南京农业大学学报  2015, Vol. 38 Issue (3): 491-496   PDF    
http://dx.doi.org/10.7685/j.issn.1000-2030.2015.03.021
0

文章信息

鞠雪, 王秋举, 罗莎, 董晓庆, 陈玉珂, 杨翼羽, 张东鸣. 2015.
JU Xue, WANG Qiuju, LUO Sha, DONG Xiaoqing, CHEN Yuke, YANG Yiyu, ZHANG Dongming. 2015.
氧化鱼油对草鱼幼鱼脂质过氧化及抗氧化酶活性的影响
Effects of oxidized fish oil on lipid peroxidation and antioxidant enzyme activities in juvenile grass carp(Ctenopharyngodon idellus)
南京农业大学学报, 38(3): 491-496
Journal of Nanjing Agricultural University, 38(3): 491-496.
http://dx.doi.org/10.7685/j.issn.1000-2030.2015.03.021

文章历史

收稿日期：2014-10-26
引用本文
鞠雪, 王秋举, 罗莎, 董晓庆, 陈玉珂, 杨翼羽, 张东鸣. 2015. 氧化鱼油对草鱼幼鱼脂质过氧化及抗氧化酶活性的影响[J]. 南京农业大学学报, 38(3): 491-496.
JU Xue, WANG Qiuju, LUO Sha, DONG Xiaoqing, CHEN Yuke, YANG Yiyu, ZHANG Dongming. Effects of oxidized fish oil on lipid peroxidation and antioxidant enzyme activities in juvenile grass carp(Ctenopharyngodon idellus)[J]. Journal of Nanjing Agricultural University, 38(3): 491-496.  DOI: 10.7685/j.issn.1000-2030.2015.03.021
氧化鱼油对草鱼幼鱼脂质过氧化及抗氧化酶活性的影响
鞠雪, 王秋举, 罗莎, 董晓庆, 陈玉珂, 杨翼羽, 张东鸣     
吉林农业大学动物科学技术学院, 吉林 长春 130118
收稿日期：2014-10-26
基金项目：国家自然科学基金项目(30671621,31372540,30972191)
作者简介：鞠雪,硕士研究生。
通迅作者：张东鸣,教授,主要从事水生生物营养与饲料科学研究,E-mail:dongmingzhang0431@aliyun.com。
摘要：[目的] 旨在研究氧化鱼油对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)幼鱼脂质过氧化及抗氧化酶活性的影响。[方法] 将204尾草鱼幼鱼随机分成4个处理组,每个处理3个重复,每个重复17尾鱼。分别以新鲜鱼油[过氧化值(POV):9.07 mmol·kg-1]与氧化鱼油(POV:49.72、144.64和345.45 mmol·kg-1)为脂肪源制成4种等氮(粗蛋白含量31%)等能(16 MJ·kg-1)的配合饲料,投喂平均体质量(30.0±2.6)g的草鱼幼鱼8周。[结果] 与新鲜鱼油组相比,POV为345.45 mmol·kg-1的氧化鱼油处理组试验鱼血清、肝胰脏、肾脏、肠道组织丙二醛(MDA)含量显著升高(P < 0.05);血清、肝胰脏、肾脏、肌肉、肠道组织中总抗氧化能力(T-AOC)显著下降(P < 0.05);血清、肝胰脏、肾脏、肌肉超氧化物歧化酶(SOD)活性显著下降(P < 0.05);血清、肝胰脏、肌肉组织中过氧化氢酶(CAT)活性显著下降(P < 0.05);各组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性无显著变化(P>0.05);草鱼幼鱼不同组织中各抗氧化酶活性从大到小分布:SOD活性:血清、肝胰脏、肾脏、肌肉,CAT活性:肝胰脏、肾脏、血清、肠道、肌肉,GSH-PX活性:肝胰脏、血清、肾脏、肠道;MDA含量从高到低依次为:血清、肠道、肌肉、肝胰脏、肾脏;T-AOC含量从高到低依次为:肝胰脏、血清、肠道、肾脏、肌肉。[结论] 氧化鱼油能引起草鱼幼鱼脂质过氧化,降低组织中主要抗氧化酶活性,诱导氧化应激;鱼类不同组织抗氧化酶活性和丙二醛含量存在一定差异性,肝胰脏中抗氧化酶活性较高且对氧化鱼油诱导的氧化应激比较敏感。
关键词： 氧化应激     氧化鱼油     草鱼幼鱼     抗氧化酶    
Effects of oxidized fish oil on lipid peroxidation and antioxidant enzyme activities in juvenile grass carp(Ctenopharyngodon idellus)
JU Xue, WANG Qiuju, LUO Sha, DONG Xiaoqing, CHEN Yuke, YANG Yiyu, ZHANG Dongming     
College of Animal Science and Technology, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China
Abstract: [Objectives] The study was conducted to investigate the effects of oxidized fish oil on lipid peroxidation and antioxidant enzyme activities of juvenile grass carp(Ctenopharyngodon idellus). [Methods] An 8-week feeding trial on juveniles(average weight of 30.0 g)was conducted in quadruplicate groups, 3 replicates in per group, and 17 juvenile grass carp in each replicate. Four isonitrogenous and isocaloric diets were formulated utilizing fresh fish oil[peroxide value(POV):9.07 mmol·kg-1]and oxidized fish oil(POV:49.72, 144.64, 345.45 mmol·kg-1)as the lipid source respectively, and the diet prepared with fresh fish oil served as control. [Results] Oxidized fish oil increased the content of MDA in the body tissues, and decreased the activities of antioxidant enzymes. Compared to the control, fish in P3 group(POV:345.45 mmol·kg-1), the levels of MDA in serum, liver, kidney, intestine increased significantly(P < 0.05), the levels of T-AOC in serum, liver, kidney, muscle, intestine decreased significantly(P < 0.05), and the activity of SOD in serum, liver, kidney, muscle, CAT in serum, liver, muscle decreased significantly(P < 0.05). However, the activity of GSH-PX showed no differences(P>0.05). The activity of main antioxidant enzymes was distributed as follows, SOD:serum, liver, kidney, muscle;CAT:liver, kidney, serum, intestine, muscle;GSH-PX:liver, serum, kidney, intestine. The content of MDA and T-AOC distributed as follows, MDA:serum, intestine, muscle, liver, kidney;T-AOC:liver, serum, intestine, kidney, muscle. [Conclusions] Oxidized fish oil could increase the level of MDA, decrease the ability of antioxidant, and induce oxidative stress of juvenile grass carp. There was a tissue-specific of antioxidant enzyme activity and MDA content in different tissues of juvenile grass carp. The antioxidant enzymes in liver has higher activity and more sensitive to oxidative stress induced by oxidized fish oil than other tissues.
Keywords: oxidative stress     oxidized fish oil     juvenile grass carp     antioxidant enzyme    

