甘蔗糖业 2014 Issue (03): 41-46   PDF    
葡聚糖酶应用于甘蔗制糖过程的试验研究
钟志才1, 马步2,3, 徐杰荣2, 邱瑞良2, 杨汉珉2, 陶胜国2, 常国炜1, 梁达奉1,2,3     
1 广州甘蔗糖业研究所 广东省甘蔗改良与生物炼制重点实验室, 广东广州 510316;
2 广西农垦糖业集团股份有限公司, 广西南宁 530002;
3 广西糖业研发中心, 广西南宁 530002
摘要:2013/14 年榨季在广西农垦的多家糖厂进行了葡聚糖酶应用的生产性试验。结果表明葡聚糖酶可有效清除制糖物料中的葡聚糖,除去率达到98%以上,清混汁纯度差达到2 AP 以上,煮炼回收率提高1 个百分点以上。使用葡聚糖单抗试剂盒能快捷、准确测定甘蔗原料、在制品和产品中的葡聚糖含量,解决制糖生产中葡聚糖测定的大难题。
关键词甘蔗制糖     葡聚糖酶     葡聚糖单抗试剂盒     澄清     亚硫酸法    
Experiment and Study on the Use of Dextranase for Canesugar Process
ZHONG Zhi-cai1, MA Bu2,3, XU Jie-rong2, QIU Rui-liang2, YANG Han-min2, TAO Sheng-guo2, CHANG Guo-wei1, LIANG Da-feng1,2,3     
1 Guangzhou Sugarcane Industry Research Institute/Guangdong Key Lab of Sugarcane Improvement & Bio-Refinery Guangzhou 510316;
2 Agricultural Reclamation of Guangxi Sugar Industry Group Co., LTD., Nanning, Guangxi 530002;
3 Guangxi Sugar Industry Research and Development Center, Nanning, Guangxi 530002
Abstract: In 2013/14 milling season, the production test of dextranase was carried out in some sugar factories in the Guangxi Agricultural Reclamation Group. It is indicated that the dextran of cane juice can be eliminated by dextranase, the elimination ratio can be above 98%. The purity difference between purified juice and mixed juice can be increased to above 2 AP and the boiling house recovery can be raised to above 1%. Dextran content in sugarcane, intermediate products and products can be measured rapidly and accurately by monoclonal antibody kit, so the big problem, dextran measurement in production can be resolved.
Key words: Canesugar process     Dextranase     Monoclonal antibody kit     Clarification     Sulfitation process    
0 前言

传统甘蔗亚硫酸法制糖工艺清净效率低,原料 和物料中葡聚糖对制糖各工序以及糖产品质量带来 严重负面影响。亚硫酸法制糖工艺已有百年历史, 优点是工艺和设备简单,成本较低。但它存在着糖 汁清净脱色效率低的缺陷,生产的白砂糖的色值和 灰分以及二氧化硫含量偏高,难以在高端的食品、 饮料(如可口可乐等)、制药行业中得到使用。改革 亚硫酸法制糖工艺被认为是目前糖业界急需进行的 研究项目之一。我国90%以上的耕地白糖是采用亚 硫酸法进行生产,寻找一种新的技术先进、简单易 行、环保绿色的制糖澄清工艺技术以改革和发展现 有的亚硫酸法制糖工艺已成为制糖行业的当务之 急。制糖过程使用酶制剂对于提高澄清效果、降低 能耗和减少排污有明显作用,是典型的绿色生物处 理工艺[1]。在蔗汁澄清过程中使用新型酶制剂——葡聚糖酶,可有效降解清除制糖物料中的葡聚糖, 提高澄清效果,增加清混汁纯度差,提高蔗糖结晶 率,增加煮炼回收率及提高白砂糖产品质量。

上世纪60 年代,国外就开始探索应用淀粉酶、 葡聚糖酶、果胶酶等除去制糖物料中多糖,降低物 料粘度,加快沉降过滤速度,减少蒸煮时间,降低 蒸汽消耗,提高糖的品质和产量[2]。此项技术在美 国、澳大利亚、丹麦等国家已得到一定的推广和应 用[3, 4]。葡聚糖酶在制糖中的作用效果显著,可提升 制糖产品的质量和竞争力。高效葡聚糖酶应用于制 糖清净无疑对制糖行业清洁生产、技术进步及促进 产业发展具有积极意义。我们在2013/14 年榨季分 别在广西农垦糖业集团下属的多家糖厂使用本研发 团队自主研发的葡聚糖酶进行了生产性试验,均取 得了可喜的结果,为今后的葡聚糖酶在糖厂澄清中 广泛应用打下了基础;试验中采用葡聚糖单抗试剂 盒测定生产过程中的葡聚糖,能快捷、准确测定甘 蔗原料、在制品和产品中的葡聚糖含量,对葡聚糖 酶的作用效果进行准确评价。本文就葡聚糖酶应用 于糖厂清净提高产品质量及回收的效果进行研究。

