2023, Vol. 52文章信息
- 于鹏杰, 才保加, 朱生茂, 蒲永强
- YU Pengjie, CAI Baojia, ZHU Shengmao, PU Yongqiang
- LINC00662通过调控miR-199a-5p/MAP3K1通路对胃癌侵袭、转移的影响
- Influence of LINC00662 on the invasion and metastasis of gastric cancer via miR-199a-5p/MAP3K1 pathway regulation
- 中国医科大学学报, 2023, 52(10): 890-897
- Journal of China Medical University, 2023, 52(10): 890-897
-
文章历史
- 收稿日期：2022-09-01
- 网络出版时间：2023-10-17 08:32:48
引用本文 |
胃癌在全球最常见的癌症中排名第5位，每年可致数十万人死亡[1]。随着消化道内镜技术的发展，胃癌患者的生存率得到显著提高[2]。然而，化疗和（或）放疗对转移性胃癌的治疗效果并不理想，胃癌转移是导致患者高死亡率的主要原因[3]。因此，探究胃癌转移的潜在机制具有重要的临床意义。越来越多的证据表明长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）在肿瘤发生发展中起着至关重要的调控作用。LINC00662是一种lncRNA，已有研究[4]表明LINC00662在结肠癌细胞中高表达，并促进细胞的增殖与转移。miR-199a-5p在宫颈癌细胞中低表达，过表达miR-199a-5p可抑制宫颈癌细胞增殖、迁移与侵袭[5]。丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶1（mitogen-activated protein kinase kinase kinase 1，MAP3K1）作为MAP3K家族成员之一，其表达下调可抑制食管癌细胞增殖和侵袭[6]。生物信息学分析显示，LINC00662与miR-199a-5p存在结合位点，miR-199a-5p与MAP3K1存在结合位点，但LINC00662能否通过调控miR-199a-5p/MAP3K1来影响胃癌侵袭与转移尚不明确。因此，本研究探讨LINC00662对胃癌细胞侵袭、转移的影响，以及其对miR-199a-5p、MAP3K1的调控机制，旨在为明确胃癌转移的分子机制提供新的理论依据。
1 材料与方法 1.1 临床样本收集及细胞来源收集2018年6月至2020年6月期间我院确诊的105例胃癌患者癌组织以及对应的癌旁组织（距离癌组织3 cm），将所有收集的样本于液氮中冷冻后-80 ℃保存。本研究获得医院伦理委员会批准，所有患者均签署知情同意书。人胃癌SGC-7901细胞购自中国科学院上海细胞库。
1.2 主要试剂与仪器miR-199a-5p模拟物（miR-199a-5p）及其阴性对照（miR-NC）、miR-199a-5p抑制物（anti-miR-199a-5p）及其阴性对照（anti-miR-NC）、LINC00662 siRNA（si-LINC00662）及其阴性对照（si-NC）均购自广州基迪奥生物科技公司；LipofectamineTM2000转染试剂盒购自上海慧颖生物科技有限公司；pcDNA3.1载体购自美国ThermoFisher公司；胎牛血清（FBS）、RPMI 1640培养基均购自美国Gibco公司；反转录及荧光定量试剂盒购自北京百奥莱博科技有限公司；Trizol试剂、BCA试剂盒、ECL化学发光试剂盒购自美国Invitrogen公司；MAP3K1、基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMP）-2、MMP-9、神经型钙黏蛋白（neural cadherin，N-cadherin）、GAPDH兔多克隆抗体（anti-MAP3K1、anti-MMP-2、anti-MMP-9、anti-N-cadherin、anti-GAPDH）、辣根过氧化物酶（HRP）标记的羊抗兔二抗均购自武汉艾美捷科技有限公司；荧光定量PCR仪购自美国应用生物系统公司。
