2. 辽宁省肿瘤医院
玛卡(Maca)原产于秘鲁海拔>3 500 m的安第斯山区,当地人把玛卡作为食物和草药用来增强精力,抗疲劳,提高生育能力等。玛卡经加工后的干粉或其提取物的抗疲劳试验结果表明,玛卡具有显著的抗疲劳功效[1, 2, 3]。玛卡的有效成分可分为营养成分和功能成分,玛卡酰胺类化合物属于玛卡中的功能成分,N-苄基十六碳酰胺(N-benzylhexadecanamide,NBH)是玛卡酰胺类化合物的重要成分之一[4, 5],目前有关NBH对小鼠抗疲劳作用研究较少,本研究分别采用多次灌胃法和一次灌胃法给予小鼠NBH和玛卡醇提物,通过比较小鼠负重游泳时间,探讨NBH与玛卡醇提物抗疲劳作用差异,结果报告如下。 1 材料与方法 1.1 实验动物
SPF级雄性昆明种小鼠90只(沈阳药科大学实验动物中心),许可证号:SCXK(辽)2010-0001,体重(20±2)g,饲养温度为18~24℃,相对湿度50%~60%,小鼠自由饮食饮水,观察1周后进行实验。 1.2 主要试剂
玛卡醇提物(辽宁未来生物科技有限公司),干燥玛卡根切片,粉碎成粉末,用乙醇提取,浓缩,干燥,粉碎,过80目筛,低温避光密封保存。NBH(沈阳化工大学制药与生物工程学院制药工程教研室制备),经红外和核磁共振氢谱确证结构,薄层色谱一点,灰白色粉末,溶点94~96 ℃,不溶于水,在甲醇中溶解较好,低温避光密封保存,实验前用蒸馏水配制成混悬液使用。 1.3 分组与处理 1.3.1 多次灌胃实验
将60只小鼠随机分为6组,每组10只,即对照组、1 800、180、45 mg/kg玛卡组,7.5、0.5 mg/kg NBH组,分别灌胃给予蒸馏水、玛卡醇提物与NBH,灌胃容量为0.4 mL/只,每日1次,连续37 d。第37 d小鼠灌胃60 min后,将小鼠尾部负重5%铅丝,单独放于水槽中,保持水温于(26±1)℃,观察和记录小鼠自投入水中后到沉入水中10 s不能上浮水面(处于力竭状态)的时间。 1.3.2 一次灌胃实验
将30只小鼠,随机分为3组,即对照组、7.5 mg/kg NBH组、1 800 mg/kg玛卡组,一次性分别灌胃给予蒸馏水、玛卡醇提物与NBH,灌胃容量为0.4 mL/只,60 min后,负重游泳实验方法同1.3.1。 1.4 统计分析
数据采用x±s表示,采用SPSS 16.0软件对数据进行统计分析,组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用最小显著差法,以P<0.05为差异有统计学意义。 2 结 果 2.1 多次给予NBH与玛卡醇提物对小鼠体重及游泳时间影响(表 1)
连续给予小鼠NBH和玛卡醇提物37 d后,与对照组比较,各剂量NBH组及玛卡组小鼠体重无明显变化(P>0.05)。与对照组比较,7.5 mg/kg NBH组和1 800 mg/kg玛卡组小鼠负重游泳时间明显延长,差异有统计学意义(P<0.05),0.5 mg/kg NBH组及180、45 mg/kg玛卡组小鼠游泳时间变化无统计学意义。
| 表 1 多次灌胃NBH和玛卡醇提物对小鼠体重及游泳时间影响(x±s,n=10) |
对照组、7.5 mg/kg NBH 组、1 800 mg/kg 玛卡组小鼠负重游泳时间分别为(12.60±3.37)、(15.80±4.02)、(17.50±4.70)min;与对照组比较,7.5 mg/kg NBH 组小鼠游泳时间明显延长,差异有统计学意义(P<0.05);而1 800 mg/kg 玛卡组小鼠游泳时间与对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。 3 讨 论
本研究结果显示,多次灌胃和一次灌胃给予7.5 mg/kg NBH均可使小鼠负重游泳时间延长,多次灌胃给予1 800 mg/kg玛卡醇提物也可使小鼠负重游泳时间延长,提示NHB及玛卡醇提物可增强小鼠抗疲劳作用,在相同效应情况下,NHB使用剂量仅为玛卡醇提物的1/240这一结果与文献[4, 5]的报道可能为玛卡中抗疲劳的有效成分之一相符。本研究结果还显示,与对照组比较,长期给予NHB和玛卡醇提物各剂量组小鼠体重无明显变化,提示长期给予NBH或玛卡醇提物对雄性小鼠生长无明显影响。
玛卡中有各种营养成分,包括糖类,脂肪酸,氨基酸,维生素,矿物质等,并推测这些营养物质具有增强抗疲劳的作用[1]。NBH是玛卡中的有效成分之一,含量很少,是小鼠的非营养成分,在抗疲劳实验中的作用不同于营养物质,应有不同的作用机制。NBH也是辣椒素的类似物,辣椒素及辣椒素同系物具有抗疲劳的作用[6],文献报道辣椒素类具有促进能量代谢[7]、改善神经系统递质紊乱等作用。因此,推测NBH可能与辣椒素的作用机理类似,通过作用于神经系统、调节物质代谢等机制以发挥抗疲劳作用,其作用机理有待进一步研究。另据文献[8]报道长链脂肪醇也具有抗疲劳作用,长链脂肪醇的脂肪链与NBH的脂肪链相似,提示NBH的脂肪链在抗疲劳作用上十分重要。而具有抗疲劳作用的茶氨酸[9]分子的酰胺健提示NBH的酰胺键也可能是抗疲劳作用机制之一。
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2015, Vol. 31
