR(y) of bluntnose black bream

图3(Fig.3)

图3 饲料Fe补充量(x)与特定生长率(y)的关系 Fig.3 Relationship between dietary Fe recruitment content (x) and SGR(y) of bluntnose black bream

饲料系数与饲料中补充的Fe含量的回归方程为y = -0.0269x³ + 0.2876x² - 0.893x + 2.573，R²= 0.9699。计算得到当具有最小饲料系数时饲料中补充的Fe为130.18 mg/kg，依据饲料中补充Fe与饲料中总Fe的关系式(y=0.7997x + 393.66)，计算得到此时饲料中总的Fe含量为497.76 mg/kg。

因此，经回归分析得出，当饲料Fe补充量为124.55~130.18 mg/kg时，此时饲料中Fe实际含量为493.26~497.76 mg/kg，团头鲂生长效果最好。该实验中，团头鲂日均摄食量为5.10 g/100g体重，因此饲料Fe日均添加量为0.64~0.66 mg/100g体重时(饲料Fe日均总量为2.52~2.54 mg/100g体重)团头鲂可获得最大生长。

实验结束后，测定鱼体肥满度、内脏指数、体重/体长、脊椎骨长/体长、脊椎骨重/体重、鳞片重/体重来反映饲料中Fe含量对团头鲂形体、骨骼的影响，结果见表4。方差分析结果显示，各实验组间鱼体的肥满度、内脏指数、体重/体长、脊椎骨重/体重、鳞片重/体重均无显著性差异(P>0.05)。0 mg/kg组团头鲂的脊椎骨长/体长显著低于120 mg/kg组(P<0.05)。随着添加Fe浓度的增加，鱼体内脏指数呈逐渐上升的趋势；脊椎骨长/体长、鳞片重/体重呈先上升后下降的趋势并在120 mg/kg组达到最大值。各实验组间肥满度不受不同Fe补充量的影响。

表4(Tab. 4)

表4 饲料Fe含量对团头鲂形体指标的影响Tab. 4 Effects of dietary Fe content on body index of bluntnose black bream 组别/(mg/kg)group Fe实测值/(mg/kg)values of Fe 肥满度/%fatness 体重/体长weight/bodylength 脊椎骨长/体长the length of spine/body length 脊椎骨重/体重the weight of spine/weight 鳞片重/体重the weight ofscale/ weight 内脏指数/%visceral index 0 391.40 2.15±0.05 6.66±0.36 0.67±0.02b 0.031±0.004 0.077±0.004 5.15±0.41 120 492.29 2.14±0.06 6.58±0.21 0.70±0.01a 0.030±0.001 0.082±0.003 5.17±0.39 240 585.98 2.20±0.09 6.44±0.47 0.69±0.03ab 0.029±0.002 0.082±0.009 5.25±0.76 360 681.85 2.14±0.05 6.53±0.15 0.69±0.01ab 0.031±0.002 0.081±0.006 5.36±0.29 480 776.46 2.21±0.02 6.62±0.37 0.68±0.02ab 0.028±0.002 0.078±0.006 5.41±0.17

表4 饲料Fe含量对团头鲂形体指标的影响 Tab. 4 Effects of dietary Fe content on body index of bluntnose black bream

上述结果显示，随着饲料Fe补充量的增加，团头鲂脊椎骨长/体长增加。表明，饲料Fe对团头鲂鱼体脊椎骨的生长有促进作用。

饲料Fe补充量对团头鲂体成分、蛋白沉积率、脂肪沉积率的影响结果见表5。由表可知，全鱼粗脂肪含量显著受到饲料中不同Fe水平的影响(P<0.05)，0 mg/kg组全鱼粗脂肪含量显著低于其他4组(P<0.05)；肌肉、肝胰脏粗脂肪含量差异不显著(P>0.05)；全鱼、肌肉、肝胰脏粗蛋白含量在各组间差异不显著(P>0.05)。团头鲂蛋白沉积率、脂肪沉积率随着饲料中Fe含量的增加呈先升后降的趋势，120 mg/kg组的蛋白沉积率、脂肪沉积率显著高于其他四组(P<0.05)，显示饲料中Fe添加量为120 mg/kg时，饲料总Fe含量为492.29 mg/kg，团头鲂的蛋白脂肪沉积率在5个组别中最优。

