西洋参(American ginseng)又名西洋人参、花旗参，原产于美国、法国及加拿大等西方国家。中国于20世纪70年代开始人工引种，并获得成功。目前在许多省份均有种植。西洋参含有多种人参皂苷、维生素及微量元素等生理活性物质^[1]，味道较苦，对人体具有较多的有益功效，如抗疲劳，抗肿瘤和调节血脂、血压、血糖平衡等^[2]，因而广泛用作膳食添加剂^[3]。临床研究表明西洋参可明显改善患者因癌症带来的疲乏感^[4]。近年来，随着对西洋参的化学组成及药理作用研究越来越深入，应用也越来越广泛。但有关西洋参毒理学安全性评价方面研究较少。因此，本研究拟观察西洋参冻干粉对大鼠亚急性毒性作用，旨在为西洋参进一步开发利用提供技术支撑。结果报告如下。

西洋参冻干粉，为乳黄色粉末伴有疏松块状物，企业推荐日摄入量为1.8 g/60 kg，分3次食用，采用掺入法加入到全价颗粒饲料中。电子分析天平(感量0.000 1g，德国Sartorius公司)、电子天平(0.02 g，瑞士METTLER TOLEDO公司)，COULTER HMX血细胞分析仪(使用原厂质控液和试剂)、COULTER CX5全自动生化分析仪(使用原厂定标液、质控液和试剂)(美国BECK MAN公司)、全封闭自动脱水机、石蜡包埋中心、自动染色机、切片机(英国SHANDON Finesses公司)、动物组织病理影像处理系统、DFC300 FX生物显微镜(德国LECIA公司)。

SPF(specific pathogen free)级SD大鼠80只(辽宁长生生物技术有限公司)，实验动物生产许可证号：SCXK(辽)2015-0001，体重为(72.15±5.00) g，其中雄性大鼠体重范围为59.64~89.46 g，雌性大鼠体重范围为55.80~83.70 g。采用无菌块状鼠料及屏障系统动物实验室，单笼饲养，温度(22±1.5)℃，湿度(50±10)%，工作照度200~280 lx，人工照明12 h，黑夜12 h，噪音 < 60 dB。试验前适应性观察3 d。

将大鼠随机分为高、中、低西洋参组和对照组，每组20只，雌雄各半。按企业推荐日摄入量的100、50、25倍设计高、中、低西洋参3个剂量，分别为3.00、1.50、0.75 g/kg，采用饲料逐级放大混匀法掺入样品，分别取样品600、300、150 g，均匀掺入基础饲料至20 kg，样品掺入量分别为3.00%、1.50%、0.75%。西洋参组分别给予含不同剂量西洋参颗粒饲料，对照组给予基础颗粒饲料，连续喂养30 d^[5]。

每天观察并记录大鼠一般表现，如饮食状况、精神状态、行为活动及中毒表现和死亡情况；每周每只大鼠给予饲料220 g，每周第3 d称量饲料剩余量，第7 d称体重、饲料剩余量，弃去剩余饲料，添加新饲料220 g，计算每周摄食量、体重增重及总食物利用率。

在观察期结束时，禁食16 h，自由饮水，摘眼球采血，采用血细胞分析仪进行血液学检测，指标包括红细胞计数、血红蛋白、白细胞计数、中性粒细胞(%)、淋巴细胞(%)、单核细胞(%)、嗜酸性粒细胞(%)、嗜碱性粒细胞(%)。采用全自动生化仪进行血清生化学检测，指标包括谷丙转氨酶(alanine transaminase)、谷草转氨酶(aspartate transaminase)、尿素氮、肌酐、血糖、白蛋白、总蛋白、总胆固醇、甘油三酯。

断头处死大鼠，观察主要脏器的大体病理改变；取肝、脾、肾、睾丸(雄性)称重，计算脏器体重比；对照组及高剂量西洋参组大鼠主要脏器及时用10%中性福尔马林溶液固定24 h，进行常规病理组织学制片及染色，固定后的组织用流水冲洗0.5 h，以酒精为脱水剂，采用梯度脱水法，对组织进行脱水透明，用石蜡浸润包埋，用切片机切片，厚度5 μm；在45 ℃温水中展片，进行苏木素伊红染色、封固^[6]。用生物显微镜进行组织学病理学观察。