鱼油是一种重要的能源物质,还能为动物机体提供高度不饱和脂肪酸(HUFA)[1, 2],其富含的高度不饱和脂肪酸更是鱼虾EPA、DHA的重要来源之一。另外,鱼油还能促进鱼类生长,利于鱼体脂质代谢[3, 4],提高饲料加工效率,在饲料生产中得到了广泛应用[5]。然而鱼油中的不饱和脂肪酸在存储、加工的过程中极易被氧化,而氧化脂质能被肠道吸收而易造成机体氧化应激反应[6],这一现象已引起动物营养学家的广泛关注。近年来,有关氧化鱼油对动物生产性能的研究多集中在鸡[7]、猪[8]、鼠[9, 10]等动物上。氧化鱼油对鱼类生长及抗氧化能力的影响在鲶鱼[11]、鲤鱼[12]、花鲈[13]上也有报道。草鱼作为我国北方重要的淡水经济鱼类,相关研究却鲜有报道。为此,本试验以草鱼幼鱼为研究对象,用不同程度氧化鱼油进行饲养试验,测定草鱼幼鱼血清、肝胰脏、肠、肌肉、肾脏等组织中丙二醛(MDA)含量及抗氧化酶活性,以研究氧化鱼油对草鱼幼鱼脂质过氧化及抗氧化能力的影响,为草鱼的健康养殖及水产饲料行业的发展提供基础资料,并为构建鱼类氧化应激模型提供参考依据。 1 材料与方法 1.1 试验用鱼

草鱼幼鱼购自长春市双阳水库渔场。暂养1周,选取体质健壮、体质量相近的草鱼幼鱼204尾作为试验用鱼,平均体质量(30.0±2.6) g,随机分为4个处理,每个处理3个重复,每个重复17尾鱼。 1.2 氧化鱼油制作及试验饲料分组处理

新鲜鱼油购自荣成海达鱼粉有限公司,-20 ℃冰箱保存。鱼油氧化步骤如下:在新鲜鱼油中添加150 mg · kg-1 Cu2+(以CuSO4 · 5H2O的形式)、300 mg · kg-1 Fe2+(以FeSO4 · 7H2O的形式)、6 000 mg · kg-1 H2O2(30% H2O2水溶液)和0.3%(体积分数)蒸馏水,充分混匀后于37 ℃水浴中搅拌进行氧化反应,在不同时间取样得到过氧化物值(POV)分别为49.72、144.64和345.45 mmol · kg-1的氧化鱼油,按3%的比例分别添加到半纯化基础饲料中(饲料配方见表 1),形成P1、P2、P3试验组,以添加新鲜鱼油(POV:9.07 mmol · kg-1)饲料为对照组F。对照组添加Fe2+、Cu2+与处理组Fe2+、Cu2+达到平衡。各氧化程度鱼油氧化指标的测定值见表 2。

