蜚蠊俗称蟑螂,是一类重要的病媒生物,它适应性强、活动范围广,常栖息于阴暗、潮湿、温暖的角落,边吃、边吐并排泄的生活习性能污染食品及周围环境。已有报道蜚蠊可携带并传播多种病原体,引发传染病及过敏反应等[1-2]。常州市近年来蜚蠊侵害较为普遍,蜚蠊危害已成为影响市民健康生活的热点问题[3],对人体健康和生命安全造成潜在威胁。了解常州市蜚蠊携带病原体的状况,进而为预防和控制蜚蠊等引发的媒介生物性疾病提供科学依据。于不同生境中采集蜚蠊活体样本,对其体表、体内携带病原体状况进行研究。
1 材料与方法 1.1 试虫来源根据研究目的,选择有代表性的生境,包括餐饮、医院、农贸市场、口岸、居民区、超市进行试虫采集。
1.2 试虫采集与制备 1.2.1 试虫采集采用瓶捕法[4],使用500 mL广口瓶,瓶内放置甜鲜面包屑作为诱饵,瓶口插1只用牛皮纸制作的漏斗,深入瓶内的漏斗底部做成长缝形且离瓶底5 cm以上。将瓶横放在蜚蠊活动场所的地面,晚放晨收,将捕获到的蜚蠊进行分类计数和鉴别。
1.2.2 制备将捕获的蜚蠊用乙酸乙酯麻醉10 min,根据不同生境进行编组,分别放入灭菌瓶中,注入50 mL 0.85%无菌生理盐水,震荡洗涤蜚蠊体表80次[5],取出洗液,其中另取出10 mL进行离心沉淀,取沉淀液加40%生理盐水悬浮待检。将上述体表处理过的蜚蠊移至灭菌培养皿中,加入75%乙醇消毒5 min,用无菌生理盐水冲洗2~3次,洗净虫体后用灭菌剪刀剪去蜚蠊头、翅、腿,剪开腹部并置于灭菌的有玻璃球的三角烧瓶中,加入0.85%无菌生理盐水50 mL,用力反复震荡,直至蜚蠊内脏磨烂,呈乳白色悬液待检。
1.3 病原体检测 1.3.1 细菌检测将上述分组处理的体表及体内待检液各取1 mL洗脱液,分别接种肉汤、碱性蛋白胨水、GN、SF、SCDLP做增菌培养。按常规检验方法接种普通琼脂平板、血琼脂、SS琼脂、麦康凯培养基、十六烷三甲基溴化铵琼脂等平板进行分离纯化,生化试验、血清学鉴定[6-7],记录体表及体内的细菌种类与数量。所用试剂均购置于专业试剂公司。
1.3.2 病毒检测分别取上述体表、体内洗脱液各50 μL采用酶联免疫法进行甲型肝炎抗体(IgM)、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)检测。
1.3.3 寄生虫卵的镜检用饱和盐水漂浮法镜检寄生虫卵。
1.4 统计分析SPSS 12.0软件进行数据整理与分析。采用描述性分析方法,以某一生境检出病原体的种类数/病原体种类总数,计算该生境病原体检出率;用卡方检验不同生境蜚蠊病原体检出率。
2 结果本研究在市区不同生境采集到的蜚蠊共有德国小蠊和黑胸大蠊2种计26组,其中体表检出病原体的有25组,检出率为96%,体内病原体检测率为100%(表 1)。检出的病原体包括:大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、沙门菌、志贺菌、溶血性链球菌、肺炎克雷伯菌、HBsAg、蛔虫卵。
| 种类 | 检出部位 | 检测数 (组) |
细菌 | 病毒 | 寄生虫 | |||||
| 带菌数 (组) |
带菌率 (%) |
带毒数 (组) |
带毒率 (%) |
带虫数 (组) |
带虫率 (%) |
|||||
| 德国小蠊 | 体表 | 24 | 23 | 96 | 1 | 4 | 2 | 8 | ||
| 体内 | 24 | 24 | 100 | 1 | 4 | 2 | 8 | |||
| 黑胸大蠊 | 体表 | 2 | 2 | 100 | 0 | 0 | 0 | 0 | ||
| 体内 | 2 | 2 | 100 | 0 | 0 | 0 | 0 | |||
2.1 蜚蠊病原体检出情况
24组德国小蠊体表检出病原体的有23组,检出率为96%,体内病原体检出率为100%。其中体表、体内HBsAg均为阳性1组,甲型肝炎病毒未检出。体表、体内寄生虫卵检测均为阳性2组,为蛔虫卵,钩虫卵和丝虫卵未检出。2组黑胸大蠊体表、体内均检出致病菌,检出率为100%。体表、体内HBsAg和甲型肝炎病毒检测均为阴性。寄生虫卵未检出(表 1)。
