猕猴桃Actinidia chinensis是呼吸跃变型浆果，后熟软化进程迅速，常温下容易软化腐烂，贮藏性差。果实的呼吸速率和乙烯的释放在后熟期间随硬度的下降而增加，果实出现乙烯峰和呼吸峰后，很快软化，失去耐贮性，有“七天软，十天烂，半月坏一半”的说法，给销售、加工等带来很大困难，严重制约了猕猴桃的产业化发展，因此对猕猴桃果实的采后保鲜研究具有重要的理论意义和实际生产价值^[1]。国内外专家学者尝试采用多种方法以抑制猕猴桃果实乙烯峰的出现，延长其贮藏期，目前保鲜效果较好且已经商业化使用的保鲜剂主要是1-甲基环丙烯(1-MCP)^{[1, 2]}。

目前，天然源防腐保鲜剂以其绿色环保、低毒、无污染的优点成为了国内外学者研究的热点。据报道，壳聚糖^[3]、改性魔芋甘露聚糖^[4]、石榴皮提取物^[5]、丁香提取物^[6]和肉桂提取物^{[7, 8]}等对果蔬都具有较好的保鲜效果。茶籽油(tea seed oil)又称茶树籽油，来源于茶树Camellia sinensis (L.) O.Kuntze.籽，是茶产业中的副产品，富含油酸、亚油酸及生育酚、角鲨烯等天然成分，可食用。其活性成分为茶多酚(tea polyphenols，TP)，是一类存在于茶籽油中的多元酚混合物，统称类黄酮化合物，安全无毒，是目前不能人工合成的天然抗氧化剂，对食品具有良好的保鲜、抗氧化性，并且具有抑菌、抗肿瘤、抗辐射等多种功效，在生物医药、食品工业及日用化工等领域具有十分广阔的应用前景^[9]。研究表明，茶多酚对玉米小斑病菌、香蕉炭疽病菌、稻瘟病菌和莲腐败病菌等植物病原真菌生长和分生孢子萌发具有极显著的抑制作用^[10]；在冷藏条件下茶多酚对鱼的保鲜效果良好，具有很好的抗菌和抗氧化作用，可明显延缓鱼的腐败变质^{[11, 12]}。目前国内外对于茶多酚的研究主要以其药理、病理、毒理学以及茶多酚的保颜、食品保鲜及除臭作用为主^[13]，有关其对果蔬保鲜作用的研究尚未见报道。本研究系统测定了茶籽油对猕猴桃的保鲜效果，以期为茶籽油果蔬保鲜剂的开发提供依据。

供试猕猴桃品种为“秦美”，采购于陕西省杨凌区五泉镇。果实于成熟期在下午太阳落山后采收，挑选大小均一，无病虫害、无机械损伤的猕猴桃，当天运回西北农林科技大学无公害农药研究服务中心冷库中预冷，于0～2 ℃条件下贮藏，备用。

茶籽油购自广东广州恒信香料有限公司，低温冷榨精炼而成,淡黄色，主要成分为油酸、亚油酸及茶多酚等，其中茶多酚含量为40.13 mg/kg，密封避光贮藏；4%的1-甲基环丙烷(1-MCP)粉剂，由美国陶氏化学(中国)公司提供；聚乙烯袋(75 cm×130 cm，0.03 mm)，河北雄县鑫顺塑料厂生产。

FT327型果实硬度计(意大利Breuzzi公司)；YS-0983全自动酸碱滴定仪(长沙凯斯恩电子科技有限公司)；UV1102紫外分光光度计(上海天美科学仪器有限公司)；EC71电导率测定仪(美国Hach公司)；TEL-7001红外CO\-2分析仪测定(美国通用电气公司)；GC-14A型气相色谱仪、GDX-502色谱柱和氢火焰离子化检测器(日本岛津公司)。

准确量取5 mL茶籽油，用1 mL无水乙醇稀释，加入0.4 mL吐温-80，摇匀后加水定容至20 mL，配成2.5×10⁵μL/L的母液，使用时再用水稀释至试验所需浓度。