表 1 试验饲料组成成分及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the diets(air-dry basis)
%
饲料组成Diet composition 水平Level 营养成分Nutrients composition 水平Level
鱼粉Fish meal 10.00 水分Moisture 3.65
去皮豆粕Dehulled soybean 33.00 粗脂肪Crude lipid 5.22
玉米蛋白粉Corn protein powder 14.60 粗蛋白Crude protein 31.11
鱼油Fish oil 3.50 粗灰分Crude ash 6.91
面粉Flour 19.00
糊精Dextrin 12.40
微晶纤维素Microcrystalline 4.00
复合预混料Compound premix 1.00
磷酸二氢钙Monocalcium phosphate 2.00
氯化胆碱Choline chloride 0.50
注: 1)复合预混料向每kg饲料提供:维生素A 3 000 IU,维生素D 1 000 IU,维生素E 100 mg,维生素K 20 mg,维生素B 1 10 mg,维生素B 2 20 mg,烟酸200 mg,泛酸钙100 mg,维生素B 6 20 mg,生物素2 mg,叶酸10 mg,维生素B 12 0.05 mg,肌醇400 mg,维生素C 500 mg,Zn 50 mg,Fe 220 mg,Cu 4 mg,Mn 20 mg,碘1 mg,Co 0.3 mg,Se 0.1 mg,Mg 300 mg;2)饲料中总能为16.14 MJ · kg -1。

Notes: 1)Compound premix supplied the following per kilogram of diet:vitamin A 3 000 IU,vitamin D 1 000 IU,vitamin E 100 mg,vitamin K 20 mg,vitamin B 1 10 mg,vitamin B 2 20 mg,nicotinic acid 200 mg,calcium pantothenate 100 mg,vitamin B 6 20 mg,biotin 2 mg,folic acid 10 mg,vitamin B l2 0.05 mg,inositol 400 mg,vitamin C 500 mg,Zn 50 mg,Fe 220 mg,Cu 4 mg,Mn 20 mg,I 1 mg,Co 0.3 mg,Se 0.1 mg,Mg 300 mg;2)The total energy of the diet is 16.14 MJ · kg -1.

表选项

表 2 不同处理组的氧化鱼油过氧化值、碘价、酸价氧化指标 Table 2 Peroxide value,iodine value and acid value of normal and oxidized fish oil
处理分组
Treatment group 		过氧化值/(mmol·kg -1)
Peroxide value		 碘价/(g·100 g -1)
Iodine value		 酸价/(mg·g -1)
Acid value
F 9.07±1.14 165.98±2.46 1.16±0.07
P1 49.72±1.73 155.06±3.59 2.43±0.49
P2 144.64±2.29 152.89±6.40 3.71±0.16
P3 345.45±6.45 138.40±5.09 4.87±0.20
表选项

以鱼粉为动物蛋白源,去皮豆粕和玉米蛋白粉为植物蛋白源,鱼油为脂肪源,面粉和糊精为能源,微晶纤维素为填充物,按表 1配制试验饲料。饲料制好后于-20 ℃条件下贮存,投喂期间每周取料1次。 1.3 饲养管理

采用循环水养殖系统,试验用容器为380(型号)白色养殖用桶,有效容积100 L。每桶加水90 L,流水饲养,水流速度为0.20~0.25 L · min-1,水源为曝气24 h的自来水。每天投喂饲料2次(8:30和16:30),饱食投喂。养殖期间每周清洗养殖设施1次。整个试验期水温控制在(26.5±1.0)℃,pH值7.0~7.5,溶氧5~8 mg · L-1,氨态氮含量小于0.05 mg · L-1。饲养试验期为8周。 1.4 样品采集

经58 d试验,对照组和试验组草鱼幼鱼均未出现死亡现象。试验结束后停食24 h,从每个桶中随机取5尾鱼,用200 mg · L-1的MS-222麻醉后称鱼体质量,尾静脉采血,4 ℃ 4 000 r · min-1离心10 min制备血清。取血后解剖分离出肝胰脏、肾脏、肠(前中肠)、肌肉,并用冷的生理盐水冲洗,除去组织上的血液及肠道内容物。以上操作均在冰上进行,所有样品-80 ℃冰箱保存备用。 1.5 指标测定方法 1.5.1 饲料成分的测定

水分测定采用恒温干燥法(105 ℃);粗蛋白测定采用凯氏定氮法;粗脂肪测定采用索氏抽提法;粗灰分测定采用马福炉灼烧法(550 ℃);能量采用氧弹热量计直接测得。 1.5.2 抗氧化性能的测定

组织样品在4 ℃条件下解冻,剪碎,加入预冷的8.6 g · L-1生理盐水,冰浴匀浆。匀浆液经2 000 r · min-1离心15 min,取上清液4 ℃保存备用。

