乙螨唑化学名称为(RS)-5-叔丁基-2-[2-(2，6-二氟苯基)4，5-二氢-1．3- NFDA1 唑-5-基]苯乙醚，结构式见Scheme 1，是日本八洲化学公司于1994年开发的新颖 NFDA1 唑类触杀型杀螨剂，可抑制螨正常蜕皮过程并具有杀卵活性，能有效控制螨的整个幼龄期(卵和若螨)，此外还对雌性成螨有不育作用^[1]。乙螨唑具有高效、低毒和对非靶标生物安全的特性，符合当今绿色杀虫剂的要求^[2]。

Scheme 1

Scheme 1

有关乙螨唑对螨虫的防治效果已有较多研究报道^{[3, 4, 5, 6, 7]}，但其检测方法及其在不同作物上残留消解动态研究报道较少^{[8, 9, 10, 11]}。目前，中国^[12]、国际食品法典委员会(CAC)和美国均未制定乙螨唑在苹果中的最大残留限量值(MRL值)，日本规定苹果中乙螨唑的MRL值为2.0 mg/kg。鉴于此，笔者采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法，测定了乙螨唑在苹果及土壤中的残留及消解动态，以期为乙螨唑在苹果上的合理使用及其MRL值的制定提供基础数据。 1 材料与方法 1.1 供试材料

99.1%乙螨唑(etoxazole)标准品，购自Dr．Ehrenstorfer Gmbh公司。150 g/L乙螨唑悬浮剂，由深圳诺普信农化股份有限公司提供。氯化钠(用前烘干)及其余试剂均为分析纯。6890-5973气相色谱-质谱联用仪(美国安捷伦公司)；IKA-T25高速匀浆机(德国艾卡公司)；Heidolph LABOROTA 4001旋转浓缩蒸发器(德国海道夫公司)。 1.2 田间试验

田间试验分别于2012和2013年在山东省济南市和河南省焦作市进行。济南属暖温带大陆性季风气候，年日照总时数2 491～2 737 h，年平均日照百分率为56%～62%。年平均气温14℃，年平均降水量650～700 mm。试验地土壤类型为砂壤，pH值为7.1～7.2，有机质含量0.9%～1.0%，各小区栽培条件一致。焦作的气候和土质条件跟济南类似。

土壤样本的采集：随机取点5～10个，用土钻采集深度为0～10 cm的土壤1～2 kg，除去碎石、杂草和植物根茎等杂物，混匀后采用四分法留样500 g，于-20℃条件下保存，备用。

苹果样本的采集：随机在试验小区内6～12个采样点采集2 kg生长正常、无病害、半成熟或成熟的苹果果实，采集部位遍及果树上中下部，切碎、混匀后采用四分法留样500 g，于-20℃条件下保存，备用。 1.2.1 乙螨唑在苹果中的消解动态试验

于苹果生长到成熟个体一半大小时喷施150 g/L乙螨唑悬浮剂。施药剂量为有效成分30 mg/L(推荐最高剂量的1.5倍)，每小区施药量2 L。分别于施药后 2 h 及1、2、3、5、7、10、14、21、30、45 d采集苹果样品，每处理重复3次，结果取平均值。3棵苹果树作为 1个小区，每小区面积30 m²。处理间设保护隔离区，另设空白对照。 1.2.2 乙螨唑在土壤中的消解动态试验

另选一块30 m²的地块，与苹果树同期施药，施药剂量为30 g(150 g/L乙螨唑悬浮剂制剂用量)。分别于施药后2 h及1、2、3、5、7、10、14、21、30、45、56 d采集土壤样品，另设空白对照。 1.2.3乙螨唑的最终残留试验

设高剂量有效成分30 mg/L(推荐高剂量的1.5倍)和低剂量有效成分20 mg/L(推荐高剂量)两个施药剂量，同时设1次施药和2次施药两个处理，每处理重复3次。3棵苹果树作为1个小区，每个小区面积30 m²。施药间隔期7 d。采样时间距离最后一次施药的间隔时间为7、14、21和28 d，另设空白对照。 1.3 分析方法 1.3.1 气相色谱-质谱检测条件

DB-5MS色谱柱(30 m×0.32 mm，0.25 μm)；柱温80℃保持2 min，以20℃/min的速率升温至150℃，再以6℃/min升温至280℃，保持1min；进样口温度270℃；进样量1 μL；离子源为EI源；离子源温度230℃；保留时间23.30～23.40 min；选择离子(m/z)为300、359和330，其中330为定量离子；碰撞能量70 eV。 1.3.2 样品提取与净化

