急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）是全球意外死亡的主要原因。急性前壁ST段抬高型心肌梗死（ST-segment elevation myocardial infarction，STEMI）的病死率及并发症的发生率居高不下^[1]。前壁STEMI比其他部位AMI更容易诱发左心室收缩功能障碍^[2]。环状RNA（circular RNA，circRNA）是一种非编码RNA，广泛参与各种生理及病理过程^[3-6]。研究^[7]表明，circRNA MICR能够预测AMI后4个月的左心室收缩功能，可用于风险分层。本课题组前期研究^[8]通过高通量测序数据分析证实，Mmu-circ-0001380在小鼠心肌缺血/再灌注损伤模型中表达显著上调。因此，本研究拟进一步分析其人源同源分子Hsa-circRNA0001380对急性前壁STEMI急诊经皮冠状动脉介入治疗（percutaneous coronary intervention，PCI）术后发生心力衰竭的预测价值。

1 材料与方法 1.1 研究对象

选择2022年1月至12月期间大连理工大学附属中心医院（大连市中心医院）心血管内科收治的急性前壁STEMI（包括前间隔心肌梗死和广泛前壁心肌梗死）患者62例作为研究组。所有患者在发病12 h内成功接受急诊PCI。平均年龄（61.34±12.23）岁，其中男30例，女32例。排除既往有心肌梗死病史、慢性心力衰竭、先天性或瓣膜性心脏病、原发性心肌病、肺源性心脏病、心房颤动、严重肾功能不全（肌酐清除率 < 40 mL/min）、恶性肿瘤、近1个月内输血史、近2周内外伤或手术史、血液系统疾病、系统性炎症反应、自身免疫性疾病、妊娠和哺乳期的患者。根据左室射血分数（left ventricular ejection fraction，LVEF）将研究组患者再分为LVEF≥50%组和LVEF < 50%组。另选取22例同期健康体检者作为对照组，年龄和性别均与研究组匹配。本研究获得大连市中心医院伦理委员会批准（YN2022-039-30）。所有研究对象签署知情同意书。

根据Killip分级评估急性前壁STEMI心功能：Ⅰ级，无明显心功能不全；Ⅱ级，心力衰竭，肺部湿啰音范围 < 50%肺野；Ⅲ级，急性肺水肿，肺部闻及广泛湿啰音；Ⅳ级，心源性休克。

1.2 研究方法

1.2.1 收集临床资料

收集研究组和对照组的一般临床资料、实验室检查结果。一般资料包括年龄、性别、既往病史、入院时生命体征。依据Killip分级（Ⅰ~Ⅳ级）评估心功能状态。实验室指标包括肝功能、肾功能、肌钙蛋白I、N末端脑钠肽前体（N-terminal pro-brain natriuretic peptide，NT-proBNP）。

1.2.2 实时定量PCR

采集2组研究对象的静脉血2 mL，1 500 g离心5 min，分离血清后置于-80 ℃保存。应用TRIpure试剂提取血清RNA，反转录为cDNA。使用2×Taq PCR MasterMix（北京索莱宝科技有限公司）和Exicycler^TM 96荧光定量PCR仪（韩国Bioneer公司）进行PCR扩增。β-actin作内参照。引物序列如下：Hsa-circRNA0001380，正向5’- GCCACCCATTGATTTGA -3’，反向5’- GGTTCCACCAGTATTTCC -3’；β-actin，正向5’- GGCACCCAGCACAATGAA -3’，反向5’- TAGAAGCATTTGCGGTGG -3’。采用2^-ΔΔCt法计算Hsa-circRNA0001380的相对表达量。

1.2.3 评估心室功能

应用二维超声心动图评估左心室功能。采用改良Simpson法测量并记录LVEF和左心室舒张末容积（left ventricular end-diastolic volume，LVEDV）。

1.2.4 药物治疗

所有急性前壁STEMI患者均于诊断明确后行急诊PCI，术前给予阿司匹林及P2Y12抑制剂（替格瑞洛或氯吡格雷）双联抗血小板治疗，常规应用他汀类药物进行调血脂及稳定斑块治疗。依据急性冠脉综合征管理指南及患者临床状况，个体化给予肾素-血管紧张素-醛固酮系统抑制剂。