血清及组织匀浆液中丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性及组织匀浆液总蛋白含量均采用南京建成生物工程研究所试剂盒进行测定。每毫克组织蛋白每分钟使反应体系的吸光值每增加0.01时为一个T-AOC单位;每毫克组织蛋白每分钟扣除非酶反应的作用,使体系中谷胱甘肽浓度降低1 μmol · L-1为一个GSH-PX酶活性单位;组织匀浆中总蛋白含量用考马斯亮蓝法测定。 1.6 数据分析

试验数据用平均数±标准误(x±SE)表示(n=3),SPSS 17.0软件进行单因素方差分析和Duncan′s多重比较。 2 结果与分析 2.1 氧化鱼油对草鱼幼鱼不同组织中MDA含量的影响

由表 3可知:与对照(F)组相比,氧化鱼油各处理组草鱼幼鱼组织中MDA含量有不同程度的升高。血清和肠道中MDA在P3组较F组显著升高(P < 0.05)。肾脏中的MDA含量在P1、P2、P3组均较对照组显著升高(P < 0.05),且P3组显著高于P1、P2组(P < 0.05)。肝胰脏中的MDA含量在P2、P3组较对照组显著升高(P < 0.05)。肌肉中P1、P2和P3组的MDA含量较对照组分别升高了6.64%、6.76%、6.26%,但差异不显著(P>0.05),各组织中MDA含量均在P3组最高。

表 3 氧化鱼油对草鱼幼鱼不同组织中MDA含量的影响 Table 3 Effects of oxidized fish oil on the content of MDA in different tissues of juvenile grass carp
处理
Treatment		 MDA含量/(nmol·mL -1,nmol·mg -1) MDA content
血清 Serum 肝胰脏 Liver 肾脏 Kidney 肌肉 Muscle 肠道 Intestine
F 39.28±1.19 a 5.89±0.32 a 4.12±0.18 a 15.97±1.35 16.90±5.45 a
P1 36.13±1.53 a 7.43±0.80 ab 6.98±0.18 b 17.03±2.48 23.14±1.32 ab
P2 37.57±1.25 a 8.20±0.13 b 6.39±0.54 b 17.05±1.16 15.87±0.74 a
P3 46.62±2.70 b 8.37±0.51 b 10.05±0.20 c 16.97±1.10 32.62±1.78 b
注:同一列数据中标有不同字母者表示差异显著( P < 0.05)。
Note:In the same column,values with the different letters mean significant difference at 0.05 level. The same as follows.
表选项
2.2 氧化鱼油对草鱼幼鱼不同组织中T-AOC含量的影响

由表 4可知:与F组相比,不同程度氧化鱼油处理均可导致草鱼幼鱼血清、肝胰脏、肾脏、肌肉及肠道中的T-AOC含量降低,且随鱼油氧化程度的提高,T-AOC呈现下降趋势。其中,肝胰脏和肠道中P1、P2、P3组T-AOC含量均显著低于F组(P < 0.05),组间差异不显著(P>0.05)。血清、肾脏和肌肉组织中,P3组T-AOC含量最低,与F组差异显著(P < 0.05)。

表 4 氧化鱼油对草鱼幼鱼不同组织中T-AOC含量的影响 Table 4 Effects of oxidized fish oil on the content of T-AOC in different tissues of juvenile grass carp
处理
Treatment		 T-AOC含量/(nmol·mL -1,nmol·mg -1) T-AOC content
血清 Serum 肝胰脏 Liver 肾脏 Kidney 肌肉 Muscle 肠道 Intestine
F 8.51±0.21 ab 14.43±0.75 a 0.46±0.02 a 0.21±0.06 a 0.84±0.07 a
P1 8.06±0.33 b 10.47±0.35 b 0.43±0.04 a 0.28±0.01 a 0.59±0.03 b
P2 7.98±1.19 a 10.28±0.29 b 0.48±0.01 a 0.08±0.00 b 0.47±0.00 b
P3 6.66±0.14 c 8.32±1.40 b 0.26±0.01 b 0.05±0.01 b 0.51±0.05 b
表选项
2.3 氧化鱼油对草鱼幼鱼不同组织中SOD活性的影响

由表 5可知:与对照(F)组相比,3种不同程度氧化鱼油处理组草鱼幼鱼各组织中SOD活性均有不同程度降低。P1、P2、P3组肝胰脏和肌肉中SOD活性均显著低于F组(P < 0.05),组间差异不显著。血清及肾脏的SOD活性在P3组显著低于对照组(P < 0.05)。