数据采用x±s表示，采用SPSS 11.0软件进行统计分析，组间比较采用单因素方差分析，以P < 0.05为差异有统计学意义。

表 1

表 1 西洋参对大鼠摄食量、体重增重、食物利用率影响(x±s, n=10) 组别(g/kg) 总摄食量(g) 总增重(g) 总食物利用率(%) 雄性 西洋参组 3.00 647.40±63.25 247.50±28.91 38.22±2.44 1.50 656.10±44.01 253.90±22.92 38.67±1.83 0.75 637.00±61.36 246.10±30.16 38.57±1.66 对照组 684.60±46.06 270.00±27.27 39.47±3.46 雌性 西洋参组 3.00 508.50±30.48 137.30±14.97 27.00±2.42 1.50 505.40±36.14 135.50±8.70 26.85±1.32 0.75 491.60±63.95 132.50±19.93 27.03±2.82 对照组 528.90±36.63 133.10±16.64 25.15±2.47

表 1 西洋参对大鼠摄食量、体重增重、食物利用率影响(x±s, n=10)

观察期间，各组大鼠均未见明显异常症状和体征，无死亡；动物生长发育良好，饮食饮水均未见明显异常。与对照组比较，各剂量西洋参组大鼠摄食量、体重增重和食物利用率无明显差异(P > 0.05)。提示，西洋参冻干粉对雌、雄性大鼠生长发育无明显影响。

表 2

表 2 西洋参对大鼠主要脏器/体重比值影响(x±s，n=10) 组别(g/kg) 肝/体(%) 肾/体(%) 脾/体(%) 睾丸/体(%) 雄性 西洋参组 3.00 3.35±0.28 0.86±0.09 0.27±0.03 1.05±0.09 1.50 3.39±0.23 0.83±0.05 0.26±0.03 1.06±0.07 0.75 3.24±0.17 0.88±0.09 0.26±0.03 0.98±0.09 对照组 3.34±0.21 0.84±0.06 0.27±0.05 0.98±0.09 雌性 西洋参组 3.00 3.51±0.17 0.89±0.04 0.25±0.05 1.50 3.50±0.23 0.88±0.05 0.25±0.03 0.75 3.44±0.22 0.90±0.04 0.24±0.04 对照组 3.40±0.21 0.88±0.06 0.26±0.05

表 2 西洋参对大鼠主要脏器/体重比值影响(x±s，n=10)

与对照组比较，各剂量西洋参组大鼠肝、肾、脾、睾丸(雄性)等主要脏器重量无明显差异(P > 0.05)；与对照组比较，各剂量西洋参组大鼠主要脏器的脏体比值无明显差异(P > 0.05)。

表 3

表 3 西洋参对大鼠血常规指标影响(x±s，n=10) 组别(g/kg) 红细胞数(×1012) 血红蛋白(g/L) 白细胞数(×109) 中性粒细胞(%) 淋巴细胞(%) 单核细胞(%) 嗜酸性粒细胞(%) 嗜碱性粒细胞(%) 雄性 西洋参组 3.00 6.24±0.49 144.80±4.16 11.53±2.64 12.99±2.93 85.64±3.08 0.56±0.36 0.55±0.32 0.26±0.41 1.50 6.17±0.39 141.60±7.11 11.91±3.00 15.62±3.34 82.73±3.55 0.46±0.43 0.81±0.22 0.38±0.54 0.75 6.16±0.38 142.80±5.90 12.09±2.69 13.87±2.09 84.76±2.45 0.38±0.32 0.63±0.49 0.36±0.77 对照组 6.48±0.36 146.10±5.04 10.08±3.18 14.38±2.37 84.12±2.54 0.43±0.50 0.69±0.34 0.38±0.44 雌性 西洋参组 3.00 6.18±0.77 140.00±8.54 8.66±2.87 12.97±2.54 85.71±2.81 0.33±0.29 0.78±0.45 0.21±0.49 1.50 5.99±0.68 139.90±6.31 8.40±2.07 13.81±4.06 84.84±4.11 0.36±0.49 0.82±0.50 0.17±0.37 0.75 6.17±0.50 140.70±7.36 8.44±2.40 11.86±2.79 86.89±3.17 0.32±0.35 0.74±0.52 0.19±0.34 对照组 6.26±0.53 141.60±4.77 9.64±2.18 14.41±4.07 84.18±3.87 0.49±0.31 0.62±0.36 0.30±0.43

表 3 西洋参对大鼠血常规指标影响(x±s，n=10)

对照组、各剂量西洋参组大鼠红细胞计数、血红蛋白含量、白细胞计数及中性粒细胞、淋巴、单核细胞、嗜酸、嗜碱性粒细胞百分比均在正常值范围内；与对照组比较，各剂量西洋参组大鼠血常规指标无明显差异(P > 0.05)。提示，西洋参对大鼠血常规指标无明显影响。