表5(Tab. 5)

表5 饲料Fe含量对团头鲂体组成的影响(干重基础)Tab. 5 Effects of dietary Fe content on body composition of bluntnose black bream (dry weight basis) % 组别/(mg/kg)group Fe实测值/(mg/kg)values of Fe 粗蛋白CPcrude protein 粗脂肪EEcrude fat 蛋白沉积率protein deposition rate 脂肪沉积率全鱼 fat deposition rate 全鱼whole fish 肌肉muscle 肝胰脏hepatopancreas 全鱼whole fish 肌肉muscle 肝胰脏hepatopancreas 全鱼whole fish 全鱼whole fish 0 391.40 62.42±3.53 88.64±0.87 61.21±0.73 30.15±1.77b 8.11±0.12 29.74±1.41 93.52±2.08c 162.28±2.18c 120 492.29 64.46±3.94 87.86±1.28 60.26±1.50 31.45±0.99a 7.85±0.36 28.77±1.10 115.62±1.58a 199.64±3.42a 240 585.98 64.27±2.97 89.27±0.64 61.20±2.69 31.22±0.41a 8.01±0.88 28.49±0.78 105.47±1.79b 187.54±5.18b 360 681.85 60.71±0.69 87.63±1.55 61.52±1.45 31.23±0.74a 7.46±0.48 29.00±0.41 91.76±3.47c 179.54±2.87bc 480 776.46 61.32±3.34 88.40±1.59 61.85±1.32 31.87±0.54a 8.10±1.58 28.77±1.23 89.32±0.85c 180.50±1.47bc

表5 饲料Fe含量对团头鲂体组成的影响(干重基础) Tab. 5 Effects of dietary Fe content on body composition of bluntnose black bream (dry weight basis)

采用一元三次模型分析饲料Fe补充量、Fe总量与团头鲂蛋白沉积率、脂肪沉积率之间的关系。蛋白沉积率的回归方程为：y=3.6267x³-25.52x²+43.003x+93.718，R²= 0.9944，计算得到当具有最大蛋白沉积率时饲料中添加的Fe为126.34 mg/kg，此时饲料中总的Fe含量为494.69 mg/kg。脂肪沉积率与饲料中补充的Fe含量的回归方程为：y=4.8683x³-34.117x²+63.13x+162.98，R² = 0.9542。计算得到当具有最大脂肪沉积率时饲料中补充的Fe为128.44 mg/kg，此时饲料中总的Fe含量为496.37 mg/kg。

因此，当饲料Fe补充量为126.34~128.44 mg/kg时，此时饲料中Fe实际含量为494.69~496.37 mg/kg，团头鲂蛋白、脂肪沉积率最高。该实验中，团头鲂日均摄食量为5.10 g/100g体重，因此饲料Fe日均添加量为0.65~0.66 mg/100g体重时(饲料Fe日均总量为2.53~2.54 mg/100g体重)团头鲂蛋白、脂肪沉积率最高。

本实验采用了半纯化饲料的配方方案，主要是尽量减少饲料原料中不同矿物质元素对实验中Fe不同水平的干扰，养殖实验则在池塘网箱中进行，可以更接近实际养殖环境，尽可能满足实验鱼类对实际生理、生长条件的需要。鱼类具有从水体中直接吸收可溶解的矿物质的能力，对本实验的实验元素Fe虽然有一定的影响，但由于本实验池塘水体中矿物质元素的含量均低，影响程度较小；同时，这也反映了实际养殖水域环境状况。