表 5 氧化鱼油对草鱼幼鱼不同组织中SOD活性的影响 Table 5 Effects of oxidized fish oil on the activity of SOD in different tissues of juvenile grass carp
处理
Treatment		 SOD含量/(nmol·mL -1,nmol·mg -1) SOD activity
血清 Serum 肝胰脏 Liver 肾脏 Kidney 肌肉 Muscle
F 52.76±0.40 a 54.34±1.27 a 7.67±0.64 a 7.11±0.47 a
P1 51.41±0.92 ab 38.65±2.02 b 8.52±0.65 a 5.56±0.19 b
P2 52.61±0.54 a 41.19±1.42 b 8.02±0.59 a 5.31±0.50 b
P3 48.65±1.92 b 41.96±3.48 b 4.16±0.70 b 5.71±0.39 b
表选项
2.4 氧化鱼油对草鱼不同组织中CAT活性的影响

由表 6可知:与对照(F)组相比,氧化鱼油各处理组血清、肝胰脏、肌肉中CAT活性显著下降(P < 0.05)。肾脏、肠道组织中除CAT活性较对照组降低,但无显著差异(P > 0.05)。

表 6 氧化鱼油对草鱼幼鱼不同组织中CAT活性的影响 Table 6 Effects of oxidized fish oil on the activity of CAT in different tissues of juvenile grass carp
处理
Treatment		 CAT含量/(nmol·mL -1,nmol·mg -1) CAT activity
血清 Serum 肝胰脏 Liver 肾脏 Kidney 肌肉 Muscle 肠道 Intestine
F 13.66±1.02 a 25.51±2.91 a 11.54±0.31 1.24±0.13 a 2.00±0.35
P1 9.88±0.10 b 16.76±1.07 b 10.98±0.21 0.58±0.03 b 1.37±0.24
P2 6.81±0.62 c 17.55±1.12 b 11.50±0.38 0.66±0.02 b 1.70±0.07
P3 7.06±0.23 c 18.01±0.38 b 11.75±0.27 0.47±0.02 b 1.37±0.05
表选项
2.5 氧化鱼油对草鱼不同组织中GSH-PX活性的影响

由表 7可知:与对照(F)组相比,3种不同程度氧化鱼油处理组血清、肝胰脏、肾脏、肠道组织中GSH-PX活性有升高的现象,但均无显著差异(P > 0.05)。

表 7 氧化鱼油对草鱼幼鱼不同组织中GSH-PX活性的影响 Table 7 Effects of oxidized fish oil on the activity of GSH-PX in different tissues of juvenile grass carp
处理
Treatment		 GSH-PX含量/(nmol·mL -1,nmol·mg -1) GSH-PX activity
血清 Serum 肝胰脏 Liver 肾脏 Kidney 肌肉 Muscle
F 424.48±7.18 1 231.85±140.70 273.78±10.88 116.50±5.15
P1 430.38±13.61 1 356.71±185.39 266.00±5.19 101.95±7.95
P2 437.46±13.61 1 396.49±68.12 268.21±24.71 116.18±19.02
P3 448.08±10.49 1 306.14±125.15 284.24±8.54 143.27±14.88
表选项
3 讨论

3.1 氧化鱼油对草鱼幼鱼脂质过氧化的影响

丙二醛(MDA)是脂质过氧化的终末代谢产物之一,其含量常用来反映机体脂质过氧化程度和细胞受损的程度[14]。周建川等[7]用含质量分数为1.0%氧化鱼油(POV:1 200 mmol · kg-1)的饲料饲喂蛋鸡,显著提高了蛋鸡血 清丙二醛含量。袁施彬等[15]在对断奶仔猪的研究表明,饲粮中添加质量分数为5%氧化鱼油(POV:786.50 mmol · kg-1) 可诱导断奶仔猪氧化应激,提高肝胰脏中MDA含量。彭士明等[16]在饲料中添加氧化酸败鱼油(POV:45 mmol · kg-1)饲养黑鲷幼鱼9周,结果显示氧化鱼油组肝脏中MDA含量显著高于对照组。本研究中,氧化鱼油各处理组草鱼幼鱼组织中MDA含量有不同程度的提高,当鱼油POV为345.45 mmol · kg-1时,血清、肝胰脏、肾脏、肠道中MDA含量都较对照组显著提高,说明氧化程度高的鱼油更容易造成组织脂质过氧化产物的积累,引起机体氧化应激。袁施彬等[15]指出MDA含量的提高是因为活性氧的存在,引起机体脂质发生一系列连锁反应,导致生物膜损伤,脂质过氧化。 3.2 氧化鱼油对草鱼幼鱼抗氧化酶活性的影响

机体的抗氧化防御系统包括非酶系统和酶系统,抗氧化剂含量及抗氧化酶活性大小可以反映机体氧化-抗氧化状态,从侧面体现动物的健康状态。机体的抗氧化酶系统主要包括超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)等,它们是体内自生的抗氧化酶,构成机体抗氧化的第一道防线[17]。

