人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染是子宫颈癌及癌前病变-子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)的必要条件。女性HPV感染率和型别分布存在一定的地区、种族和年龄差异^{[1, 2, 3, 4, 5]}。为了解上海市女性宫颈HPV感染状况，对2009年5月—2012年12月在上海市第八人民医院妇科门诊就诊的2 701例女性宫颈分泌物的HPV检测结果进行分析，以期为宫颈癌的筛查和防治提供依据。 1 对象与方法 1.1 对象

为2009年5月—2012年12月在上海市第八人民医院妇科门诊进行宫颈分泌物HPV感染检测的妇女，共2 701例。 1.2 方法 1.2.1 标本采集

用棉拭子将宫颈口的分泌物擦去，将宫颈刷伸入宫颈口顺时针旋转3~5圈，将宫颈刷置入装有细胞保存液的标本管中。标本室温放置<2 h，4 ℃保存<24 h，1周内检测。 1.2.2 标本检测

采用凯普21种人乳头状瘤病毒(HPV)分型检测试剂盒(广东凯普生物有限公司)，通过聚合酶链反应(PCR)体外扩增和DNA芯片技术进行DNA 提取、扩增、杂交、洗膜、显色及结果读取。21种常见型别包括15种高危型别：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68和6种低危型别：HPV6、11、42、43、44，CP8304(81)。 1.3 统计分析

应用SPSS 16.0软件进行一般描述性分析，率的比较采用χ²检验。HPV各亚型阳性率指该亚型单独或和其他亚型共同出现的阳性率，多重感染重复计算(例如某患者检测结果为HPV16、HPV58二重感染，计算时分别在HPV16、HPV58各计数1次)。 2 结 果 2.1 HPV分型感染情况(表 1)

2701例就诊女性中，HPV感染阳性909例，阳性检出率为33.65%。检出21种亚型，感染率居前10位的占总检出的81.18%。高危型HPV感染664例，占73.05%；高低危混合型HPV感染121例，占13.31%；低危型HPV感染124例，占13.64%。单一感染617例，感染率为22.84%；多重感染292例，感染率为10.81%。多重感染个体感染亚型种类最多7种，其中二重感染211例，感染率为7.81%；三重感染54例，感染率为2.00%；四重感染17例，感染率为0.63%；五至七重感染10例，感染率0.37%。高危型单一感染497例，占74.85%；低危型单一感染120例，占96.77%。多重感染中，高危型感染167例，占57.19%；混合型感染121例，占41.44%；低危型感染4例，占1.37%。

表 1

表 1 HPV分型感染情况 分型及序号 感染数 构成比(%) 感染率(%) 单一感染 多重感染 例数 % 例数 % 高危型    1 HPV16 185 20.35 6.85 96 51.89 89 48.11                 2 HPV52 185 20.35 6.85 92 49.73 93 50.27                 3 HPV58 167 18.37 6.18 92 55.09 75 44.91                 4 HPV53 101 11.11 3.74 44 43.56 57 56.44                 5 HPV33 74 8.14 2.74 35 47.30 39 52.70                 6 HPV68 63 6.93 2.33 31 49.21 32 50.79                 7 HPV66 61 6.71 2.26 19 31.15 42 68.85                 8 HPV31 60 6.60 2.22 23 38.33 37 61.67                 9 HPV18 45 4.95 1.67 23 51.11 22 48.89                 10 HPV39 33 3.63 1.22 13 39.39 20 60.61                 11 HPV59 29 3.19 1.07 12 41.38 17 58.62                 12 HPV56 27 2.97 1.00 9 33.33 18 66.67                 13 HPV45 15 1.65 0.56 2 13.33 13 86.67                 14 HPV51 12 1.32 0.44 3 25.00 9 75.00                 15 HPV35 12 1.32 0.44 3 25.00 9 75.00 低危型    1 HPV11 100 11.00 3.70 53 53.00 47 47.00                 2 CP8304 73 8.03 2.70 31 42.47 42 57.53                 3 HPV6 67 7.37 2.48 30 44.78 37 57.53                 4 HPV44 12 1.32 0.44 1 8.33 11 91.67                 5 HPV43 4 0.44 0.15 4 100.00 0 0.00                 6 HPV42 1 0.11 0.04 1 10.00 0 0.00

表 1 HPV分型感染情况

HPV感染女性年龄为16~79岁，平均(34.36±10.79)岁，其中，16~45岁762人，占83.82%。各年龄组总体感染率差异有统计学意义(χ²=13.74，P=0.017)，低年龄组(16~25岁)感染率最高，高年龄组(≥66岁)最低。不同年龄组高危型、低危型、混合型感染率差异均有统计学意义(均P<0.05)。将56~65岁组和≥66岁组合并后对不同年龄组感染构成进行比较，结果表明，各年龄组均以高危型感染构成比最高，56~65岁组低危型构成最低，其余年龄组混合型构成最低。

表 2

表 2 高危、低危和混合型HPV感染年龄分布 年龄(岁) 受检 人数 高危型 低危型 混合型 合计 感染数 % 感染数 % 感染数 % 感染数 % 16~25 573 131 22.86 41 7.16 39 6.81 211 36.82 26~35 996 276 27.71 38 3.82 32 3.21 346 34.74 36~45 668 151 22.30 28 4.19 26 3.89 205 30.69 46~55 286 77 26.92 11 3.85 12 4.20 100 34.97 56~65 123 28 22.76 4 3.25 6 4.88 38 30.89 ≥66 55 1 1.82 2 3.64 6 10.91 9 16.36 合计 2 701 664 24.58 124 4.59 121 4.48 909 33.65