1.3 细胞培养及分组将胃癌细胞SGC-7901置于含有10% FBS的RPMI 1640培养基中，在37 ℃，5% CO2培养箱中培养。每隔1 d换1次培养液，进行常规传代培养。取对数生长期的SGC-7901细胞，利用LipofectamineTM2000转染试剂盒分别将si-NC、si-LINC00662、si-LINC00662与anti-miR-NC、si-LINC00662与anti-miR-199a-5p、si-LINC00662与miR-NC、si-LINC00662与miR-199a-5p、miR-NC、miR-199a-5p、pcDNA3.1、pcDNA3.1-LINC00662、anti-miR-NC、anti-miR-199a-5p转染于SGC-7901细胞，并分别设定为si-NC组、si-LINC00662组、si-LINC00662+anti-miR-NC组、si-LINC00662+anti-miR-199a-5p组、si-LINC00662+miR-NC组、si-LINC00662+miR-199a-5p组、miR-NC组、miR-199a-5p组、空载体组、LINC00662过表达组、anti-miR-NC组、anti-miR-199a-5p组，另取未转染的SGC-7901细胞设定为空白组，细胞转染48 h后用于后续实验。
1.4 实时定量PCR检测SGC-7901细胞中LINC00662、miR-199a-5p、MAP3K1 mRNA的表达使用Trizol试剂从胃癌组织和癌旁组织中提取总RNA。RNA的浓度和纯度用紫外分光光度计测定。使用反转录试剂盒将RNA逆转录成cDNA，并根据荧光定量试剂盒的操作说明书进行PCR扩增反应，U6和GAPDH分别作为miR-199a-5p、LINC00662与MAP3K1内参，以2-ΔΔCt法计算基因的相对表达量。所用引物包括：miR-199a-5p，正向5’-CCGGGATCCGCAAACTCAGCTTTAC-3’，反向5’-CGGAATTCGTGGCGACCGTGATACC-3’；U6，正向5’-GTACAAAATACGTGACGTAGAAAG-3，反向5’-GGTCDTTCGTCCTTTCCAC-3’；LINC00662，正向5’-AGGACAGAATCTCCGTGGAC-3’，反向5’-TTGATCTTTTAGATTTCTGTCACACTC-3’；MAP3K1，正向5’-AACAACCGTATAGAGAAGACA-3’，反向5’-TGAGCCTGATAACAAGAAGA-3’；GADPH，正向5’-GGAGCGAGATCCCTCCAAAAT-3’，反向5’-GGCTGTTGTCATACTTCTCATGG-3’。
1.5 Transwell实验检测细胞侵袭与迁移 1.5.1 细胞侵袭将基质胶涂于Transwell小室中，待自然干燥后收集对数生长期的SGC-7901细胞用胰蛋白酶消化，用PBS洗涤并重悬于无血清RPMI 1640培养基中，并将细胞密度调整为1×105/mL。取200 μL细胞悬浮液接种在上室中，将500 μL含有10%FBS的RPMI 1640培养基加入到下室中，然后将细胞在含有5% CO2的培养箱中37 ℃培养48 h。侵入下室的细胞用95%乙醇固定10 min，0.1%结晶紫染色10 min，PBS去除未染色的细胞。倒置显微镜下观察，随机选取5个视野的细胞进行计数。
1.5.2 细胞迁移Transwell小室中不涂基质胶。收集对数生长期的SGC-7901细胞用胰蛋白酶消化，用PBS洗涤并重悬于无血清RPMI 1640培养基中，并将细胞密度调整为1×105/mL。其他步骤同1.5.1。
1.6 划痕实验检测细胞迁移将各组细胞接种到6孔板中并在培养箱中孵育，当其汇合度约达到100%时用无菌的200 μL枪头尖端垂直水平划线，然后利用PBS洗涤除去漂浮的细胞并在无血清培养基中孵育。使用倒置显微镜观察细胞在0、24 h时迁移情况并拍照。划痕愈合率（%）=（1~24 h的划痕面积/0 h的划痕面积）×100。
1.7 Western blotting检测细胞中MAP3K1、MMP-2、MMP-9、N-cadherin表达将各组细胞用PBS洗涤2次后，置于预冷的RIPA裂解缓冲液中裂解并提取总蛋白。在10%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺（SDS/PAGE）凝胶上分离蛋白质，电印迹到聚偏二氟乙烯膜上，将膜用5%脱脂牛奶封闭1 h后加入一抗anti-MAP3K1、anti-MMP-2、anti-MMP-9、anti-N-cadherin、anti-GAPDH于4 ℃下孵育过夜，第2天用TBST洗涤3次后，加入HRP标记的羊抗兔二抗于室温下孵育2 h，使用ECL发光试剂盒检测蛋白质的显色情况，利用Image-J软件分析蛋白质的灰度值。
1.8 双荧光素酶报告基因实验使用Starbase网站（http://starbase.sysu.edu.cn/）预测LINC00662与miR-199a-5p、miR-199a-5p与MAP3K1的结合位点。分别构建LINC00662、MAP3K1 3’-UTR区的野生型（WT）和突变型（MUT）质粒，记为WT-LINC00662、MUT-LINC00662、WT-MAP3K1、MUT-MAP3K1，利用LipofectamineTM2000转染试剂盒分别将WT-LINC00662、MUT-LINC00662、WT-MAP3K1、MUT-MAP3K1与miR-NC、miR-199a-5p共转染于SGC-7901细胞，转染后24 h收获细胞，使用双荧光素酶报告基因检测系统检测双荧光素酶活性。