T-AOC常用来衡量机体抗氧化酶系统和非酶系统对外来刺激的代偿能力以及机体自由基代谢状态,是反映机体抗氧化机能的综合性指标。本试验中,随着鱼油氧化程度的提高,组织中T-AOC含量表现出下降的趋势,特别是在P3组(POV:345.45 mmol · kg-1),草鱼幼鱼血清、肝胰脏、肾脏、肠道及肌肉组织中的T-AOC含量都显著低于对照组。说明氧化程度高的鱼油会使草鱼幼鱼组织受到强烈刺激,打破机体自身氧化-抗氧化系统的平衡状态,从而使鱼体抗氧化能力整体下降。黄琳等[8]在饲粮中添加5%氧化鱼油显著降低了新生仔猪肠道T-AOC含量,引发了新生仔猪肠道的炎症反应,与本试验结果一致。

SOD是动物体内最先与O2· 作用清除活性氧的金属酶[18]。CAT是以过氧化氢为底物的末端氧化酶,能将H2O2分解成水,从而保护细胞免受损伤。GSH-PX是作为底物GSH的催化剂起解毒作用,且有协助CAT清除H2O2的作用。任泽林等[19]的研究表明,氧化鱼油可以降低鲤鱼肝胰脏中SOD活性。Vázquez-Añón等[20]在研究中指出,试验动物摄食氧化鱼油后机体ROS大量产生,体内SOD活性降低。本研究中,用3种不同程度氧化鱼油饲料饲喂草鱼幼鱼后,组织中SOD、CAT活性均较对照组下降。P3组(POV:345.45 mmol · kg-1)血清、肝胰脏、肌肉中的SOD、CAT活性与对照组相比都受到了显著抑制。说明较高程度的氧化鱼油使草鱼幼鱼组织中自由基的产生和清除之间的平衡被打破,细胞膜受损,抗氧化酶防御系统受到损坏,导致组织中主要的抗氧化酶活性下降。任泽林等[19]研究表明,氧化鱼油可以破坏鲤肝胰脏抗氧化机能使GSH-PX活性下降,但没有显著变化。本研究中,氧化鱼油各处理组中GSH-PX的活性与对照组相比,也没有表现出显著变化,推测原因可能是抗氧化防御系统其他成分如CAT等的介入降低了机体活性氧的浓度,使GSH-PX还未受到明显的影响。

另外,随着鱼油氧化程度的提高,草鱼幼鱼各组织MDA含量变化与SOD、CAT活性变化呈相反的趋势,这与苏传福等[21]、谢巧雄等[22]在草鱼抗氧化方面的研究结果一致。说明鱼体依赖SOD、CAT的协同作用来抑制脂质过氧化进行。 3.3 不同组织中抗氧化酶活性的比较

SOD、CAT和GSH-PX是机体内主要的抗氧化酶,在清除活性氧自由基中发挥重要作用。本研究中,草鱼幼鱼各组织中MDA、T-AOC含量以及主要抗氧化酶活性表现出了组织器官差异性,其从大到小排列如下:MDA含量:血清、肠道、肌肉、肝胰脏、肾脏;T-AOC含量:肝胰脏、血清、肠道、肾脏、肌肉;SOD活性:血清、肝胰脏、肾脏、肌肉;CAT活性:肝胰脏、肾脏、血清、肠道、肌肉;GSH-PX活性:肝胰脏、血清、肾脏、肠道。赵燕静等[23]在研究中比较淇河鲫不同器官组织SOD、CAT、GSH-PX活性时,结果显示活性从大到小的组织为:肝胰脏、肾脏、肌肉;王妤等[24]研究发现点篮子鱼不同组织中SOD和CAT活性在肝脏中最高,肾脏次之,肌肉中最低,与本试验结果一致。表明草鱼幼鱼抗氧化酶活性具有组织特异性,这与不同组织的生理功能差异有关。

对本试验结果中氧化鱼油对草鱼幼鱼各组织中MDA含量、T-AOC含量、SOD活性、CAT活性等综合比较,发现草鱼幼鱼肝胰脏中多种抗氧化酶活性高于肾脏、肌肉、肠等组织,氧化鱼油POV为49.72 mmol · kg-1时T-AOC、SOD、CAT活性较对照组均显著下降,POV为144.64 mmol · kg-1时MDA含量即显著提高,而其他组织多是在POV为345.45 mmol · kg-1时有显著变化,可见低氧化程度的鱼油即对肝胰脏产生较强烈的氧化损伤,说明肝胰脏对氧化鱼油诱导的氧化应激比较敏感,与Gao等[25]研究结果一致。因此可以认为肝脏是发挥抗氧化防御作用的主要组织。原因是肝脏在机体内承担着代谢、排泄和解毒等重要生理功能,最能反映机体的营养生理和病理状态[26]。