1.3 统计学分析

采用SPSS 25.0软件进行统计分析。正态分布的计量资料用x±s表示，非正态分布计量资料用M（P₂₅~P₇₅）表示。符合正态分布且方差齐的2组间比较采用独立样本t检验，不符合上述条件的两样本计量资料比较采用非参数秩和检验。计数资料用率（%）表示，组间比较采用χ²检验或Fisher确切概率法。对Hsa-circRNA0001380与心脏功能指标之间进行相关分析时，若双变量正态分布或近似正态分布则采用直线相关分析，否则采用秩相关分析。通过绘制受试者操作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线，计算曲线下面积（area under the curve，AUC），分析Hsa-circRNA0001380与NT-proBNP对急性前壁STEMI后心力衰竭的诊断价值。P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果 2.1 一般资料比较

研究组患者62例，平均年龄（61.34±12.23）岁，其中男48例，女14例；对照组32例，平均年龄（61.23±11.66）岁，其中男10例，女12例。研究组中，心功能Killip分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级的患者分别为31、20、7、4例；根据LVEF分类，LVEF≥50%组患者27例，均为Killip分级Ⅰ级；LVEF < 50%组患者35例，其中Killip分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级的患者分别为4、20、7、4例。

2.2 各组Hsa-circRNA0001380水平比较

与对照组比较，研究组患者Hsa-circRNA0001380水平显著升高，且随着Killip分级升高呈上升趋势，差异有统计学意义（P < 0.001）。此外，LVEF < 50%组急性前壁STEMI患者的Hsa-circRNA0001380表达水平显著高于LVEF≥50%组，差异有统计学意义（P < 0.001）。说明Hsa-circRNA0001380与急性前壁STEMI患者心力衰竭的严重程度有关，提示其可作为急诊PCI术后心力衰竭危险分层的潜在标志物。见表 1。

2.3 基于Hsa-circRNA0001380中位表达水平分析心脏功能

根据Hsa-circRNA0001380的中位表达水平（0.012 7），将研究组患者分为高表达组（血清水平≥0.012 7，n = 31）和低表达组（血清水平 < 0.012 7，n = 31）。结果显示，高表达组中Killip分级Ⅱ~Ⅳ级患者比例高于低表达组。同时，高表达组肌钙蛋白I、NT-proBNP水平显著高于低表达组。此外，入院时高表达组患者LVEDV较高，LVEF较低，见表 2。

2.4 相关性分析

血清中Hsa-circRNA0001380表达水平与心肌损伤标志物肌钙蛋白I、心力衰竭相关指标NT-proBNP以及心脏结构参数LVEDV均呈显著正相关（r = 0.700，P < 0.01；r = 0.644，P < 0.01；r = 0.594，P < 0.01）。表明随着Hsa-circRNA0001380水平升高，上述反映心肌损伤、心功能下降及左心室容积的指标均相应上升。相反，Hsa-circRNA0001380与LVEF呈显著负相关（r =-0.838，P < 0.01），提示其水平增高伴随左心室收缩功能下降。见图 1。因此，Hsa-circRNA0001380水平与多项心脏结构及功能指标具有显著相关性，提示其可能成为评估心脏功能的潜在生物标志物。

2.5 Hsa-circRNA0001380对急性前壁STEMI患者心力衰竭的预测价值

ROC曲线显示，Hsa-circRNA0001380的AUC为0.953（95%CI：0.895~1.000），> NT-proBNP [AUC为0.845（95%CI：0.751~0.940）]，提示Hsa-circRNA0001380对急性前壁STEMI患者急诊PCI术后心力衰竭的发生较NT-proBNP具有更高的预测效能。Hsa-circRNA0001380高表达提示急性前壁STEMI患者心力衰竭发生风险增加。当截断值为0.012 436时，其预测灵敏度为96.8%，特异度为90.0%，见图 2。以上结果提示Hsa-circRNA0001380可能是急性前壁STEMI患者发生心力衰竭的潜在生物学标志物。

