手足口病(HFMD)是由多种肠道病毒引起的常见传染病，引发手足口病的肠道病毒有20多种(型)，主要以肠道病毒71型(简称EV71) 和柯萨奇A组16型(简称CoxA16) 交替流行为主，在世界各地广泛流行^[1]。该病具有传染性强、在短时间内可造成较大范围的流行、疫情控制难度大等特点^[2]。多数病例病情轻，少数病例病情进展快，病死率高^[3]。近几年遵义市手足口病例报告数逐年上升，死亡病例时有发生，防控形势日趋严峻，为此，卫生部门加大了对手足口病的防控和监测力度，制定了相应的防控指南和应急预案，实验室诊断以实时荧光定量PCR方法为主，旨在为遵义市的手足口病疫情防控提供及时、准确和科学的实验室依据。

1 材料与方法 1.1 标本来源

所有病例均按照《手足口病预防控制指南(2009年版)》^[4]中的诊断标准进行采样，标本主要来自遵义医学院、遵义市第一人民医院、第二人民医院及各县(市)区疾控中心送检的疑似手足口病例的咽拭子或肛拭子标本。所有标本均按《手足口病预防控制指南(2009年版)》要求冷藏运输或-80℃保存备用。1 068例标本主要集中在1~5岁儿童，其中包括187例重症和7例死亡病例。

1.2 实验室检测

1.2.1 检测方法

通过实时荧光定量PCR对采集的标本进行肠道病毒核酸检测。咽拭子或肛拭子标本充分振荡后，3 000 rpm离心20 min，吸上清液待检; 病毒RNA提取用大连宝生物公司的TaKaRa MiniBEST viralRNA试剂盒，提取的RNA50 μL，用达安基因公司的肠道通用病毒EV、肠道病毒EV71、CoxA16荧光定量检测试剂盒检测，按说明书进行操作。

1.2.2 仪器设备

ABIstep one plus型实时荧光定量PCR基因扩增仪(美国ABI公司)。

2 结果 2.1 基本资料

全年除了1月均有病例报告，手足口病例从4月开始呈上升趋势，疑似病例中男性681例，女性387例，性别比为1.75: 1，发病年龄集中在5岁以下(97.09%)，以散居儿童为主。

2.2 病原学结果分析

1 068例标本中，阳性标本668例，阳性率为62.55%，其中EV71阳性319例，占阳性总数47.75%; CoxA16阳性191例，占阳性总数28.59%; EV71和CoxA16两种病毒核酸阳性47例，占阳性总数7.04%;其他肠道病毒阳性111例，占阳性总数16.62%;其余为阴性。187例重症标本中，实验室诊断阳性160例，总阳性率为85.56%，占总阳性例数的23.95%;其中EV71阳性121例，占阳性总数的75.63%; CoxA16阳性16例，占阳性总数的10.00%;其他肠道病毒阳性13例，占阳性总数的8.13%; EV71和CoxA16两种病毒核酸阳性10例，占阳性总数的6.25%。重症病例中EV71病毒感染明显高于CoxA16病毒感染(表 1，表 2)。

3 讨论

从以上数据可看出，遵义市2011年手足口病四季均有病例发生，从4月份开始呈上升趋势，7月份到达高峰，11月份时再次出现一个高峰。发病年龄多在5岁以下，主要集中在3岁以下儿童，男性儿童发病率高于女性儿童，与李锡太等^[5]的报道吻合。散居儿童高发，其次为托幼机构，散居临床病例为2 955人，托幼机构的临床病例为1 141人，学生221人。

全年对手足口病的病原学检测时间和报告时限均按照《手足口病预防控制指南(2009年版)》要求操作，及时为流行病学提供了科学的实验室依据，为手足口病的防控提前预警，使疫情得到及时有效的控制。

目前我国手足口病的病原以EV71和CoxA16流行为主^[6]，遵义市2011年手足口病以EV71病毒感染为主，其次是CoxA16，重症及死亡病例均以EV71病毒感染为主，病程进展迅速，提示要高度关注EV71病毒感染患儿的病程发展，做好重症监护及抢救准备，最大限度地减少儿童死亡率的发生，从而降低手足口病患儿的死亡率。

目前尚无针对手足口病的疫苗和特异高效的抗病毒药物^[7]，而手足口病持续有病例报告，故应加大对手足口病的健康教育宣传和病原学监测力度，及时掌握手足口病的流行规律及毒株类型，为流行病学提供科学的防控依据，为政府部门提供决策依据，制定一系列行之有效的防控措施，有效地控制手足口病的爆发流行。