参考文献(References)
[1] Ji H, Om A D, Yoshimatsu T, et al. Effect of dietary docosahexaenoic acid on lipogenesis and lipolysis in black sea bream, Acanthopagrus schlegeli[J]. Acta Oceanologica Sinica, 2007, 26(1):112-121
[2] Om A D, Ji H, Umino T, et al. Dietary effects of eicosapentaenoic acid and docosahexaenoic acid on lipid metabolism in black sea bream[J]. Fisheries Sci, 2003, 69(6):1182-1193
[3] 周继术, 吉红, 王建华, 等. 鱼油对鲤生长及脂质代谢的影响[J]. 中国海洋大学学报, 2008, 38(2):275-280[Zhou J S, Ji H, Wang J H, et al. Influence of fish oil on growth and lipid metabolism in common carp(Cyprinus carpio)[J]. Periodical of Ocean University of China, 2008, 38(2):275-280(in Chinese with English abstract)]
[4] 季文娟. 饲料中不同脂肪源对黑鲷幼鱼生长和鱼体脂肪酸组成的影响[J]. 海洋水产研究, 1999, 20(1):70-74[Ji W J. The influence of different fat sources in feed on the growth rate of juvenile and fatty acid composition of body fat of black sea bream(Sparus macrocephalus)[J]. Marine Fisherries Reseach, 1999, 20(1):70-74(in Chinese with English abstract)]
[5] 周永奎, 李二超, 陈立侨. 鱼油在水产饲料中的应用[J]. 饲料广角, 2005(13):38-41[Zhou Y K, Li E C, Chen L Q. The application of fish oil in aquatic feed[J]. Feed China, 2005(13):38-41(in Chinese)]
[6] Kanazawa K. Hepatic dysfunction caused by dietary products of lipid peroxidation[J]. International Journal of Tissue Reactions, 1991, 13(2):67-78
[7] 周建川, 赵丽红, 黄薇, 等. 氧化鱼油对蛋鸡生产性能、蛋品质及血清抗氧化指标的影响[J]. 动物营养学报, 2012, 24(2):301-306[Zhou J C, Zhao L H, Huang W, et al. Effects of oxidized fish oil on performance, egg quality and serum antioxidant indexes of laying hens[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2012, 24(2):301-306(in Chinese with English abstract)]
[8] 黄琳, 蒋宗勇, 林映才, 等. 饲喂氧化鱼油对新生仔猪肠道黏膜免疫应答的影响及大豆异黄酮的干预作用[J]. 动物营养学报, 2011, 23(5):799-806[Huang L, Jiang Z Y, Lin Y C, et al. Influence of oxidized fish oil on intestinal mucosal innune response in Neonatal piglets and the ues of soybean isoflavones as an intervention measure[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2011, 23(5):799-806(in Chinese with English abstract)]
[9] Yeh Y H, Lee Y T. Effect of red yeast rice on toxicity of oxidized cholesterol and oxidized fish oil in rats[J/OL]. The European e-Journal of Clinical Nutrition and Metabolism, 2010, 5(5):230-237
[10] Hwang D F, Hour J L, Cheng H M. Effect of taurine on toxicity of oxidized fish oil in rats[J]. Food and Chemical Toxicology, 2010, 38(7):585-591
[11] Dong X L, Lei W, Zhu X M, et al. Effects of dietary oxidized fish oil on growth performance and skin colour of Chinese longsnout catfish(Leiocassis longirostris Günther)[J]. Aquaculture Nutrition, 2011, 17(4):861-868
[12] 任泽林, 霍启光, 曾虹, 等. 氧化鱼油对鲤鱼生产性能和肌肉组织结构的影响[J]. 动物营养学报, 2001, 13(1):59-64[Ren Z L, Huo Q G, Zeng H, et al. Effect of oxidized fish oil on the performance and muscular histological structure of carps[J]. Acta Zoo Nutimenta Sinica, 2001, 13(1):59-64(in Chinese with English abstract)]
[13] 韩雨哲, 姜志强, 任同军, 等. 氧化鱼油与棕榈油对花鲈肝脏抗氧化酶及组织结构的影响[J]. 中国水产科学, 2010, 17(4):798-806[Han Y Z, Jiang Z Q, Ren T J, et al. Effects of oxidized fish oil blended with palm oil on antioxidant capacity and histology of Japanese sea bass(Lateolabrax maculatus)juvenile[J]. Journal of Fishery Sciences of China, 2010, 17(4):798-806(in Chinese with English abstract)]
[14] 刘伟, 张桂兰, 陈海燕. 饲料添加氧化油脂对鲤体内脂质过氧化及血液指标的影响[J]. 中国水产科学, 1997, 4(1):94-96[Liu W, Zhang G L, Chen H Y. Effects of feed with oxidized fish oil on lipid peroxidation and blood index of carp[J]. Journal of Fishery Sciences of China, 1997, 4(1):94-96(in Chinese)]