表 4

表 4 西洋参对大鼠血生化指标影响(x±s，n=10) 剂量(g/kg) AST (IU/L) ALT (IU/L) 总蛋白 (g/L) 白蛋白 (g/L) 甘油三酯 (mmol/L) 总胆固醇 (mmol/L) 尿素氮 (mmol/L) 肌酐 (μmol/L) 血糖 (mmol/L) 雄性 西洋参组 3.00 156.60±23.45 36.30±4.95 64.70±3，27 33.40±1.65 0.67±0.17 1.60±0.26 6.56±1.58 50.70±8.06 4.79±0.51 1.50 155.40±17.02 35.40±5.25 64.40±2.63 33.30±1.25 0.57±0.14 1.66±0.19 6.64±1.44 52.20±9.05 4.74±0.50 0.75 157.70±17.65 34.20±4.64 64.50±2.64 33.20±1.23 0.65±0.18 1.57±0.28 6.60±1.66 51.50±6.38 4.67±0.52 对照组 156.30±18.83 34.70±4.72 64.30±2.91 33.10±1.52 0.58±0.20 1.62±0.21 6.42±1.64 51.80±4.59 4.99±0.75 雌性 西洋参组 3.00 159.70±15.09 37.80±4.71 64.50±2.92 33.10±1.52 0.53±0.13 1.63±0.28 6.11±1.60 51.80±5.81 4.82±0.40 1.50 156.30±15.81 35.30±4.24 64.30±2.36 33.30±1.64 0.59±0.19 1.56±0.25 6.38±1.46 51.60±7.75 4.88±0.42 0.75 156.30±15.44 35.90±4.33 64.40±2.50 33.20±1.48 0.55±0.18 1.58±0.25 6.56±1.34 53.60±5.60 4.95±0.50 对照组 160.10±21.36 36.10±7.19 64.40±2.01 33.20±1.32 0.55±0.22 1.68±0.23 6.76±1.32 52.60±6.20 5.04±0.58

表 4 西洋参对大鼠血生化指标影响(x±s，n=10)

对照组、各剂量西洋参组大鼠ALT、AST、尿素氮、肌酐、血糖、白蛋白、总蛋白、总胆固醇、甘油三酯水平均在正常值范围内；与对照组比较，各剂量西洋参组大鼠血生化指标无明显差异(P > 0.05)。提示，西洋参对大鼠血生化指标无明显影响。

肉眼检查显示，对照组及各剂量西洋参组大鼠肝、脾、肾、卵巢(雌性)、睾丸(雄性)、胃、肠、心、肺、脑等主要脏器，组织结构完整，未见异常病理改变。显微镜观察结果显示，对照组、高剂量西洋参组大鼠各主要脏器组织结构未见病理学改变。提示，西洋参对大鼠各脏器无明显毒性。

西洋参是多年生草本植物，茎叶一年一收，其根一般生长3~4年才能采收^[7]，具有广泛的生物学活性。研究表明西洋参含人参皂苷5%~11%，单体皂苷19种，西洋参叶二醇皂苷能通过调节体内血脂代谢，提高血浆血栓素A2(thromboxane, TXA2) 与前列环素(prostacyclin, PGI2) 比值及纠正自由基代谢紊乱，发挥抗动脉粥样硬化作用^[8]。西洋参还具有镇静及神经保护、削弱肌酸激酶活性，并可减少骨骼肌细胞损伤，提高机体免疫力作用^[9]。研究表明，脾虚证的发生与性激素水平紊乱有关，经西洋参汤治疗后，脾虚症状有所改善，激素恢复至正常水平^[2]；西洋参皂苷可激活体内巨噬细胞，增强巨噬细胞吞噬异物能力，并可产生具有生物活性的物质，进而增强机体的免疫功能^[1]。西洋参经高温炮制后皂苷结构及组成可能发生改变，如人参皂苷Rg3含量增多，可抑制多种癌细胞的增值。服用高温炮制西洋参提取物，可明显提高西洋参的抗癌功效^[10]。国外研究证实，西洋参具有抑制乳腺癌细胞生长功能^[11]。

亚急性毒性试验是保健食品毒理学安全性评价的主要内容之一。一般通过连续反复给药，观察实验动物出现的毒性反应，血液学、生化学及病理学改变，分析剂量-反应关系，毒性反应的可逆性及体内是否有蓄积毒性等^[12]。本研究结果表明3.00、1.50、0.75 g/kg西洋参冻干粉连续喂养30 d对SD大鼠的摄食量、体重增重、食物利用率等生长发育状况无明显影响，对大鼠血液学、血清生化学及病理组织学等指标均无明显影响。提示，在此剂量下外推到人，食用西洋参冻干粉是安全的。