表 2 高危、低危和混合型HPV感染年龄分布

16~25、26~35、36~45、46~55、56~65和≥66岁HPV单一感染女性分别为122例(19.77%)、250例(40.52%)、143例(23.18%)、73例(11.83%)、26例(4.21%)和3例(0.49%)；多重感染女性分别为89例(30.48%)、96例(32.88%)、62例(21.23%)、27例(9.25%)、12例(4.11%)和6例(2.05%)。单一感染和多重感染均以26~35岁构成比最高，≥66岁构成最低。不同年龄组单一感染与多种感染率差异有统计学意义(χ²=19.30，P=0.002) 3 讨 论

上海第八人民医院为上海市徐汇区二级甲等医院，该辖区毗邻近郊区县和上海主城区，医院，就诊病人不仅包含户籍常住人口，也有大量外来流动人口。该医院门诊女性HPV感染率为33.65%，接近浙南地区(29.50%)^[1]，象山地区(37.79%)^[2]，重庆永川地区(37.21%)^[3]和西安地区(37.15%)^[4]；低于苏州地区(58.15%)^[5]和嘉兴地区(42.66%)^[6]；高于萧山地区(21.51%)^[7]和陕西咸阳城区(18.70%)^[8]。说明女性宫颈HPV感染率可能因HPV筛查标准、人群、社会经济、文化和地域不同而改变。

HPV感染型别在世界范围内的分布存在明显的地区差异，HPV 16是与宫颈癌联系最紧密的亚型，并随地域变化很小^[9]。尽管在不同国家、不同地区HPV16的检出率不同，但都有相对较高的水平。HPV16在中国也是最为常见的感染型别，本研究显示，HPV16与HPV 52 感染率并列最高，其后依次为HPV58、53和11，与杭州萧山地区^[7]HPV16(23.7%)、HPV58(14.0%)、HPV33(9.8%)、HPV52(8.4%)和HPV11(7.4%)，西安地区^[4]前5位HPV16(28.32%)、HPV58(12.96%)、HPV52(11.57%)、HPV33(5.48%)、HPV6(5.38%)，沈阳市^[10]前5种常见的HPV16(14.38%)、HPV58(6.96%)、HPV52(5.26%)、HPV33(3.59%)、HPV53(3.29%) 的分布均略有差异，而与山东地区^[11]常见型别HPV16(26.75%)、HPV52(25.75%)、HPV58(10.47%)分布基本一致。

本研究中HPV高危型和高低危混合型感染占总数的86.69%，与文献报道的HPV感染以高危型感染为主的结论一致^{[1, 2, 3, 4, 5, 6, 7]}。高危型HPV持续感染是导致宫颈癌前病变发展成宫颈癌的主要病因，高危型HPV的清除率比低危型HPV低，高危型HPV的持续性感染者患子宫颈上皮非典型增生Ⅲ度的风险增加100~300倍^[12]。目前高危型HPV的检测和控制己成为子宫颈癌二级预防与一级预防的焦点^[13]。

由于不同亚型HPV编码外壳蛋白的基因变异很大，不同亚型HPV之间基本没有交叉保护性抗体，容易造成不同高危型HPV多重感染或多次感染^[14]。Lee等^[15]进一步研究了多重HPV感染与宫颈癌的关系，发现单一HPV感染使宫颈癌的患病风险增加19.9倍，而多重感染使该风险增加到31.8倍。与文献报道的五重感染^{[2, 16]}不同，本研究发现个体HPV多重感染亚型种类最多有7种，而且多重感染中纯高危型感染及高低危混合感染占98.63%。由此可见，HPV感染呈现多种亚型、多重感染的现状，应加强对多重感染病例的随访和治疗，定期进行HPV感染复查、液基薄层细胞检测和阴道镜检查，改善疾病预后和减少感染的持续发生。

16~25岁感染率在各年龄组中最高，与该年龄女性性活跃频次较高，并且缺乏性健康卫生意识有关。46~55岁中老年妇女感染率较高，与性卫生健康意识淡薄有关^[17],也可能由于年长女性绝经后卵巢功能下降，雌激素水平降低，机体对外界有害因素的抵抗力减低从而感染HPV所致。≥66岁感染率最低，可能与随着时间的延长，感染HPV获得免疫力有一定关系。低危型感染率16~25岁最高，符合低危型HPV多见于年轻妇女的论断，26~35岁高危型感染率最高，混合型≥66岁最高，提示年龄越大，混合感染的机会在增加。

综上所述，上海市女性HPV感染呈现以单一感染、高危型感染和16~45岁感染为主，低危感染、高低危混合感染和多重感染并存的特征。应加强对HPV 16、HPV 52、HPV 58、HPV 53等常见亚型的监测和筛查，加强对高危型感染和多重感染女性的进一步随访、检查和治疗，加大对育龄妇女预防HPV感染的健康教育和宣传，预防和减少HPV感染导致的宫颈癌及癌前病变的发生。