苹果样品：称取苹果样品25 g，加入100 mL V(乙酸乙酯)∶ V(丙酮)=1∶1 的混合溶液，高速匀浆60 s，转移至加有10 g氯化钠的100 mL具塞量筒中，摇匀，静置1h。准确移取20 mL上层提取液，旋蒸浓缩至近干，用丙酮定容至5.0 mL，待GC-MS检测。

土壤样品:称取土壤样品20 g，依次加入10 mL水和40 mL丙酮，超声提取15 min；分两次加入丙酮各30 mL，分别超声提取15 min。合并提取液至加有10 g氯化钠的100 mL具塞量筒中，摇匀，静置1 h。准确移取2 mL上层液，待GC-MS检测。 1.4 标准曲线的制作与添加回收试验 1.4.1 标准曲线制作

称取10.1 mg乙螨唑标准品于10 mL容量瓶中，用丙酮定容至刻度，再用丙酮稀释成100.0、10.0、5.0、2.0、1.0、0.5、0.1和0.01 μg/mL的系列标准溶液，按1.3.1节的条件测定，以乙螨唑标准溶液质量浓度为横坐标，以其离子峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。 1.4.2 添加回收试验

分别在空白苹果和土壤样品中添加0.01、0.1和1 mg/kg 3个水平的乙螨唑标准溶液，每个水平重复5次，按1.3.1节的条件测定，计算添加回收率及相对标准偏差(RSD)。 2 结果与分析 2.1 标准曲线和方法的灵敏度

结果表明：在0.01～2.0 μg/mL范围内，乙螨唑的峰面积(y)与其质量浓度(x)间呈良好的线性相关性，线性方程为y=15 689x-705.14，相关系数(r)为0.998 4。按3倍信噪比(S/N)计算得到仪器对乙螨唑的最小检出量为0.001 ng。 2.2 方法的准确度和精密度

添加回收试验结果(表 1)显示：在0.01～1 mg/kg 3个添加水平下,乙螨唑在苹果中的平均回收率介于93%～96%之间,RSD为2.8%～8.0%；在土壤中的平均回收率介于91%～104%之间,RSD为0.7%～8.3%。均满足残留分析的要求。由最低添加水平得到乙螨唑苹果和土壤中的最低检测浓度均为0.01 mg/kg。相关色谱图见图 1。

表 1(Table 1)

表 1 乙螨唑在苹果和土壤中的添加回收试验结果 Table 1 Recoveries of etoxazole in apples and soil 样品 Sample 添加水平 Fortified level/(mg/kg) 平均回收率 Average recovery/% 相对标准 偏差 RSD/% 苹果 Apple 0.01 0.1 1 96 94 93 8.0 2.8 3.7 土壤 Soil 0.01 0.1 1 104 103 91 8.3 4.0 0.7

表 1 乙螨唑在苹果和土壤中的添加回收试验结果 Table 1 Recoveries of etoxazole in apples and soil

图 1

A．苹果空白样品；B.土壤空白样品；C.苹果中添加乙螨唑(0.01 mg/kg)； D.土壤中添加乙螨唑(0.01 mg/kg)；E.苹果实际检测样品；F.土壤实际检测样品。 A．Apple blank; B. Soil blank;C. Apple sample fortified with 1 mg/kg etoxazole; D. Soil sample fortified with 1 mg/kg etoxazole;E. Sample of apple;F. Sample of soil. 图 1 乙螨唑标准品和苹果、土壤样品的总离子流图 Fig. 1 TIC of etoxazole standard and difference sample of apple and soil

从两年两地的试验数据(表 2和图 2)可以看出:乙螨唑在苹果和土壤中的残留量均随着时间的延长而降低。药后10 d其在苹果和土壤中的消解率分别大于68.53%和71.16%；药后45 d在苹果中的消解率达90.37%以上；药后56 d在土壤中的消解率达95.71%以上。消解曲线均符合一级反应动力学方程。其在苹果和土壤中的降解半衰期分别为7.4～14.1 d和4.2～18.1 d，属易降解农药(t_1/2≤30 d)^[13]。

表 2(Table 2)

表 2 乙螨唑在苹果和土壤中的消解动力学参数 Table 2 Kinetic equation parameters of etoxazole in apple and soil 样品 Sample 试验地点 Location 年份 Year 原始沉积量 Original residue /(mg/kg) 消解动力学方程 Decline dynamics equation 相关系数，r Correlation coefficient，r 半衰期 Half-lives/d 苹果 Apple 山东 2012 2013 0.73 1.01 ct=0.362 9e-0.093 5t ct=2.412 9e-0.066 6t -0.79 -0.94 7.4 10.4 河南 2012 2013 3.18 1.86 ct=0.636 8e-0.048 7t c=1.086 8e-0.049 1t -0.88 -0.85 14.2 14.1 土壤 Soil 山东 2012 2013 7.26 8.11 ct=5.809 2e-0.123 3t c=6.110 3e-0.050 9t -0.92 -0.87 5.6 13.6 河南 2012 2013 9.87 3.66 ct=3.623 8e-0.0384t ct=2.258 8e-0.165 8t -0.88 -0.83 18.1 4.2