茶籽油处理共设500、250、125和62.5 μL/L 4个水平；同时以1-MCP(0.25 μL/L)为药剂对照(1-MCP)、清水处理为空白对照(CK)。将猕猴桃果实在药液中浸泡3 min(1-MCP处理为密封熏蒸24 h)，取出自然晾干后置于厚度为0.03 mm的聚乙烯袋中保湿并扎口；每处理(袋)120个果实，重复3次，处理后置于13～15 ℃条件下贮藏，袋内相对湿度80%～90%。贮藏期间每隔10 d随机取样测定各项生理生化指标，50 d时停止测定。

失重率/%=(处理后总质量/处理前总质量)×100；坏果率/%=(坏果个数/总果数)×100；软果率/%=(软果及坏果个数/总果数)×100。

果实硬度采用FT327型硬度计(探头直径0.5 cm)测定：在果实最大的横径处切去约0.5 cm²果皮后测定，每次测10个果实，去掉最大值和最小值后取平均值；可溶性固形物(SSC)含量采用手持测糖仪测定，每次取10个果实，去掉最大值和最小值后，取平均值；可滴定酸含量(TA)采用酸碱滴定法^[14]测定；糖酸比=SSC/TA；Vc含量测定采用钼蓝比色法^[15]。

超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性测定参考李忠光等^[16]的方法；过氧化物酶(POD)活性测定参照MacAdam等^[17]的方法。

相对电导率测定参照赵世杰等^[18]的方法；丙二醛(MDA)含量测定参照Jiang^[19]的方法。

呼吸强度参考董晓庆等^[20]的方法,采用TEL-7001红外CO₂分析仪测定；乙烯释放速率采用岛津GC-14A型气相色谱仪法测定^[21]：GDX-502色谱柱，柱温70 ℃，氢气0.7 kg/cm²，空气0.7 kg/cm²，氮气1.0 kg/cm²，氢火焰离子化检测器检测，检测室温度110 ℃。

数据采用SAS软件统计分析，t检验法(α=0.05)对相关指标进行差异显著性分析。

结果(表 1)表明：在13～15 ℃条件下贮藏50 d后，与1-MCP和CK相比，500 μL/L的茶籽油处理对猕猴桃采后保鲜效果最好。

表 1 (Table 1)

表 1 茶籽油处理对采后猕猴桃感观指标的影响 Table 1 Effect of tea seed oil on sensory quality of postharvested‘Qinmei' kiwifruit 处理 Treatment 浓度 Concentration/(μL/L) 失重率 Weight loss rate/% 软果率 Soften fruit rate/% 坏果率 Bad fruit rate/% CK — 8.70±0.11 a 35.42±0.19 b 26.28±0.17 b 1-MCP 0.25 9.11±0.12 a 17.96±0.23 e 8.24±0.13 d 茶籽油 Tea seed oil 500 3.36±0.23 b 16.04±0.11 f 6.90±0.09 e 250 3.85±0.16 b 29.30±0.08 d 26.09±0.24 b 125 4.04±0.11 b 30.03±0.13 c 20.83±0.08 c 62.5 8.57±0.14 a 47.73±0.21 a 41.10±0.13 a 注：表中数据均为3次重复的平均值；同列数据后不同字母表示经过Duncan's新复极差法检验，在0.05水平上差异显著。 Note: Data are average of three replicates; Data in the same column with different letters are significantly different at 0.05 level by Duncan's multiple range test.

表 1 茶籽油处理对采后猕猴桃感观指标的影响 Table 1 Effect of tea seed oil on sensory quality of postharvested‘Qinmei' kiwifruit

结果(图 1)表明：500 μL/L的茶籽油处理可以明显延缓猕猴桃采后贮藏过程中品质的下降。由图 1a可知，贮藏20 d后，除500 μL/L茶籽油处理外，猕猴桃硬度几乎成直线下降，其中CK处理的下降幅度最大；与贮藏初期相比，第50天，500 μL/L茶籽油处理猕猴桃的硬度降低了47.31%，显著低于1-MCP(56.10%)和CK(83.41%)(P＜0.05)。