1.9 统计学分析使用SPSS 21.0软件进行统计分析，计量资料采用x±s表示。2组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两组间比较采用snk-q检验，P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果 2.1 LINC00662、miR-199a-5p、MAP3K1在胃癌组织中的表达与癌旁组织比较，胃癌组织中LINC00662、MAP3K1 mRNA表达水平显著升高，miR-199a-5p表达水平显著降低（均P < 0.001），见表 1。
| Group | LINC00662 | miR-199a-5p | MAP3K1 mRNA |
| Paracancerous tissue | 1.02±0.11 | 1.01±0.12 | 1.04±0.13 |
| Gastric cancer tissue | 2.23±0.35 | 0.27±0.03 | 1.89±0.26 |
| t | 33.795 | 61.303 | 29.963 |
| P | < 0.001 | < 0.001 | < 0.001 |
2.2 LINC00662抑制对胃癌SGC-7901细胞侵袭、迁移的影响
结果显示，与空白组（1.03±0.12）和si-NC组（1.05± 0.14）比较，si-LINC00662组（0.35±0.06）SGC-7901细胞中LINC00662表达水平显著降低（均P < 0.05）。与空白组和si-NC组比较，si-LINC00662组SGC-7901细胞侵袭、迁移细胞数目显著减少，划痕愈合率显著降低，MMP-2、MMP-9、N-cadherin、MAP3K1蛋白表达显著降低（P < 0.05），见图 1。
|
| A, the effect of si-LINC00662 on the invasion and migration of SGC-7901 cells (crystal violet stain × 200);B, the effect of si-LINC00662 on the scratch healing of SGC-7901 cells; C, the protein expression of MMP-2, MMP-9, N-cadherin, and MAP3K1. *P < 0.05 compared with the blank group; #P < 0.05 compared with the si-NC group. 图 1 LINC00662抑制对胃癌SGC-7901细胞侵袭、迁移的影响 Fig.1 Effect of LINC00662 inhibition on the invasion and migration of gastric cancer SGC-7901 cells |
2.3 各转染组SGC-7901细胞中miR-199a-5p表达比较
结果显示，空白组、si-NC组、si-LINC00662组、si-LINC00662+anti-miR-NC组、si-LINC00662+anti-miR-199a-5p组、si-LINC00662+miR-NC组、si-LINC00662+ miR-199a-5p组miR-199a-5p表达分别为1.02±0.14、1.03±0.15、2.21±0.24、1.03±0.13、0.39±0.05、1.06± 0.12、2.89±0.32。与空白组和si-NC组比较，si-LINC00662组SGC-7901细胞中miR-199a-5p表达显著升高（P < 0.05）；与si-LINC00662组和si-LINC00662+anti-miR-NC组比较，si-LINC00662+anti-miR-199a-5p组SGC-7901细胞中miR-199a-5p表达显著降低（P < 0.05）；与si-LINC 00662组和si-LINC00662+miR-NC组比较，si-LINC00662+ miR-199a-5p组SGC-7901细胞中miR-199a-5p表达显著升高（均P < 0.05）。
2.4 抑制miR-199a-5p可减弱LINC00662抑制对胃癌SGC-7901细胞侵袭、迁移的影响（图 2）
|