表 2 乙螨唑在苹果和土壤中的消解动力学参数 Table 2 Kinetic equation parameters of etoxazole in apple and soil

图 2

图 2 乙螨唑在苹果(A)和土壤(B)中的残留消解曲线 Fig. 2 Residue decline curve of etoxazole in apple(A) and soil(B)

两年两地的试验结果(表 3)表明：乙螨唑在苹果和土壤中的残留量均随着采收间隔期的延长而降低。采用150 g/L乙螨唑悬浮剂分别按有效成分 20和30 mg/L的剂量对苹果施药1次和2次，距最后一次施药7、14、21和 28 d时，苹果中乙螨唑的残留量范围分别为0.231～4.688、0.047～2.968、<0.01～1.650和<0.01～0.876 mg/kg；土壤中7和14 d时的分别为<0.01～2.222和<0.01～0.098 mg/kg，21和 28 d时，均小于0.01 mg/kg。

表 3(Table 3)

表 3 150 g/L乙螨唑悬浮剂在苹果和土壤中的最终残留量 Table 3 Terminal residues of etoxazole 150 g/L SC in apple and soil 施药有效剂量Dosage，a.i./(mg/L) 施药次数/次Times 采样间隔期Harvest interval/d 残留量Residue/(mg/kg) 2012 2013 山东Shandong 河南He'nan 山东Shandong 河南He'nan 苹果 20 1 7 0.231 0.644 0.568 2.953 Apple 14 0.047 0.572 0.367 1.226 21 <0.01 0.342 0.061 1.049 28 <0.01 0.241 <0.01 0.279 2 7 0.241 1.186 1.789 2.452 14 0.168 0.398 0.580 0.728 21 0.134 0.292 0.120 0.629 28 0.093 0.273 <0.01 0.255 30 1 7 0.310 1.373 2.020 4.688 14 0.285 1.103 0.593 2.790 21 0.152 0.649 0.250 0.322 28 0.107 0.546 <0.01 0.235 2 7 0.574 2.794 3.245 4.760 14 0.273 0.980 1.368 2.968 21 0.197 0.570 0.120 1.650 28 0.175 0.522 <0.01 0.876 土壤 20 1 7 <0.01 0.508 0.076 <0.01 Soil 14 <0.01 <0.01 <0.01 <0.01 21 <0.01 <0.01 <0.01 <0.01 28 <0.01 <0.01 <0.01 <0.01 2 7 <0.01 0.160 0.060 0.395 14 <0.01 <0.01 <0.01 <0.01 21 <0.01 <0.01 <0.01 <0.01 28 <0.01 <0.01 <0.01 <0.01 30 1 7 <0.01 1.271 <0.01 2.222 14 <0.01 <0.01 <0.01 <0.01 21 <0.01 <0.01 <0.01 <0.01 28 <0.01 <0.01 <0.01 <0.01 2 7 0.184 0.983 0.181 1.520 14 0.098 <0.01 <0.01 <0.01 21 <0.01 <0.01 <0.01 <0.01 28 <0.01 <0.01 <0.01 <0.01

表 3 150 g/L乙螨唑悬浮剂在苹果和土壤中的最终残留量 Table 3 Terminal residues of etoxazole 150 g/L SC in apple and soil

本研究建立了一套较为简便的提取苹果和土壤中乙螨唑残留的前处理和检测方法。与液相色谱-串联质谱法^[9]相比，采用丙酮和V(乙酸乙酯)∶V(丙酮)=1∶1的混合溶液分别提取土壤和苹果中的乙螨唑，前处理过程简单，无需硅胶柱净化。与乙腈相比，丙酮和乙酸乙酯价格较低廉，成本低。选择GC-MS检测，乙螨唑出峰良好，抗杂质干扰能力强，具有操作简单、重现性好、检测灵敏度较高，符合农药残留分析要求，但出峰时间长，灵敏度相对较低。

鉴于CAC、 美国和中国均未制定苹果上乙螨唑最大残留限量值。本研究参考日本规定苹果上乙螨唑最大残留限量值2.0 mg/kg，采用150 g/L乙螨唑悬浮剂按推荐高剂量(推荐剂量1.5倍)施药1～2次。施药后21 d，苹果中乙螨唑的残留量最高为1.65 mg/kg，低于日本规定的MRL值。因此，在苹果上使用150 g/L乙螨唑悬浮剂时，建议施药剂量最高为有效成分30 mg/L，施药1～2次，采收间隔期为21 d。