中国公共卫生  2015, Vol. 31 Issue (8): 1041-1043   PDF    
引用本文
张涛, 王秋英, 唐海涛, 刘春喜, 于利民, 柳春波, 刘加勇. 大豆异黄酮对老龄雌性大鼠血清性激素水平影响[J]. 中国公共卫生, 2015, 31(8): 1041-1043.
ZHANG Tao, WANG Qiu-ying, TANG Hai-tao, et al. Eeffect of soy isoflavones on serum sex hormones in aged female rats[J]. Chinese Journal of Public Health, 2015, 31(8): 1041-1043.
大豆异黄酮对老龄雌性大鼠血清性激素水平影响
张涛1, 王秋英2, 唐海涛3, 刘春喜1, 于利民1, 柳春波1, 刘加勇1    
1. 哈尔滨医科大学大庆校区预防医学教研室, 黑龙江 大庆 163319;
2. 大庆市中医院;
3. 大庆市油田总医院
数字出版日期：2014-12-4 14:46
基金项目：黑龙江省教育厅课题(12521238)
作者简介：张涛(1977-),男,黑龙江大庆人,讲师,博士,主要从事预防医学及大豆活性研究。
摘要：目的 观察大豆异黄酮对老龄雌性大鼠卵巢及血清中主要性激素水平影响。方法 选用20月龄老龄雌性大鼠50只, 按体重随机分为5组, 每组10只, 分别为空白对照组, 大豆异黄酮低、中、高剂量组(100、200、300 mg/kg)、雌激素组(己烯雌酚0.6 mg/kg), 连续给予8周。采用酶联免疫吸附实验测定各组大鼠卵巢及血清中雌二醇、孕酮、睾酮、黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)、性激素结合球蛋白(SHBG)水平。结果 与对照组比较, 高剂量大豆异黄酮组大鼠卵巢/体比(0.031±0.008)明显降低(P<0.05), 血清中雌二醇含量[(5.177±0.453)μg/L]明显升高, LH含量[(3.225±0.405)ng/L]、FSH含量[(1.536±0.186)IU/L]降低(P<0.05);与对照组比较, 大豆异黄酮组大鼠血清中孕酮、睾酮、SHBG水平无明显变化(P>0.05)。结论 大豆异黄酮可通过调节老龄雌性大鼠血清中雌二醇、LH、FSH水平缓解卵巢功能衰退。
关键词： 大豆异黄酮     老龄雌性大鼠     雌二醇     黄体生成素(LH)     促卵泡生成素(FSH)    
Eeffect of soy isoflavones on serum sex hormones in aged female rats
ZHANG Tao, WANG Qiu-ying, TANG Hai-tao, et al    
Department of Preventive Medicine, Daqing Campus of Harbin Medical University, Daqing, Heilongjiang Province 163319, China
Abstract: Objective To observe the effect of soy isoflavones on main serum sex hormones and ovaries in aged female rats.Methods Fifty 20-month-old female rats were randomly divided into five groups:control group(with oral gavage of normal saline),low-,moderate-,and high-dose group(with oral gavage of soy isoflavones of 100,200,and 300 mg·kg-1),estrogen group(with oral gavage of diethylstilbestrol of 0.6 mg·kg-1).After 8 weeks' of treatments,the levels of estradiol,progesterone,testosterone,luteinizing hormone(LH),follicle stimulating hormone(FSH),and sex hormone binding globulin(SHBG)in serum of the rats were detected with enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA).Results Compared with those of the control group,the ratio of ovary/body(0.031±0.008),serum LH(3.225±0.405 ng/L) and FSH(1.536±0.186 IU/L) decreased(P<0.05 for all),whereas the serum estradiol(5.177±0.453 μg/L) increased(P<0.05) for the rats of high-dose soy isoflavones group,but no significant differences in uterus/body ratio,serum progesterone,testosterone,and SHBG were observed(P>0.05)in the rats of soy isoflavones groups.Conclusion Soy isoflavone could regulate serum levels of main sex hormones and alleviate the decline of ovarian function in aged female rats.
Key words: soy isoflavone     aged female rat     estradiol     LH     FSH    

大豆异黄酮是存在于富含豆肽的多种天然植物中一种植物活性成分，其生理功能主要表现在抗氧化性、雌激素作用和抗雌激素作用等方面。近年来，流行病学研究表明，大豆异黄酮在预防癌症、骨质疏松症以及在改善妇女绝经期症状方面起着重要作用[1, 2, 3]。研究表明，大豆异黄酮能调节雌性青年大鼠卵巢中激素水平，并且对卵巢颗粒细胞中的一些蛋白和基因如bcl-2、bax等具有调节作用[4, 5, 6]。目前大豆异黄酮对老龄雌性大鼠血清中性激素水平的影响尚不清楚。本研究通过测定大鼠血清中雌二醇、孕酮、睾酮、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、促卵泡生成素(follicle stimulating hormone,FSH)、性激素结合球蛋白(sex hormone binding globulin,SHBG)水平，观察大豆异黄酮对老龄雌性大鼠血清中性激素水平影响，结果报告如下。 1 材料与方法 1.1 主要试剂与仪器