1 试验方法 1.1 葡聚糖酶添加点的确定

根据葡聚糖酶学性质研究结果,再结合制糖生 产的工艺条件确定酶添加位置,一般葡聚糖酶的酶 解反应温度不超过65℃、酶解pH 范围选择在4.5~ 6.8 之间、酶解作用时间不少于5 min,物料锤度不 大于35゜Bx。因此将加酶点定在甘蔗压榨蔗汁中。

根据甘蔗压榨采用复式渗浸法的情况,加酶点 定在甘蔗压榨机组的第1 座及倒数第2 座压榨机的 蔗汁槽中。

1.2 葡聚糖酶添加装置及添加量

葡聚糖酶为一种液体产品,其添加装置由2 个 100 L 塑料桶及2 个蠕动计量泵组成。

葡聚糖酶的加入量:按每万吨甘蔗加入150 kg 原液,在第1 个点加入量为酶总量的2/3,第2 点加 入量为酶总量的1/3。

1.3 葡聚糖酶使用效果的评价方法

采用未加酶组空白试验与加酶组试验进行对 比。通过加酶前后混合汁、澄清汁、白砂糖等中间 制品及产品的葡聚糖含量变化以及澄清汁、白砂糖 质量理化指标、煮炼收回、煮糖操作等综合评价葡 聚糖酶使用效果。

1.4 样品采集及样品分析

样品采集仍按糖厂日常方法进行采集,样品的 锤度、糖度(蔗糖分)、纯度、色值等按制糖日常分 析方法进行。样品的葡聚糖含量利用葡聚糖单抗试 剂盒进行测定。葡聚糖与葡聚糖单抗所形成的可溶 性免疫复合物会从液相析出,使反应液出现混浊, 通过测定反应液的浊度与标准品对照,即可计算出 检样中的葡聚糖含量。

1.5 葡聚糖单抗试剂盒测定样品葡聚糖含量[5, 6]

(1)样品制备:待测样品经0.45 μm 滤器过滤。 如待测样品中葡聚糖含量大于1000 μg/mL,则必须 进行稀释后再测定。

(2)标准品测定:把1.0 mL 抗体加入测试皿中, 置入浊度计,读数,重复几次,读取稳定浊度值作为 空白值N 标0。加入10 μL 标准品,立即用1 mL 移液 枪反复吹打6 次(尽量避免产生气泡)并开始计时置 入浊度计,达2 min 时读取浊度值N 标,则葡聚糖标 准品引起的浊度变化值△NTU 标为(N 标-N 标 0)。

(3)样品测定:把1.0 mL 抗体加入测试皿中, 置入浊度计,读取稳定浊度值作为空白值N 样0。加 入10 μL 待测样品,立即用用1 mL 移液枪反复吹打 6 次(尽量避免产生气泡)并开始计时置入浊度计, 2 min 时读取浊度值N 样,则样品引起的浊度变化值 △NTU 样为(N 样-N 样 0)。

(4)计算结果表示: CF=M 标/△NTU 标 M 样=CF×△NTU 样

式中:CF 为转换系数,M 标为葡聚糖标准品浓 度(ppm),M 样为样品中的葡聚糖含量(mg/kg)。

2 试验结果与分析 2.1 蔗场甘蔗葡聚糖检测

在蔗场人工采集不同新鲜程度的甘蔗样品3 个,分别为新鲜甘蔗、刀口表面变黑甘蔗、完全变 质甘蔗,利用小型压榨机压榨出蔗汁,并利用免疫 比浊法测其葡聚糖,结果如表1 所示。结果表明, 葡聚糖含量能反映甘蔗的新鲜程度,甘蔗越不新鲜, 其蔗汁葡聚糖含量越高,锤度也越低。这是因为甘 蔗在存放过程中微生物大量繁殖,导致糖分转化损 失,同时产生葡聚糖。

表1 不同新鲜程度的甘蔗蔗汁葡聚糖含量比较
2.2 加酶前后各中间汁的葡聚糖含量变化

表2 为加酶前后各在制品的葡聚糖含量,序号 1、2、3、4 分别表示在4 个糖厂进行试验。从表2可以看出,4 个糖厂的混合汁(初压汁)空白样品 葡聚糖含量还是较高,说明甘蔗不新鲜,在存放和 压榨过程中微生物大量繁殖,导致糖分转化损失, 同时产生葡聚糖。而加葡聚糖酶后混合汁葡聚糖含 量在2 号糖厂从177 mg/kg·°Bx 降到为19 mg/kg·°Bx,而清汁未检出,说明加入葡聚糖酶能完 全降解蔗汁中的葡聚糖。3 号糖厂由于是停榨前的 10 多天做的试验,甘蔗砍运更不新鲜,空白样品的 混合汁、清汁葡聚糖含量达到300 mg/kg·°Bx 左右, 但加入葡聚糖酶后混合汁已降至29 ~ 38 mg/kg·°Bx,清汁已基本没有。这说明用葡聚糖酶可 以有效地除去蔗汁中的葡聚糖。