| A, cell invasion and migration in each group (crystal violet staining × 200);B, the wound healing of each group of cells; C, the protein expression of MMP-2, MMP-9, N-cadherin, and MAP3K1 in each group. *P < 0.05 compared with si-LINC00662 group; #P < 0.05 compared with si-LINC00662+anti-miR-NC group. 图 2 抑制miR-199a-5p可减弱LINC00662抑制对胃癌SGC-7901细胞侵袭、迁移的影响 Fig.2 Inhibition of miR-199a-5p could attenuate the effect of LINC00662 inhibition on the invasion and migration of gastric cancer SGC-7901 cells |
与si-LINC00662组和si-LINC00662+anti-miR-NC组比较，si-LINC00662+anti-miR -199a-5p组SGC-7901细胞中MAP3K1蛋白表达显著升高，侵袭、迁移细胞数目显著升高，划痕愈合率显著升高，MMP-2、MMP-9、N-cadherin蛋白表达显著升高（P < 0.05），见图 2。
2.5 上调miR-199a-5p表达可增强LINC00662抑制对胃癌SGC-7901细胞侵袭、迁移的影响与si-LINC00662组和si-LINC00662+miR-NC组比较，si-LINC00662+miR-199a-5p组SGC-7901细胞中MAP3K1蛋白表达显著降低，侵袭、迁移细胞数目显著降低，划痕愈合率显著降低，MMP-2、MMP-9、N-cadherin蛋白表达显著降低（P < 0.05），见图 3。
|
| A, cell invasion and migration in each group (crystal violet staining × 200);B, the wound healing of each group of cells; C, the protein expression of MMP-2, MMP-9, N-cadherin, and MAP3K1 in each group of cells. *P < 0.05 compared with si-LINC00662 group; #P < 0.05 compared with si-LINC00662+miR-NC group. 图 3 上调miR-199a-5p表达可增强LINC00662抑制对胃癌SGC-7901细胞侵袭、迁移的影响 Fig.3 Upregulation of miR-199a-5p expression could enhance the effect of LINC00662 inhibitory on the invasion and migration of gastric cancer SGC-7901 cells |
2.6 LINC00662与miR-199a-5p、miR-199a-5p与MAP3K1靶向关系的验证
结果显示，LINC00662与miR-199a-5p存在结合位点，miR-199a-5p与MAP3K1存在结合位点，见图 4。与miR-NC组比较，miR-199a-5p组WT-LINC00662胃癌SGC-7901细胞的荧光素酶相对活性降低（P < 0.05），而miR-199a-5p组MUT-LINC00662胃癌SGC-7901细胞的荧光素酶相对活性无统计学差异（P > 0.05），见表 2。与miR-NC组比较，miR-199a-5p组WT-MAP3K1胃癌SGC-7901细胞的荧光素酶相对活性降低（P < 0.05），而miR-199a-5p组MUT-MAP3K1胃癌SGC-7901细胞的荧光素酶相对活性无统计学差异（P > 0.05），见表 2。与空白组（1.01±0.11）和空载体组（1.04±0.12）比较，LINC00662过表达组（0.41±0.05）中miR-199a-5p表达水平显著降低（均P < 0.05）。与空白组和miR-NC组比较，miR-199a-5p组中MAP3K1蛋白表达水平显著降低（P < 0.05）；与空白组和anti-miR-NC组比较，anti-miR-199a-5p组中MAP3K1蛋白表达显著升高（P < 0.05），见图 5。
|