图 1

Fig. 1

注：图中CZY1、CZY2、CZY3、CZY4分别代表 500、250、125、62.5 μL/L的茶籽油处理；下同。 Note: CZY1,CZY2,CZY3 and CZY4 represent treatment of 500,250,125 and 62.5 μL/L tea seed oil,respectively. The same as below. 图 1 茶籽油处理对采后猕猴桃品质的影响 Fig. 1 Effect of tea seed oil on quality of postharvested‘Qinmei' kiwifruit

由图 1b可知，贮藏前20 d，各处理的Vc含量下降较快。20～50 d内，呈逐渐平缓趋势；至贮藏结束时，500 μL/L茶籽油处理的Vc含量显著高于CK(P＜0.05)。表明茶籽油处理可以抑制猕猴桃贮藏过程中Vc含量的降低。

由图 1c可知，“秦美”果实采后贮藏过程中SSC含量在前20 d呈迅速上升趋势，之后上升趋势逐渐变缓。其中500 μL/L茶籽油处理在整个贮藏过程中的SSC含量变化幅度最小，始终低于对照1-MCP和CK，至贮藏结束时，分别降低了8.00%和1.43%。

由图 1d可知，各处理的TA含量在整个贮藏过程中都呈现比较明显的下降趋势，最终500 μL/L茶籽油处理的TA含量降低较少，但与其他处理比，差异并不显著(P＞0.05)。

由图 1e可知，在整个贮藏过程中，各处理的糖酸比都呈上升趋势。其中500 μL/L茶籽油处理组增长最缓慢，显著低于1-MCP和CK；29～32 d内，1-MCP和CK的糖酸比值已经达到40，而500 μL/L茶籽油处理在40 d时才达到40。可见，500 μL/L茶籽油处理有助于延缓“秦美”果实采后风味的变化。

结果(图 2)表明：500 μL/L茶籽油处理可明显提高猕猴桃采后果实保护酶的活性，延缓猕猴桃采后成熟衰老。由图 2a可知，500 μL/L茶籽油处理在贮藏后30～50 d可以显著提高SOD活性，分别较对照1-MCP和CK增加了138.69%～255.54%和36.30%～127.08%(P＜0.05)；在贮藏后25～50 d其他各药剂处理组的SOD活性均与1-MCP相当，在贮藏后30～40 d，各药剂处理组均与CK差异显著(P＜0.05)。

图 2

Fig. 2

图 2 茶籽油处理对采后猕猴桃保护酶活性的影响 Fig. 2 Effect of tea seed oil on protective enzyme activities of postharvested‘Qinmei' kiwifruit

由图 2b可知，各处理的CAT活性均呈先下降后上升再下降的变化趋势，且均在30 d时出现活性高峰。其中500 μL/L的茶籽油处理可明显提高猕猴桃的CAT活性，整个贮藏过程中其活性始终高于其他处理及对照，20～50 d 时，其CAT活性分别较1-MCP和CK增加了9.16%～18.19%和15.40%～172.10%，显著高于CK(P＜0.05)。

由图 2c可知，整个贮藏过程中，500μL/L的茶籽油处理可以明显提高采后猕猴桃的POD活性，30～50 d，其活性分别是1-MCP和CK的1.53～5.09和1.76～11.57倍，各处理间差异显著(P＜0.05)；其他处理及对照的变化趋势相当，且差异显著(P＜0.05)。

综上所述，500 μL/L的茶籽油处理后猕猴桃的POD和SOD、CAT活性均明显提高，其协同作用有效维持了果实体内活性氧的平衡。

结果(图 3)表明：500 μL/L的茶籽油处理后，猕猴桃果实的相对电导率及MDA含量均低于对照。由图 3a可知，整个贮藏过程中，500 μL/L茶籽油处理的相对电导率略低于1-MCP，差异不大，但显著低于CK(P＜0.05)；其他各处理及CK的相对电导率差异不大(P＞0.05)；至贮藏结束时，500 μL/L的茶籽油处理的相对电导率分别比1-MCP和CK低2.16%和7.81%。