表2 加酶前后各在制品的葡聚糖含量
2.3 加酶前后澄清效果的变化情况

由于蔗汁中的葡聚糖被降解后,蔗汁的粘度会 降低,在澄清过程中可更好地清除蔗汁中的杂质, 对澄清汁的各项指标均有改善作用。表3 为加酶前 后澄清效果指标变化情况,从表3 可以看出,加酶 后脱色率和清混汁纯度差都有提高。从现场观察的 情况看,澄清汁较加酶前更透亮。

表3 加酶前后澄清效果指标变化情况
2.4 加酶前后煮糖的变化情况

加酶有助于煮炼回收的提高,表4 为加酶前后 煮糖的变化情况。从表4 可以看出,3 个糖厂甲膏 的膏蜜纯度差均提高,说明加酶后白砂糖结晶率提 高,而废蜜重力纯度下降,产糖率或煮炼收回率提 高,从废蜜带走的糖减少。从现场岗位操作工人反 映,加酶期间糖浆容易过滤,糖膏比较爽手好煮。

表4 加酶前后煮糖的变化情况
2.5 加酶前后白砂糖的葡聚糖含量变化

图1~图3 为1、3、4 号糖厂加酶前后白砂糖 的葡聚糖含量变化情况(2 号糖厂因为出产原糖没 有记录统计)。 由于糖厂的煮糖都采用套种煮制法,因此加葡 聚糖酶后,要使中间物料完全不含葡聚糖需要最少 3 天时间,从图中也证明要几天后白砂糖的葡聚糖 才能完全检测不出来。

图1 1号糖厂加酶前后白砂糖的葡聚糖含量变化情况

图2 3号糖厂加酶前后白砂糖的葡聚糖含量变化情况

图3 4号糖厂加酶前后白砂糖的葡聚糖含量变化情况
2.6 加酶前后白砂糖的质量变化情况

表5 数据是由加酶前的86 个编号和加酶期间的 85 个编号白砂糖统计得出。可以看出,二氧化硫含 量加酶前24 mg/kg,加酶后下降至18 mg/kg,加酶 后白砂糖一级A 率提高了24 个百分点。这证明了 物料中的葡聚糖加酶降解对提高白砂糖质量有一定 效果。

表5 加酶前后白砂糖的质量变化情况(3 号糖厂统计数据)
3 结论与展望

(1)在甘蔗压榨过程中使用本研发团队自主研 发的新型酶制剂——葡聚糖酶,可以有效降解蔗汁 中葡聚糖,除去率达到98%以上,白砂糖产品葡聚 糖含量低至不能检出。可以预见,在炼糖过程中, 葡聚糖酶对于清除由原糖带来的葡聚糖,提高精炼 效率,提高产品质量将起到显著的效果。

(2)加酶期间压榨车间的曲筛蔗饭(葡聚糖) 没有出现,混合汁箱的泡沫减少,消泡剂的用量减 少,蔗汁清净效果提升,糖浆容易过滤,煮糖糖膏 比较爽手、好煮,蔗糖收回率提高,废蜜纯度降低。 我们预期,酶处理后的蔗汁可以降低后续处理工艺 强度,如硫熏强度等。

(3)本试验使用葡聚糖单克隆抗体试剂盒,能 快捷、准确测定甘蔗原料、在制品和产品中的葡聚 糖含量,使甘蔗新鲜度评价和制品、产品中的葡聚 糖的监控有了科学、有效的创新方法,同时也将为 今后机械化收获甘蔗的质量管理提供科学依据。

参考文献
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[2] 黄俊杰, 范家恒. 酶在蔗汁澄清中的应用[J]. 甘蔗糖 业, 2008(2):36-37.(1)
[3] GILLIAN E, ADRIAN M, BELISARIO M. Application of dextranases in sugarcane factory :Overcoming practical problems[J]. Sugar Tech, 2009,11(2): 135-141(1)
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[5] 岑成福, 蚁细苗, 梁达奉, 等. 酶解除去蔗汁中的右旋 糖酐[J]. 甘蔗糖业, 2013(6):12-18(1)
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(本篇责任编校:朱涤荃)