3 讨论

STEMI由冠状动脉粥样硬化斑块破裂或糜烂引起，是冠状动脉粥样硬化性心脏病的一个严重类型。STEMI后心力衰竭是导致心源性死亡及致残率增加的重要原因之一，常导致患者预后不良^[9-12]。研究^[13]显示，急性STEMI后新发心力衰竭的发生率为10%~45%。急性前壁STEMI常并发血流动力学紊乱及左心室收缩功能明显受损，发生心血管不良事件风险增高^[14]，对此类患者早期监测心功能、指导治疗及评估临床预后具有重要意义。

circRNA是通过自剪切产生的连续闭合、环状非编码RNA^[3-5]，其特点为高稳定性，且进化保守，在转录后层面调控基因表达，在多种疾病的生理和病理过程中均发挥作用^[15]。研究^[16-18]显示，circRNA可作为诊断AMI及判断预后的生物标志物。自噬相关环状RNA（autophagy-related circular RNA，ACR）是由自噬基因编码的circRNA，通过抑制自噬保护心肌细胞，并减少心肌细胞凋亡，减轻心肌缺血/再灌注损伤，缩小心肌梗死面积^[19]。有研究^[20]发现，心肌梗死后小鼠模型circRNA CDR1as及miR-7a表达水平上调，且circRNA CDR1as可能通过调控miR-7a的靶标而促进AMI的发生发展。血清中circRNA水平增高与AMI后的心力衰竭发生相关。还有研究^[21]发现，circRNA MICRA表达水平与心肌梗死后左心室收缩功能障碍程度有一定的关联，MICRA水平较低的心肌梗死患者更易出现LVEF降低。既往研究^[22]表明，Hsa-circRNA0001380在活动性肺结核患者外周血单核细胞中表达下调，可作为活动性肺结核诊断的潜在生物标志物。然而，Hsa-circRNA0001380在急性前壁STEMI及随后的心力衰竭发展中的诊断价值尚未见报道。

本研究结果显示，急性前壁STEMI患者外周血中Hsa-circRNA0001380表达上调，该结果与circRNA可作为AMI良好生物标志物的观点一致，支持Hsa-circRNA0001380可能是急性前壁STEMI的诊断性生物标志物。此外，血清Hsa-circRNA0001380水平还与急性前壁STEMI患者心功能相关。本研究还发现，急性前壁STEMI伴发心力衰竭患者血清Hsa-circ-RNA0001380水平高于无心力衰竭患者。而且，Hsacirc-RNA0001380水平与LVEDV呈正相关，与LVEF呈负相关。外周血Hsa-circRNA0001380可能成为急性前壁STEMI并发左心室收缩功能障碍的潜在生物标志物。为了进一步评估循环Hsa-circRNA0001380对急性前壁STEMI后心力衰竭的诊断价值，本研究进一步绘制了ROC曲线，结果表明，Hsa-circ-RNA0001380的AUC为0.953，灵敏度为96.8%，特异度为90.0%，较传统的心功能指标NT-proBNP有更好的诊断价值。

外周血Hsa-circRNA0001380在急性前壁STEMI中的具体作用机制尚不明确，其可能的调控效应如下：Hsa-circRNA0001380可与Hsa-miR-622、Hsa-miR-136-5p等微RNA结合，调控下游基因表达，参与细胞内生物学过程^[23]。此外，Hsa-circRNA0001380具有m6A修饰位点，参与调节RNA稳定性、定位及转录效率等RNA生命过程，并与其他分子相互作用，调控细胞内分布及下游基因表达，进而影响心血管系统生理学及病理学过程^[24]。目前关于Hsa-circ-RNA0001380参与AMI后心力衰竭发生发展的分子机制罕有报道，有待于深入探究。本研究中，急性前壁STEMI患者外周血中Hsa-circRNA0001380表达水平增加，且与心肌梗死后心功能参数存在相关性，ROC曲线证实其对急性前壁STEMI后心力衰竭具有预测价值，因此，推测Hsa-circRNA0001380可能成为AMI后心力衰竭潜在的新的治疗靶点。

综上所述，本研究首次发现外周血Hsa-circRNA0001380可作为急性前壁STEMI患者接受急诊PCI术后发生心力衰竭的潜在的诊断标志物，但其能否成为急性STEMI可能的治疗靶点仍有待深入研究。关于Hsa-circRNA0001380的生物学功能、具体作用机制与临床应用前景，亟待开展大规模多中心随机对照研究。