| A，LINC00662 to miR-199a-5p；B，miR-199a-5p to MAP3K1. 图 4 Starbase网站预测LINC00662与miR-199a-5p、miR-199a-5p与MAP3K1的结合位点 Fig.4 Binding sites of LINC00662 to miR-199a-5p and those of miR-199a-5p to MAP3K1 were predicted using Starbase website |
| Group | WT-LINC00662 | MUT-LINC00662 | WT-MAP3K1 | MUT-MAP3K1 |
| miR-NC group | 1.05±0.12 | 1.06±0.11 | 1.01±0.10 | 1.04±0.12 |
| miR-199a-5p group | 0.36±0.07 | 1.02±0.10 | 0.29±0.05 | 1.03±0.11 |
| t | 12.166 | 0.659 | 15.774 | 0.150 |
| P | < 0.001 | 0.525 | < 0.001 | 0.883 |
|
| 1，blank group；，2，miR-NC group；3，miR-199a-5p group；4，anti-miR-NC group；5，anti-miR-199a-5p group. *P < 0.05 compared with the blank group；#P < 0.05 compared with miR-NC group；∆ P < 0.05 compared with anti-miR NC group. 图 5 Western blotting检测各组细胞中MAP3K1蛋白表达 Fig.5 Expression of MAP3K1 protein in each group by Western blotting |
3 讨论
尽管目前胃癌的诊治已取得突破性进展，但胃癌患者的5年生存率依然很低[7]。由于胃癌的死亡率与胃癌的转移密切相关，因此，迫切需要寻找肿瘤转移新的生物标志物，以便靶向治疗来提高患者生存率。
研究[8]证实，lncRNA在调控多种癌细胞的增殖、凋亡和转移中发挥重要作用。相关研究表明，LINC00662在前列腺癌组织及细胞中呈相对高表达，敲低其表达可抑制前列腺癌细胞增殖、侵袭和迁移，并促进其凋亡[9]；LINC00662在肝癌组织中上调并与肝癌患者肿瘤大小、侵袭和较差的存活率相关[10]；LINC00662过表达通过激活ERK信号通路促进结肠癌增殖、侵袭和迁移[11]。本研究结果显示，LINC00662在胃癌组织中高表达，下调LINC00662表达可抑制胃癌SGC-7901细胞的侵袭与迁移，提示LINC00662在胃癌中发挥着促癌基因的作用。相关研究指出MMP-2和MMP-9是MMPs家族中与肿瘤转移关系最为密切的两个成员，其可以通过降解细胞外基质中的Ⅳ型胶原酶促进肿瘤转移[12]；N-cadherin是上皮间质转化的重要标志分子，其在肿瘤细胞中高表达可导致上皮间质转化，进而促进细胞迁移和侵袭[13]。本研究结果显示，下调LINC00662表达可抑制胃癌SGC-7901细胞中MMP-2、MMP-9、N-cadherin蛋白表达，提示沉默LINC00662可能通过下调MMP-2、MMP-9、N-cadherin表达抑制SGC-7901细胞的侵袭与迁移。
miR-199a-5p在多种肿瘤细胞中异常表达，参与调控肿瘤细胞的增殖代谢、侵袭转移等过程[14]。研究显示，过表达miR-199a-5p能够下调DDR1表达，抑制人脑胶质瘤细胞增殖和迁移[15]；miR-199a-5p在非小细胞肺癌组织中低表达，其表达上调可抑制非小细胞肺癌细胞的增殖[16]；miR-199a-5p在喉癌组织中的表达明显低于癌旁组织，过表达miR-199a-5p可显著抑制喉癌细胞的增殖、侵袭和迁移，同时诱导细胞凋亡[17]。本研究结果显示，miR-199a-5p在胃癌组织中低表达，抑制miR-199a-5p可减弱抑制LINC00662对胃癌SGC-7901细胞侵袭、迁移的影响，上调miR-199a-5p表达可增强抑制LINC00662对胃癌SGC-7901细胞侵袭、迁移的影响，提示抑制LINC00662可能通过上调miR-199a-5p的表达抑制SGC-7901细胞侵袭、迁移。MAP3K1是广泛存在于人体内的一种重要激酶，具有调控细胞迁移的作用[18]。有研究表明，过表达miR-196b通过下调MAP3K1来抑制人绒毛膜癌细胞的增殖、迁移和侵袭[19]；miR-451可以通过抑制MAP3K1来抑制食管癌细胞增殖[20]。本研究结果显示，MAP3K1 mRNA在胃癌组织中高表达，沉默LINC00662后胃癌SGC-7901细胞中miR-199a-5p表达上调，MAP3K1蛋白表达下调，提示抑制LINC00662可能通过调控miR-199a-5p/MAP3K1来抑制胃癌细胞的侵袭与迁移。同时本研究还证实了LINC00662可靶向负调控miR-199a-5p的表达，miR-199a-5p可靶向负调控MAP3K1的表达，提示抑制LINC00662可通过靶向上调miR-199a-5p的表达进而间接下调MAP3K1的表达来发挥对胃癌细胞侵袭与迁移的抑制作用。
