2. 哈尔滨工业大学食品科学与工程学院生物化工系
肥胖是一种常见的代谢症候群[1]。肥胖症主要表现为体内脂肪积聚过多和分布异常、体重增加。肥胖不但影响体态和活动,而且与高脂血症、高血压、动脉粥样硬化等疾病的发生发展密切相关[2]。随着人口饮食结构和生活方式变化,肥胖症的发病率呈快速上升趋势[3]。研究表明肥胖患病人数达9 000万,加上隐性肥胖共约1.5~2亿人,在经济发达城市儿童肥胖率已超过10%[4]。国内外已有文献报道从植物原料中分离得到的各种多糖具有降脂减肥作用[5-7]。黑木耳多糖具有许多重要生理功能,如降血糖、降血脂、抗肿瘤、抗氧化、减肥、提高机体免疫力等功能[8-11]。本研究以高脂膳食诱导小鼠营养性肥胖,通过观察小鼠体重、Lees指数、脂肪指数、血脂、瘦素及激素敏感性脂肪酶指标变化,旨在探讨黑木耳多糖对小鼠营养性肥胖的干预作用,结果报告如下。
1 材料与方法 1.1 实验动物昆明种雄性小鼠40只,由黑龙江中医药大学实验动物中心提供,许可证号:SCXK(黑)2013-004,体重(20±4)g。小鼠按清洁级动物饲养,自由进食,饮用洁净水,保持实验室环境卫生,温度18~20 ℃,相对湿度50%~60%,分笼喂养,适应性喂养1周后开始实验。
1.2 主要试剂与仪器碱提除蛋白黑木耳多糖,多糖含量367.13 mg/g(东北林业大学食品科学与工程学科提供);血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、总甘油三酯(total triglyceride,TG)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)、激素敏感性脂肪酶(hormone sensitive lipase,HSL)、瘦素酶联免疫检测试剂盒(南京建成生物工程研究所)。YP200lN电子天平(上海精天电子仪器厂);TDL-5台式离心机(上海科兴仪器有限公司);RT6000酶标仪(北京维欣仪奥科技发展有限公司)。
1.3 分组与处理小鼠适应性喂养1周后按体重随机分为对照组、高脂组、黑木耳多糖低、中、高剂量组(25、50、100 mg/kg),每组8只;对照组小鼠普通饲料喂养,其余小鼠均给予高脂饲料;黑木耳多糖组小鼠每天分别灌胃给予不同剂量碱提除蛋白黑木耳多糖,对照组和高脂组给予等量生理盐水,连续4周。
1.4 指标与方法 1.4.1 小鼠体重、Lees指数及脂肪系数测量灌胃结束后,各组小鼠禁食24 h,测量小鼠体重、小鼠鼻尖到肛门长度,Lees指数=体重1/3×1 000/体长。处死小鼠,解剖取肾周围脂肪和生殖器周围脂肪称重,脂肪系数=(脂肪重量/小鼠体重)×100%。
1.4.2 小鼠血脂指标检测小鼠禁食24 h,眼球取血,静置2 h后,3 000 r/min离心15 min,取血清按试剂盒说明书测定小鼠血清中TC、TG、HDL、LDL含量。
1.4.3 肝组织中瘦素和脂肪中HSL含量测定(1)瘦素含量测定:取适量肝组织,以重量:体积=1:9加预冷的生理盐水,研磨制成组织匀浆,以10 000 r/min离心l0 min,取上清液,按照试剂盒说明书操作。(2)HSL含量测定:取适量生殖器周围脂肪,以重量:体积=1:9加预冷生理盐水,研磨制成组织匀浆,以10 000 r/min离心10 min,取上清液,按照试剂盒说明书操作。
1.5 统计分析数据以x表示,采用SPSS 17.0软件进行统计分析,组间比较采用t检验,P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果 2.1 黑木耳多糖对肥胖小鼠Lees指数、脂肪系数影响(表 1)| 表 1 黑木耳多糖对小鼠体重、Lee’s指数、脂肪系数影响(x,n=8) |
与对照组比较,高脂组小鼠体重、Lees指数、脂肪系数明显升高,差异有统计学意义(P < 0.01);与高脂组比较,高剂量黑木耳多糖组小鼠体重、Lees指数、脂肪系数明显下降,差异有统计学意义(P < 0.01),中剂量黑木耳多糖组小鼠Lees指数、脂肪指数明显下降,差异有统计学意义(P < 0.01),低剂量黑木耳多糖组小鼠脂肪指数明显下降,差异有统计学意义(P < 0.05)。
2.2 黑木耳多糖对肥胖小鼠血脂影响(表 2)| 表 2 黑木耳多糖对小鼠血脂含量影响(mmol/L,x,n=8) |
与对照组比较,高脂组小鼠血清中TC、TG、LDL明显升高、HDL明显降低,差异有统计学意义(P < 0.01)。提示,高脂膳食诱导小鼠高脂血症成功。与高脂组比较,各剂量黑木耳多糖组小鼠血清中TC和LDL含量明显下降(P < 0.05),中、高剂量黑木耳多糖组小鼠血清中HDL含量升高,低、高剂量黑木耳多糖组小鼠血清中TG含量下降,差异有统计学意义(P < 0.05)。
2.3 黑木耳多糖对肥胖小鼠组织中瘦素与HSL含量影响(表 3)| 表 3 黑木耳多糖对小鼠瘦素和HSL含量影响(ng/mL,x,n=8) |
与对照组比较,高脂组小鼠肝脏中瘦素含量明显升高(P < 0.01);与高脂组比较,高剂量黑木耳多糖组小鼠肝脏中瘦素含量明显降低(P < 0.01)。与对照组比较,高脂组小鼠脂肪组织中HSL含量升高(P < 0.05);与高脂组比较,中剂量黑木耳组小鼠脂肪组织中HSL含量明显下降,差异有统计学意义(P < 0.01)。
3 讨论随着生活环境和膳食结构改变,肥胖已经成为全球关注的公共健康问题。肥胖可增加人群心脑血管疾病、糖尿病、脂肪肝、肿瘤、内分泌失调等发病率。控制体重或减少体内脂肪积累是预防此类代谢性疾病、实现主动健康的关键。瘦素是由肥胖基因编码的一种分泌蛋白[12],可调节能量代谢,其中对体重、饮食、脂肪代谢和葡萄糖代谢等具有较强的调节作用。激素敏感性脂肪酶(HSL)是脂肪分解的限速酶, 能水解甘油三酯(TG)、甘油二酯(PG)、甘油一酯、胆固醇酯和其他脂质及水溶性底物, 产生甘油和脂肪酸。本研究通过高脂饲料饲喂小鼠制备营养性肥胖模型,给予不同剂量的碱提除蛋白黑木耳多糖干预,结果显示,高脂组小鼠体重、Lees指数和脂肪系数明显升高,小鼠血清中TC、TG和LDL含量升高、HDL含量降低,小鼠肝脏内瘦素含量与脂肪组织中HSL含量升高;与高脂组比较,黑木耳多糖组小鼠体重、Lees指数和脂肪数下降,小鼠血清中TC、TG和LDL含量下降、HDL含量升高,小鼠肝脏内瘦素含量与脂肪组织中HSL含量下降。提示,碱提除蛋白黑木耳多糖对于营养性肥胖小鼠具有良好的干预作用, 其机制可能与黑木耳多糖降低小鼠体内瘦素与HSL含量,调节肥胖小鼠血脂代谢水平有关。
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2016, Vol. 32