图 3

Fig. 3

图 3 茶籽油处理对采后猕猴桃相对电导率(a)和 MDA含量(b)的影响 Fig. 3 Effect of tea seed oil on relative electric conductivity and malondialdehyde (MDA) of postharvested ‘Qinmei' kiwifruit

从图 3b可以看出，整个贮藏过程中，250和500 μL/L的茶籽油处理均可抑制采后猕猴桃MDA含量的积累。其中500 μL/L茶籽油处理的MDA含量始终维持在较低水平，贮藏10～50 d后，其MDA含量分别比1-MCP和CK低0～27.58%(差异不显著，P＞0.05)和26.03%～47.50%(差异显著，P＜0.05)； 250 μL/L茶籽油处理的MDA含量在整个贮藏过程中和1-MCP差异不大，但显著低于CK，效果也较好(P＜0.05)。

结果(图 4)表明：500 μL/L茶籽油处理降低了猕猴桃的呼吸及乙烯跃变峰值，证明其保鲜效果较好。从图 4a可知，第20天时出现呼吸高峰，各处理虽然未延缓呼吸高峰出现的时间，但500 μL/L茶籽油处理降低了其呼吸跃变峰值，虽与1-MCP差异不显著(P＞0.05)，但与CK差异显著(P＜0.05)；其他处理效果不佳。

图 4

Fig. 4

图 4 茶籽油处理对采后猕猴桃呼吸强度(a)及 乙烯释放速率(b)的影响 Fig. 4 Effect of tea seed oil on respiration intensity (a) and ethylene release rate(b) of postharvested‘Qinmei' kiwifruit

由图 4b可知，各处理及对照于贮藏后第20天出现乙烯释放速率跃变峰；整个贮期各处理均降低了猕猴桃的乙烯跃变峰值，其中500 μL/L茶籽油处理效果最好，但和1-MCP差异不显著(P＞0.05)，与CK差异显著(P＜0.05)。说明500 μL/L茶籽油处理对抑制采后猕猴桃果实的乙烯释放具有很好的作用。

本研究结果表明：在13～15 ℃贮藏条件下，500 μL/L的茶籽油可不同程度地提高SOD、CAT和POD保护酶活性，抑制相对电导率和MDA含量的增加，延缓果实采后硬度、口感风味及Vc含量的降低，抑制呼吸及乙烯跃变峰值，从而延缓果实采后衰老，延长贮藏期；其保鲜效果优于1-MCP。大量研究证明，果蔬腐坏与活性氧自由基有关。茶籽油中含有茶多酚及多种黄酮类物质，这些成分均安全无毒，具有良好的保鲜、抗氧化性，对自由基具有很好的清除作用。结合其活性成分及试验结果，推断其保鲜作用机制可能是：1)抗氧化活性成分对自由基的清除；2)植物提取物中的某些成分对保护酶活性及Vc含量进行调节，进而维持机体内活性氧的平衡；3)延缓MDA等有害成分对细胞膜的损害。具体原因尚需进一步研究。

天然源产物用于猕猴桃保鲜的报道较少，陈昆松等^[22]研究发现，植物激素ABA和IAA对猕猴桃有保鲜作用，晕曾荣等^{[23, 24]}报道了水杨酸、壳聚糖涂膜处理对猕猴桃果实的采后保鲜效果，但由于使用成本高，资源有限，提取方法复杂，难以工业化生产。我国是产茶大国，茶籽油资源广泛，全国每年潜在茶籽资源超过99万 t，可榨取茶籽油毛油约11万 t^[25]；茶籽油毛油提取工艺简单，提取率较高，易获得，成本较低，约40元/kg^[26]。以2.5×10⁵ μL/L茶籽油母液为例，10元的茶籽油母液可处理“秦美”猕猴桃约1.64 t，如果进行大批量生产其成本可进一步降低，且其配制方法简单，适于工业化生产；此外，作为一种植物源物质，茶籽油无毒、无害、无残留，与环境具有良好的兼容性，具有化学药剂不可比拟的优势^[27]。因此，对茶籽油保鲜作用的进一步深入研究，有望开发出新型天然源保鲜剂，具有明显的工业化生产及应用前景。