本实验结果表明，在基础饲料和实验条件相同的情况下，补充不同水平的Fe对团头鲂生长性能有显著性影响(P<0.05)。适当地补充Fe能促进团头鲂的生长。黄耀桐和刘永坚^[2]研究了草鱼Fe的适宜添加量为900 mg/kg，他们认为草鱼不能够利用鱼粉和植物原料中的Fe。佐藤秀一^[5]认为在鲤鱼中Fe的适宜添加量为150 mg/kg，陈冬梅和刘维德^[3]的研究发现鲤鱼Fe的最适需要量为141.7 mg/kg。魏万权^[6]研究了牙鲆(Paralichthys olivaceus)幼鱼中适宜Fe的添加量是50 mg/kg，此时饲料中Fe总含量是373 mg/kg，当最大Fe添加量达到140 mg/kg时(饲料总Fe量453 mg/kg)未产生毒性，只是牙鲆生长率降低。GATLIN^{[7, 14, 15]}研究发现饲料Fe添加量在20 mg/kg时斑点叉尾鮰(Ietalurus punetaus)维持最适血液学指标，认为斑点叉尾鮰日粮中Fe的需求量在30 mg/kg左右。蒋蓉^[4]提出黄颡鱼饲料中Fe的适宜补充量是80 mg/kg，此时相应的饲料中Fe总量为840.53 mg/kg。说明不同鱼类对Fe的需求量有一定的差异。此外，PARK和SHIMIZA^{[8, 12, 13]}用添加Fe为100 mg/kg，饲料中总Fe含量为880 mg/kg的饲料饲喂幼鳗，其生长未受到不利影响。

随着饲料中Fe含量的增加，团头鲂蛋白沉积率、脂肪沉积率呈先升后降的趋势，120 mg/kg组的蛋白沉积率、脂肪沉积率显著高于其他4组(P<0.05)。由于铁对鱼体蛋白、脂肪沉积率影响的研究结果偏少，并未查阅到相关文献资料。

本实验中，依据饲料Fe补充量、Fe总量与团头鲂饲料系数、特定生长率之间的关系，得到实验条件下团头鲂最佳生产时的饲料中无机Fe补充量为124.55~130.18 mg/kg，而对饲料中总Fe需要量为493.26~497.76 mg/kg。实验期间团头鲂日均摄食量为5.10 g/100g，因此，采用100 g体重每日需要量表示，团头鲂饲料中无机Fe补充量为0.64~0.66 mg/100g，对饲料总Fe需要量为2.52~2.54 mg/100g。

依据团头鲂鱼体蛋白质沉积率、脂肪沉积率与饲料中Fe含量的关系，得到团头鲂饲料无机Fe添加量为126.34~128.44 mg/kg(饲料中总Fe实际含量为494.69~496.37 mg/kg)，饲料Fe日需要总量在2.53~2.54 mg/100g。因此，团头鲂获得最大蛋白质和脂肪沉积率时，对饲料中补充的无机Fe、总Fe需要量在上述以特定生长率、饲料系数确认的对饲料Fe需要量的区间内，建议采用上述依据团头鲂生长速度、饲料系数确认的对饲料Fe需要量作为团头鲂对饲料Fe的需要量。

Fe元素除了与鱼类的生长性能有关外，还与鱼类骨骼系统的生长和发育有关，对鱼类正常形体的维持有重要作用。如何确认饲料微量元素与鱼体生长的关系，一直没有很好的评价指标，本实验以肥满度、内脏指数、体重/体长、脊椎骨长/体长、脊椎骨重/体重、鳞片重/体重等指标来反映Fe对团头鲂形体和骨骼的影响。团头鲂随着饲料中Fe补充量的增加，脊椎骨长/体长、鳞片重/体重呈先升后降的趋势，体重/体长呈先降后升的趋势，内脏指数逐渐上升，其中0 mg/kg组的脊椎骨长/体长显著低于120 mg/kg组(P<0.05)。郭建林等^[9]研究表明随着饲料中补充Fe的增加，异育银鲫(Carassius auratus)的体长生长大于体重生长。蒋蓉等^[4]在对黄颡鱼的研究中表明，Fe的增加对鱼体肥满度增长有利。王友慧等^[10]研究表明Fe的增加可使体长/体重比增加。相关研究也证明缺Fe会导致鱼体生长迟缓、骨骼畸形和高死亡率。本实验结果表明缺Fe会导致骨骼生长迟缓，适度补充Fe元素可以促进鱼体骨骼的生长发育；鱼体脊椎骨长度增长与饲料补充的Fe含量显示出正相关关系。

对体重为50 g的池塘养殖团头鲂，在平均日投饲量为5.10 g/100g体重时，饲料中无机Fe补充量为124.55~130.18 mg/kg、饲料总Fe含量为493.26~497.76 mg/kg时生长最好，此时团头鲂对饲料总Fe日需要量为 2.52~2.54 mg/100g体重。饲料Fe的补充，有利于团头鲂脊椎骨的生长。