大豆异黄酮(陕西方晟生物科技有限公司)，纯度90%；己烯雌酚(合肥久联制药有限公司)，每片0.6 mg；雌二醇、孕酮、睾酮、LH、FSH、SHBG试剂盒(上海史瑞可科技有限公司)。SUNRISE 5082型酶标仪(奥地利Tecan公司)；DRP-9082型电热恒温培养箱(上海森信实验仪器有限公司)。 1.2 动物分组与处理

雌性Wistar大鼠50只，20月龄，体重300～360 g，由长春市亿斯实验动物技术有限责任公司提供，封闭群，SPF级，许可证号：SCXK(吉)2011-0004。按体重随机分为5组，每组10只，分别为对照组(生理盐水灌胃)，大豆异黄酮低、中、高剂量组(大豆异黄酮100、200、300 mg/kg灌胃)；雌激素组(己烯雌酚0.6 mg/kg灌胃)，连续8周。动物进食普通饲料，自由饮水。动物室温度(20±2)℃，相对湿度为(45±10)％，通风良好。 1.3 观察指标及检测方法

大鼠经乙醚麻醉，腹主动脉取血，处死后迅速摘除卵巢和子宫，分析天平称重并计算脏体比值，镜下观察卵巢组织结构改变[石蜡包埋切片，苏木素-伊红染色(hematoxylin-eosin staining，HE)]，采用酶联免疫吸附法测定大鼠血清中雌二醇、孕酮、睾酮、LH、FSH、SHBG的含量，具体操作按照试剂盒说明书进行。 1.4 统计分析

结果以x±s表示，采用SPSS 17.0软件对数据进行统计分析，多组均数比较采用方差齐性检验和单因素方差分析，以α=0.05为检验水准。 2 结 果 2.1 大豆异黄酮对各组大鼠子宫/体比及卵巢/体比影响(表 1)

表 1 大豆异黄酮对大鼠子宫/体比及卵巢/体比影响(x±s，n=10)

与对照组比较，雌激素组、高剂量大豆异黄酮组大鼠卵巢/体重比值明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)；大豆异黄酮虽然能使老龄雌性大鼠子宫重量呈增加趋势，但差异无统计学意义。 2.2 大豆异黄酮对各组大鼠卵巢组织影响(图 1)

图 1 大豆异黄酮对老龄雌性大鼠卵巢组织影响(HE，40×)

对照组大鼠卵巢内卵泡形态完整，分布均匀，卵泡壁由多层细胞组成，颗粒细胞形态完整，排列整齐(图 1A)；高剂量大豆异黄酮组大鼠卵巢内卵泡数量增加，卵泡内颗粒细胞呈多层，形态完整，卵泡膜细胞、间质细胞未见增生(图 1B)。 2.3 大豆异黄酮对各组大鼠血清性激素水平影响(表 2、3)

表 2 大豆异黄酮对大鼠血清雌二醇、孕酮、睾酮水平影响(x±s，n=10)

表 3 各组大鼠血清LH、FSH、SHBG测定结果(x±s，n=10)

与对照组比较，雌激素组、高剂量大豆异黄酮组大鼠血清雌二醇水平明显上升，差异有统计学意义(P<0.05)，孕酮与睾酮水平无明显变化；与对照组比较，雌激素组、高剂量大豆异黄酮组大鼠血清LH、FSH水平明显下降，差异有统计学意义(P<0.05)，SHBG水平无明显变化。 3 讨 论

卵巢退行性改变致雌激素水平下降是妇女更年期综合征发病的重要原因，其发病机制目前一致认为是因卵巢功能衰退导致雌二醇水平降低而引起下丘脑-垂体-卵巢轴或肾上腺轴等功能紊乱而致，通常采用对症治疗和激素替代疗法，但由于激素的副作用而受到一定局限[7, 8, 9]。大豆异黄酮分子结构与人体自身雌激素相似，进入人体后，可与雌激素受体结合，发挥雌激素样作用，从而改善妇女更年期症状，但其具体机制尚不清楚。

大豆异黄酮对雌性大鼠血液中性激素水平的影响目前尚无定论。不同研究者结论不同，主要与受试动物暴露时间、剂量等有关。本研究结果显示，高剂量大豆异黄酮作用于老龄雌性大鼠后，大鼠卵巢/体重比值降低，提示高剂量大豆异黄酮对老龄雌性大鼠的卵巢具有一定影响，与雌激素组结果相似。本研究结果还显示，与对照组比较，大豆异黄酮组大鼠血清雌二醇水平明显升高，同时LH、FSH水平明显下降。提示大豆异黄酮可能通过升高雌二醇水平、降低LH、FSH水平来改善老龄雌性大鼠内分泌状况，阻止下丘脑-垂体-性腺轴机能的减退。

参考文献
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[7] 陈名道,杨颖.绝经妇女激素替代治疗的困境与中医药治疗更年期综合征的前景[J].中西医结合学报,2003,1(1):9-11.
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