综上所述，抑制LINC00662可通过调控miR-199a-5p/MAP3K1抑制胃癌细胞侵袭与迁移。本研究为胃癌的早期诊断及靶向治疗提供了参考依据。
| [1] |
SIEGEL RL, MILLER KD, JEMAL A. Cancer statistics, 2019[J]. CA A Cancer J Clin, 2019, 69(1): 7-34. DOI:10.3322/caac.21551 |
| [2] |
MILLER KD, NOGUEIRA L, MARIOTTO AB, et al. Cancer treatment and survivorship statistics, 2019[J]. CA A Cancer J Clin, 2019, 69(5): 363-385. DOI:10.3322/caac.21565 |
| [3] |
CHEN LT, OH DY, RYU MH, et al. Anti-angiogenic therapy in patients with advanced gastric and gastroesophageal junction cancer: a systematic review[J]. Cancer Res Treat, 2017, 49(4): 851-868. DOI:10.4143/crt.2016.176 |
| [4] |
WANG HM, YU MY, HU WX, et al. Linc00662 promotes tumorigenesis and progression by regulating miR-497-5p/AVL9 axis in colorectal cancer[J]. Front Genet, 2020, 10: 1385. DOI:10.3389/fgene.2019.01385 |
| [5] |
张明川, 张玲, 马一鸣, 等. MiR-199a-5p下调NF-κB信号通路激活水平抑制宫颈癌细胞恶性生物学行为[J]. 中国医药生物技术, 2019, 14(4): 329-334. DOI:10.3969/j.issn.1673-713X.2019.04.007 |
| [6] |
ZONG MZ, FENG WT, WAN L, et al. MiR-203 affects esophageal cancer cell proliferation, apoptosis and invasion by targeting MAP3K1[J]. Oncol Lett, 2020, 20(1): 751-757. DOI:10.3892/ol.2020.11610 |
| [7] |
MANKANEY G, MACARON C, BURKE CA. Refining risk factors for gastric cancer in patients with lynch syndrome to optimize surveillance esophagogastroduodenoscopy[J]. Clin Gastroenterol Hepatol, 2020, 18(4): 780-782. DOI:10.1016/j.cgh.2019.10.003 |
| [8] |
CHEN PX, FANG XL, XIA B, et al. Long noncoding RNA LINC00152 promotes cell proliferation through competitively binding endogenous miR-125b with MCL-1 by regulating mitochondrial apoptosis pathways in ovarian cancer[J]. Cancer Med, 2018, 7(9): 4530-4541. DOI:10.1002/cam4.1547 |
| [9] |
姚志峰, 潘志尧, 姚毅文, 等. 长链非编码RNA Linc00662促进前列腺癌细胞生长的研究[J]. 中华男科学杂志, 2020, 26(7): 588-594. DOI:10.13263/j.cnki.nja.2020.07.002 |
| [10] |