[15] 袁施彬, 陈代文. 氧化应激对断奶仔猪组织抗氧化酶活性和病理学变化的影响[J]. 中国兽医学报, 2009, 29(1):74-78[Yuan S B, Chen D W. Effect of oxidative stress on the antioxidant enzymes and pathological changes in piglets[J]. Chinese Journal of Veterinary Sciences, 2009, 29(1):74-78(in Chinese with English abstract)]
[16] 彭士明, 陈立侨, 叶金云, 等. 饲料中添加氧化鱼油对黑鲷幼鱼生长的影响[J]. 水产学报, 2007, 31(S1):109-115[Peng S M, Chen L Q, Ye Y J, et al. Effect of dietary oxidized fish oil on growth performance of juvenile black seabream Acanthopagrus schlegeli[J]. Journal of Fisheries of China, 2007, 31(S1):109-115(in Chinese with English abstract)]
[17] 王新民. 人体抗氧化防御系统浅谈[J]. 卫生职业教育, 2011, 29(14):156-158[Wang X M. Introduction to human antioxidant defense system[J]. Health Vocational Education, 2011, 29(14):156-158(in Chinese with English abstract)]
[18] Hai D Q, Varga I S, Matkovics B. Effects of an organophosphate on the antioxidant systems of fish tissues[J]. Acta Biologica Hungarica, 1995, 46(1):39-50
[19] 任泽林, 曾虹, 霍启光, 等. 氧化鱼油对鲤鱼肝胰脏抗氧化机能及其组织结构的影响[J]. 大连水产学院学报, 2000, 15(4):235-243[Ren Z L, Zeng H, Huo Q G, et al. Effects of oxidized fish oil on the anti-oxidative function and histological structure of carp hepatopancreas[J]. Journal of Dalian Ocean University, 2000, 15(4):235-243(in Chinese with English abstract)]
[20] Vázquez-Añón M, Jenkins T. Effects of feeding oxidized fat with or without dietary antioxidants on nutrient digestibility, microbial nitrogen, and fatty acid metabolism[J]. Journal of Dairy Science, 2007, 90(9):4361-4367
[21] 苏传福, 罗莉, 李芹, 等. 硒对草鱼抗氧化功能及组织结构的影响[J]. 西南师范大学学报:自然科学版, 2008, 33(5):69-75[Su C F, Luo L, Li Q, et al. Effects of dietary selenium on the antioxidation capability and histological strueture of grass carp, Cenopharyngodonidellus[J]. Journal of Southwest China Normal University:Natural Science Edition, 2008, 33(5):69-75(in Chinese with English abstract)]
[22] 谢巧雄, 朱心玲, 卢全章. 亚硒酸钠对四抓化碳损伤草鱼肝原代细胞与肝组织的保护作用[J]. 水生生物学报, 1996, 20(3):229-235[Xie Q X, Zhu X L, Lu Q Z. The role of sodium selenite in protection of primary hepatocytes andl iver against carbon tetrachloride toxicity in grass carp[J]. Acta Hydrobiologica Sinica, 1996, 20(3):229-235(in Chinese with English abstract)]
[23] 赵燕静, 蒋昕彧, 吴凡, 等. 淇河鲫不同器官组织中抗氧化酶活性和丙二醛含量的比较[J]. 水产科学, 2014, 33(8):488-492[Zhao Y J, Jiang X Y, Wu F, et al. Comparison of antioxidant enzyme activity and malondialdehyde content in different tissues and organs in crucian carp Carassius auratus in Qihe River[J]. Fisheries Science, 2014, 33(8):488-492(in Chinese with English abstract)]
[24] 王妤, 庄平, 章龙珍, 等. 盐度对点篮子鱼的存活、生长及抗氧化防御系统的影响[J]. 水产学报, 2011, 35(1):66-73[Wang Y, Zhuang P, Zhang L Z, et al. Effects of salinity on survival, growth and antioxidant defense system of Siganus guttatus[J]. Journal of Fisheries of China, 2011, 35(1):66-73(in Chinese with English abstract)]
[25] Gao J, Koshio S, Ishikawa M, et al. Effects of dietary palm oil supplements with oxidized and non-oxidized fish oil on growth performance and fatty acid compositions of juvenile Japanese sea bass, Lateolabrax japonicus[J]. Aquaculture, 2012, 324/325:97-103
[26] 马淑懿, 黄荣春. 四种淡水养殖鱼类肝胰脏显微结构的比较研究[J]. 中山大学学报:自然科学版, 1987(3):106-112[Ma S Y, Huang R C. A comparative study on the microscopic structure of the hepatopancreas in four species of fresh-water fish[J]. Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Sunyatseni, 1987(3):106-112(in Chinese with English abstract)]
氧化鱼油对草鱼幼鱼脂质过氧化及抗氧化酶活性的影响
鞠雪, 王秋举, 罗莎, 董晓庆, 陈玉珂, 杨翼羽, 张东鸣