急性呼吸道感染严重危害人类健康，发病率占急性传染病之首^[1]。急性呼吸道感染主要由呼吸道病毒引起^[2]，包括7个病毒科的10多类的239个型别^[3-4]。呼吸道病毒以呼吸道传播为主要途径，由于病毒容易发生变异，极有可能导致暴发流行^[5]。其病原谱常因地区、时间、甚至患者的年龄不同而发生变化，及时、准确病原学检测及分析，对疾病预防策略以及临床诊断和治疗具有重要意义。本研究于2012—2014年在辽宁省内8个地市设立10家哨点医院采集670份发热伴呼吸道标本，分析其流行特征和病原谱构成。现将结果报告如下。

2012—2014年在辽宁省的8个市共10家哨点医院按要求采集符合病例定义的咽拭标本共670份并收集一般流行病学资料。发热伴呼吸道症候群病例定义如下：具备急性感染表现，如发热、white blood cell(WBC)升高或降低等；临床表现，如咽部不适、鼻塞、咳嗽等、听诊呼吸音异常、咳痰、胸闷、气短等症状之一；肺炎病例胸部X线片提示肺部炎性改变。

EZ1 Virus Mini Kit V2.0核酸提取试剂盒(德国Qiagen公司, cat.No.955134)，逆转录酶Promega^® Reverse Transcription System(美国Promega公司，cat.No.A3500)；多重PCR试剂盒Seeplex^® RV12 ACE Detection(美国seegene公司，cat.No.RV6C00Y); 琼脂糖(美国SIGMA公司，LOT:WXBB1741V); EZ1 Advanced XL全自动核酸提取仪、梯度PCR仪、凝胶成像仪(美国QIAGEN公司)。

采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR)法进行核酸检测，咽拭标本经前处理后，吸取200 μL提取核酸。核酸提取后立即使用或于-70℃冻存。采用RT-PCR及多重PCR进行核酸检测。结果采用2%琼脂糖凝胶电泳方法进行检测。

数据使用SPS S 13.0软件进行分析。采用χ²检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

表 1

表 1 病例性别、年龄分布

表 1 病例性别、年龄分布

图 1

图 1 病例发病时间分布

2012年1月—2014年12月，从辽宁省内10家哨点医院共收集发热伴呼吸道病例670例。男性383例，女性287例，男女比例约为1.3: 1。病例年龄分布0~4岁组病例最多，为197例，占全部病例数的29.40%，其次为5~9岁组，为12.54%。发病时间主要集中在10月—翌年3月份，由病例发病时间分布可以看出呼吸道病毒全年均有发病及检出，病例主要集中在冬春季节。

表 2

表 2 2012—2014年发热伴呼吸道检出病原构成比

表 2 2012—2014年发热伴呼吸道检出病原构成比

2012年1月—2014年12月，共检测发热伴呼吸道症候群标本670份，其中检测阳性标本132份，阳性率为19.70%。共检出7种病毒，包括流感病毒(influenza virus，Flu)、副流感病毒(parainfluenza virus，PIV)、腺病毒(adenovirus，Adv)、呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus，RSV)、人类冠状病毒(human coronavirus，HCov)、人鼻病毒(human rhinovirus，HRV)和偏肺病毒(human metapneumovirus，hMPV)。其中Flu检出率最高，占全部检出病毒的39.26%, 其后依次为RSV 15.56%、Adv 14.81%、HRV 14.81%、PIV 9.63%、HCov 5.19%、hMPV 0.74%。其中，双重感染3例，包括FluA+RSV A型1例、HCov 229 E型+HRV1例、Adv+HRV 1例。

表 3

表 3 各病原体分年龄检出情况

表 3 各病原体分年龄检出情况

采集阳性病例中，男性88例，女性44例。7种呼吸道病毒核酸检测，男性检出率为22.98%(88/383)，女性检出率为15.33%(44/287)，差异有统计学意义(χ²=6.062, P=0.014)。患者年龄0~93岁，平均年龄30.0岁。0~4岁组患者的阳性检出率为28.42%(56/197), 5~9岁组检出率为16.67%(14/84), 10~59岁组为17.13%(43/251), ≥60岁患者为13.77%(19/138)。组间差异有统计学意义(χ²=15.514, P=0.001)。在混合感染病例中，有2例是幼儿，1例是成人。在各个年龄组中流感的检出率均相对较高，hMPV只在婴幼儿组检出。其他病毒在各年龄段均有检出。

呼吸道系统是病原体侵入机体的重要途径之一，经其传播的传染病常具有发病率高、传播快、流行广、病原体易变异以及不同病原所致的临床症状相似等特点^[6-7]，因此，呼吸道病原体的检测对疾病的诊治以及了解常见病原体的变迁都具有重要作用，有助于掌握病原体的变化规律，并为呼吸道疾病的防治奠定基础。此外，随着抗生素的普遍应用，细菌感染所致的呼吸道疾病越来越少，病毒感染所占比例不断攀升。目前，90%以上的急性呼吸道感染均是病毒感染所致^[8]。因此，加强呼吸道症候群病原学检测，在防治抗生素滥用方面也具有重要意义^[9]。

为了解辽宁省呼吸道病毒的流行特征以及发热伴呼吸道症候群的病原谱特点，本研究共采集了辽宁省8个市的10家哨点医院符合发热伴呼吸道症候群病例定义的标本670份，其中性别差异经χ²分析具有统计学意义，男性检出率高于女性。0~4岁组病例最多，占总病例数的28.42%，检出率也与其他年龄组有明显差异。分析可能由于成年人由于自身抵抗力强及抗生素的大量使用等原因，出现轻微的呼吸道感染症状后多采取自行买药的方式进行治疗，因而采集的病例主要来源于儿童。北方季节更替分明，冬季寒冷导致发病病例主要集中在10月至翌年3月。Flu检出率最高，占全部检出病毒的39.26%，这与Flu不仅在婴幼儿易感，也是成人呼吸道感染最常见的病原体有关^[10-11]。本次研究数据显示，呼吸道病原在不同月份的检出率不固定，冬夏均存在检出率较高的情况，但冬春季节的检出率仍然相对较高。冬春季节是北方的流感高发季节，因此，冬春季节Flu的构成比较高。其他病毒全年均有检出，但由于标本采集数量及随机性的限制，不同病原的流行季节和持续时间存有所不同。3例混合感染中，有2例是幼儿，1例是成人，且混合感染的种类均有所不同。成人病毒混合感染的发生与免疫力低下以及长期使用抗生素导致继发感染有关，但在儿童中则可能由于其免疫功能发育不完善及对某些病毒易感所致^[12-13]。在不同年龄组中，Flu的检出率最高。HRV、RSV、Adv、PIV和HCov在儿童和老人中检出率明显偏高，这与儿童与老人抵抗力偏低并且就诊比例大有关。hMPV此次仅在儿童中检出1例，可见该病毒导致的呼吸道感染在辽宁省较为少见。

由于呼吸道病毒种类多且变异性强，引起的临床症状相似，因此病例诊断很大程度上依赖于实验室诊断^[14]。病原学诊断不仅能够指导临床药物选择，避免抗生素滥用，同时能够了解呼吸道病毒的病原谱构成和流行特征，为制定防控策略提供依据。因此，应该进一步加强对呼吸道病毒的监测及新病原的研究，为应对新发突发传染病及制定呼吸道病毒防控策略奠定坚实的基础。