2.2 不同生存环境蜚蠊病原体携带状况医院采集的蜚蠊病原体携带种类最多,主要有大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、沙门菌、志贺菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、蛔虫卵等,其中1组蜚蠊检出HBsAg阳性;其次是农贸市场,主要有大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、沙门菌、志贺菌、溶血性链球菌、蛔虫卵;超市和口岸采集的蜚蠊病原体种类均为大肠杆菌、沙门菌和志贺菌(表 2)。医院蜚蠊携带病原体检出率最高,为67%;居户最低,为17%。不同生境蜚蠊携带病原体检出率差异有统计学意义(χ2等于11.91;P小于0.05;表 2)。
| 试虫来源 | 检测组数 | 细菌 | 病毒 | 寄生虫 | 检出率 (%) |
|||||||||||
| 大肠埃希菌 | 葡萄球菌 | 铜绿假单胞菌 | 溶血性链球菌 | 沙门菌 | 志贺菌 | 肺炎克雷伯菌 | 甲肝 | 乙肝 | 蛔虫卵 | 钩虫卵 | 丝虫卵 | |||||
| 餐饮场所 | 6 | 6 | 0 | 1 | 0 | 3 | 1 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 33 | ||
| 医院 | 5 | 5 | 2 | 3 | 2 | 3 | 4 | 1 | 0 | 1 | 1 | 0 | 0 | 75 | ||
| 农贸市场 | 6 | 6 | 0 | 2 | 1 | 2 | 1 | 0 | 0 | 0 | 1 | 0 | 0 | 50 | ||
| 居户 | 4 | 4 | 0 | 0 | 0 | 1 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 17 | ||
| 口岸 | 2 | 2 | 0 | 0 | 0 | 1 | 1 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 25 | ||
| 超市 | 3 | 3 | 0 | 0 | 0 | 1 | 2 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 25 | ||
3 讨论
研究结果显示,常州市蜚蠊携带病原体检出率较高,其中德国小蠊体表检出率为96%,体内为100%,德国小蠊是我市的蜚蠊优势种群[3]。本次研究在餐饮场所、医院、农贸市场等生境捕获的蜚蠊体表、体内检出的病原体包括有:大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、溶血性链球菌、沙门菌等,与国内有关报道较一致[6-7]。而这些生境和人群活动密切联系,提示若有传染源存在并污染蜚蠊栖息地环境,即有可能通过蜚蠊的机械携带和传播而导致相关疾病发生与流行的风险。
王芸等[8]从蜚蠊体表、体内分离到大肠埃希菌、沙门菌、志贺菌、变形杆菌及肺炎克雷伯菌等,李国太等[9]报道从蜚蠊体表检出各类致病菌、寄生虫卵,以及HBsAg阳性。本研究检出的致病菌有大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、沙门菌、志贺菌、溶血性链球菌及肺炎克雷伯菌等,此外还检出蛔虫卵2组和HBsAg阳性1组。戴晓煌等[10]报道细菌在蜚蠊体内可以生物性传播,而倪晓平等[11]研究证明了蜚蠊不仅是大肠埃希菌的贮存宿主和传播媒介,更重要的是潜在的人类感染的传染源。在常州主要蜚蠊种类体内外检出病原体,而蜚蠊作为一类生物种群,其自身的繁殖活动是一个动态指标,受自然和社会因素的影响较大,因此,有必要进一步深入开展其生态习性与传播疾病关系的研究。
从医院生境中捕获的蜚蠊携带病原体种类和检出率均较高,与国内有关报道类似[7],所检出的铜绿假单胞菌、溶血性链球菌、肺炎克雷伯菌均为当前报道的重要条件致病菌与医源性感染菌[12-13],这些病原体通过蜚蠊的机械携带和传播,可以污染周围活动环境,可见,蜚蠊作为一种重要的传播媒介,在传播疾病中的作用不可低估。
本次研究初步掌握了常州市蜚蠊病原体携带状况,相关病原体的检出进一步证明蜚蠊作为一种重要病媒生物在传播疾病过程中的意义。因此,应加大针对蜚蠊这一重要病媒生物的控制力度,从而降低相关媒介生物性疾病的传播风险。
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