人参为中国传统补气类中药之一，因其成分复杂药用功效也很多。人参皂苷Rg1为人参三醇类皂苷，主要存在于人参和三七中，含量少活性高，具有抗炎抗氧化，抑制心肌肥厚等广泛的药理作用^[1,2]。研究发现人参皂苷Rg1具有抗肝纤维化作用^[3]，可以通过核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)通路抑制伴刀豆球蛋白-A引起的转氨酶升高，炎症因子分泌增加，降低淋巴细胞侵润^[4]，对过度运动引起的肝氧化应激损伤也具有一定的保护作用^[5]。而对糖尿病引起的肝损伤目前研究较少。2型糖尿病为胰岛素抵抗和胰岛β细胞损伤为特征的代谢性疾病，在糖尿病的慢性并发症中，肝脏为长期血糖过高累及的靶器官之一。因此，本研究采用高脂饮食和链脲佐菌素相结合的方法复制大鼠2型糖尿病模型，观察人参皂苷Rg1对糖尿病肝损伤的影响，结果报告如下。

SD大鼠50只,雌雄不限，体重200～220 g，由辽宁医学院实验动物中心提供，动物生产许可证号：SCKK(辽)2009-0004。

人参皂苷Rg1(宝鸡市辰光生物科技有限公司)，链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)(美国Sigma公司)；谷丙转氨酶(alanine transaminase，ALT)、谷草转氨酶(asparate aminotransferase，AST)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α，TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)试剂盒(南京建成生物工程研究所)。

模型建立：50只大鼠适应性喂养1周后，随机选择10只作为对照组，喂普通饲料(12%脂肪、60%碳水化合物和28%蛋白质)，另40只大鼠喂高脂高糖饲料(40%脂肪、42%碳水化合物和18%蛋白)，8周后禁食12 h，大鼠尾静脉注射30 mg/kg STZ生理盐水溶液，对照组注射同体积生理盐水。1周后禁食过夜(12 h)，尾静脉取血，空腹血糖≥7.8 mmol/L，随机血糖≥11.1 mmol/L即为2型糖尿病建模成功。40只造模成功大鼠随机分为模型组，人参皂苷Rg1(2、4、8 mg/kg)组，于成模后1周灌胃给予人参皂苷Rg1，连续8周，对照组和模型组给予等体积生理盐水。

1.4.1 血糖测定

灌胃结束后，大鼠尾静脉取血，用血糖仪测定大鼠空腹血糖。

灌胃结束后，大鼠麻醉，仰卧位固定，心脏穿刺取血，分离血清，按试剂盒说明操作测定血清AST、ALT含量。

取肝脏组织迅速固定于4%多聚甲醛溶液中，石蜡包埋；石蜡横断面连续切片5~6 片，厚度约5 μm，切片常规脱蜡脱水,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin，HE)染色，普通光学显微镜观察肝脏组织病理改变。

按试剂说明书操作，测定各组大鼠血清中TNF-α、IL-6、SOD、丙二醛含量。

实验数据均以x±s表示，采用SPSS 13.0统计软件进行单因素方差分析及最小显著差法进行组间两两比较，P<0.05为差异有统计学意义。

与对照组比较，模型组大鼠血糖水平、AST 和ALT活性均升高，提示建模成功，且模型大鼠肝功能已出现损害；与模型组比较，4、8 mg/kg人参皂苷Rg1组大鼠血糖及血清中AST、ALT活性均下降(P＜0.01)。

Table 1表 1

表 1 人参皂苷对糖尿病大鼠血糖及肝功影响(x±s,n=10) 注：与对照组比较，a P<0.01；与模型组比较，b P<0.01；与4 mg/kg人参皂苷Rg1组比较，c P<0.05。

表 1人参皂苷对糖尿病大鼠血糖及肝功影响(x±s,n=10)

对照组大鼠肝组织结构清晰，胞浆深染，汇管区无炎性细胞浸润(图 1A)；糖尿病模型组大鼠肝小叶内细胞索结构紊乱，肝细胞肿胀，体积增大，局部有炎症细胞浸润(图 1B)；人参皂苷Rg1(8 mg/kg)组与模型组相比，肝组织结构清晰，脂肪组织减少，浸润的炎细胞减少(图 1C)。

图 1

A：对照组；B：模型组；C：8 mg/kg人参皂苷Rg1组。 图 1 人参皂苷Rg1对糖尿病大鼠肝组织病理形态学影响(HE，×200)

与对照组比较，2型糖尿病大鼠丙二醛、TNF-α、IL-6含量均增加，而SOD活力降低(均P＜0.01)；与模型组比较，4、8 mg/kg人参皂苷Rg1组大鼠丙二醛、TNF-α、IL-6含量均下降、SOD活力升高(均P＜0.01)。

Table 2">表 2

表 2人参皂苷对糖尿病大鼠血清生化因子影响(x±s,n=10) 注：与对照组比较，a P<0.01；与模型组比较，b P<0.01；与4 mg/kg 人参皂苷Rg1组比较，c P<0.05。

表 2人参皂苷对糖尿病大鼠血清生化因子影响(x±s,n=10)

糖尿病性肝损伤，作为非酒精性脂肪肝的一种，已经引起越来越多学者的关注，约有20%的患者可能发展为肝硬化或肝癌。糖尿病性肝损害病理主要表现为肝内脂肪组织浸润、脂肪性肝炎、肝纤维化，后期常发展为肝硬化。本研究采用高脂饮食和STZ相结合的方法诱导大鼠2型糖尿病模型，HE染色显示部分肝组织细胞索结构紊乱、肝细胞肿胀、体积增大、局部有炎症细胞浸润，提示有肝损伤发生，血清中AST、ALT活性增加，表明肝功能受损；结果表明人参皂苷Rg1组大鼠血清中AST、ALT活性降低、肝组织形态学改变减轻。提示人参皂苷Rg1对糖尿病性肝损伤具有一定的改善作用。

糖尿病的发病机制复杂，大量研究显示氧化应激和炎症反应为糖尿病及其并发症的主要原因^{[6 ,7]}。代谢紊乱时高糖可诱导氧化应激反应发生，活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)大量生成。ROS包括大量的超氧阴离子、羟自由基等加重胰岛β-细胞凋亡损伤，还可以激活c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase，JNK)、NF-κB通路加重胰岛素抵抗^[8,9]。在这一过程大量增加的TNF-α和IL-6可通过JNK、NF-κB通路使胰岛素受体底物(IRS)丝氨酸磷酸化，破坏胰岛素信号通路，加重胰岛素抵抗^[10]。因此，抑制氧化应激、抑制炎症反应对糖尿病的治疗至关重要。人参皂苷Rg1具有抗炎抗氧化的药理作用，本研究结果显示，人参皂苷Rg1在改善肝功能的同时对2型糖尿病引起的大鼠血清中SOD活力降低、丙二醛含量增加以及血清中炎症因子TNF-α和IL-6升高具有一定的拮抗作用。提示人参皂苷Rg1对糖尿病肝损伤的保护作用机制可能与其抗炎抗氧化作用有关。