TIAN XH, WU YY, YANG YT, et al. Long noncoding RNA LINC00662 promotes M2 macrophage polarization and hepatocellular carcinoma progression via activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Mol Oncol, 2020, 14(2): 462-483. DOI:10.1002/1878-0261.12606 |
| [11] |
CHENG B, RONG AM, ZHOU QB, et al. LncRNA LINC00662 promotes colon cancer tumor growth and metastasis by competitively binding with miR-340-5p to regulate CLDN8/IL22 co-expression and activating ERK signaling pathway[J]. J Exp Clin Cancer Res, 2020, 39(1): 5. DOI:10.1186/s13046-019-1510-7 |
| [12] |
王刚, 杨涛, 彭克楠, 等. Twist对膀胱癌细胞迁移、侵袭及MMP-2、MMP-9表达的影响[J]. 中国老年学杂志, 2018, 38(10): 2439-2442. DOI:10.3969/j.issn.1005-9202.2018.10.055 |
| [13] |
薛栋, 舒孟良, 张建, 等. 肝细胞癌组织中TRIM59、Akt及N-cadherin表达及其临床意义[J]. 中国老年学杂志, 2020, 40(22): 4740-4743. DOI:10.3969/j.issn.1005-9202.2020.22.012 |
| [14] |
MA S, JIA W, NI S. MiR-199a-5p inhibits the progression of papillary thyroid carcinoma by targeting SNAI1[J]. Biochem Biophys Res Commun, 2018, 497(1): 181-186. DOI:10.1016/j.bbrc.2018.02.051 |
| [15] |
闫兆月, 高玉帅, 贾玉龙, 等. MiR-199a-5p调控DDR1抑制人脑胶质瘤细胞增殖和迁移[J]. 中国药理学通报, 2021, 37(5): 687-692. DOI:10.3969/j.issn.1001-1978.2021.05.017 |
| [16] |
LI YL, WANG DT, LI X, et al. MiR-199a-5p suppresses non-small cell lung cancer via targeting MAP3K11[J]. J Cancer, 2019, 10(11): 2472-2479. DOI:10.7150/jca.29426 |
| [17] |
LI DJ, WANG X, YIN WH, et al. MiR-199a-5p suppresses proliferation and invasion of human laryngeal cancer cells[J]. Eur Rev Med Pharmacol Sci, 2020, 24(23): 12200-12207. |
| [18] |
黄萍, 周露. 浅谈MAP3K1的特点及其与乳腺癌的关系[J]. 现代养生(下半月版), 2018(1): 63-64. DOI:10.3969/j.issn.1671-0223(x).2018.01.049 |
| [19] |
GUO Z, SUI L, QI J, et al. MiR-196b inhibits cell migration and invasion through targeting MAP3K1 in hydatidiform mole[J]. Biomed Pharmacother, 2019, 113(1): 108760. DOI:10.1016/j.biopha.2019.108760 |
| [20] |
ZANG WQ, YANG X, WANG T, et al. MiR-451 inhibits proliferation of esophageal carcinoma cell line EC9706 by targeting CDKN2D and MAP3K1[J]. World J Gastroenterol, 2015, 21(19): 5867-5876. DOI:10.3748/wjg.v21.i19.5867 |