中国公共卫生  2014, Vol. 30 Issue (9): 1205-1207   PDF    
引用本文
张振昶, 陈丽霞, 武国德, 李鸣明, 苏刚, 李鑫. ACE基因多态性与缺血性脑卒中易感性关系[J]. 中国公共卫生, 2014, 30(9): 1205-1207.
ZHANG Zhen-chang, CHEN Li-xia, WU Guo-de, et al. Relationship between genetic polymorphism of ACE gene and ischemic stroke[J]. Chinese Journal of Public Health, 2014, 30(9): 1205-1207.
ACE基因多态性与缺血性脑卒中易感性关系
张振昶1, 陈丽霞1, 武国德1, 李鸣明1, 苏刚2, 李鑫1    
1. 兰州大学第二医院神经内科, 甘肃 兰州 730030;
2. 兰州大学基础医学院
数字出版日期：2014-8-8 9:19.
基金项目：甘肃省科技支撑项目（1104FKCA115）
作者简介：张振昶（1977- ），男，甘肃兰州人，副主任医师，硕士，主要从事神经内科的临床诊疗工作。
摘要：目的 探讨ACE基因多态性与缺血性脑卒中的相关性。方法 采用回顾性病例-对照研究的方式，选取166例脑卒中患者与120名正常健康人群，采用聚合酶链反应（PCR）与直接测序法对其ACE基因进行基因分型。结果 PCR分型结果显示，病例组中ACE基因I/D分型中，D/D型、I/D型与I/I型频率分别为71.1%、24.7%与4.2%；而对照组D/D型、I/D型与I/I型频率分别为50.8%、41.7%与7.5%，2组差异有统计学意义；D/D型基因携带者患缺血性脑卒中的风险是I/D型与I/I型基因携带者的2.38倍（95%CI=1.463～3.872）和2.79倍（95%CI=1.914～4.167）。结论 携带D/D型基因的人群患缺血性脑卒中风险明显高于携带I等位基因的人群。
关键词： 血管紧张素转换酶(ACE)     缺血性脑卒中     基因多态性    
Relationship between genetic polymorphism of ACE gene and ischemic stroke
ZHANG Zhen-chang1, CHEN Li-xia1, WU Guo-de1, et al    
Department of Neurology, The Second Hospital of Lanzhou University, Lanzhou, Gansu Province 730030, China
Abstract: Objective To investigate the relationship between genetic polymorphism of angiotension-converting enzyme(ACE) gene and ischemic stroke.Methods Polymerase chain reaction(PCR)and DNA sequencing were used to detect ACE genotypes in 166 patients with ischemic stroke and 120 healthy controls in a Han population.Results Among the cases with ischemic stroke,the I/D frenquencies of D/D,I/D,I/I were 71.1%,24.7%,4.2%,and that of the controls were 50.8%,41.7%,7.5%,respectively.There were significant differences between the two groups.The relative risk of suffering from ischemic stroke in D/D gene carriers was 2.38 and 2.79 times compared to I/D and I/I gene carriers(95% confidence interval[95%CI] of I/I=1.463-3.872 and 95%CI of I/D=1.914-4.167),and the differences were statistically significant(P<0.05).Conclusion ACE polymorphism is associated with ischemic stroke.The ACE gene D/D allele carriers have a significantly higher risk of ischemic stroke than other genotype carriers and D/D allele may be a genetic susceptibility gene for ischemic stroke.
Key words: angiotension-converting enzyme     ischemic stroke     gene polymorphism    

缺血性脑卒中又称脑梗死，是一种受遗传因素、环境因素及其相互作用影响的多因素、多基因疾病[1]。缺血性脑卒中常由脑部供血障碍引起，主要表现为大脑缺血、缺氧，以及由此引发的局限性脑组织损伤[2, 3]。血管紧张素转换酶(angiotensin-converting enzyme，ACE)是一种单链多态酸性糖蛋白，主要存在于血管内皮细胞，是肾素血管紧张素系统(renin-angiotensin system，RAS)的关键酶[4, 5]。本研究采用回顾性病例-对照研究方法，比较脑卒中患者与正常健康人群ACE基因分型，探讨ACE基因多态性与缺血性脑卒中的相关性。 1 对象与方法 1.1 对象

病例组：选取兰州大学第二医院神经内科自2006年7月—2011年12月收治的缺血性脑卒中患者279例，全部病例均按国际疾病分类第10版的标准诊断[6]，同时均行头磁共振成像或电子计算机体层成像证实诊断。经剔除其中并发糖尿病42例、冠心病27例、高血压11例以及其他疾病33例，其余166例患者，组成病例组。其中男性92例,女性74例。另取同期健康体检为正常的中老年人群120人为对照组，其中男68人，女52人。 1.2 方法 1.2.1 问卷调查与体格检查

采用自制调查问卷进行调查，内容包括年龄、性别、受教育程度、是否吸烟、是否饮酒、运动频率(>3次、1～3次/周、<1次/周)。测量身高、体重，计算体质指数(body mess index，BMI)[5]、检测血脂[4]及脂蛋白浓度。 1.2.2 基因组DNA提取

采集静脉血3 mL，加入乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acid，EDTA)钠盐抗凝；采用改良碘化钠法[7]提取白细胞基因组DNA。 1.2.3 引物设计

参照文献[8]的方法，上游引物序列为：5′-CTGGAGACCACTCCCAT CCTTTCT-3′；下游引物序列为：5′-GATGTGGCCATCACATTCGTCAGAT-3′，引物均由上海生工生物技术有限责任公司合成。 1.2.4 PCR反应体系及ACE基因多态性检测

PCR反应体系为20 μL，其中模板DNA 1 μL，2种引物浓度均为1 pmol，使用2×Master Mix 10 μL(天根生物科技有限责任公司)，dd H2O补齐至20 μL。PCR反应条件[9]为：94 ℃ 2 min预变性；94 ℃ 50 s，58 ℃ 50 s， 72 ℃ 50 s，扩增25个循环； 最后延伸72 ℃ 5 min。电泳后分析PCR条带。 1.2.5 测序验证

随机抽样选取PCR扩增产物各50 μL，送北京金维智生物技术有限责任公司完成测序，并与PCR电泳结果比较。 1.3 统计分析

应用SPSS 13.0软件进行统计学处理；基因频率采用基因直接计数法进行计算，研究对象与Hardy-Weinberg平衡的符合程度、ACE基因I/D各基因型多态性分布、组间基因型及等位基因频率的比较采用χ2检验，以OR值及95％CI表示相对风险度，P<0.05 为差异有统计学意义。 2 结 果 2.1 基本特征(表 1)

病例组共166例，年龄42～76岁，平均(52.9±8.3)岁。对照组共120人，年龄41～86岁，平均(53.7±9.1)岁。2组人群在年龄、性别、受教育程度和饮酒分布差异均无统计学意义(均P>0.05)。

表 1 病例组与对照组一般人口学特征分布
2.2 ACE基因多态性与缺血性脑卒中关系

病例组ACE基因型的频率分别为：D/D型71.1%(118/166)，I/D型24.7%(41/166)，I/I型4.2%(7/166)，等位基因I/D的频率分别为16.6%(55/332)和83.4%(277/332)，符合 Hardy-Weinberg平衡(χ2=1.884，P=0.390)。对照组ACE基因型的频率分别为：D/D型50.8%(61/120)，I/D型41.7%(50/120)，I/I型7.5%(9/120)，等位基因I/D的频率分别为28.3%(68/240)和71.7%(172/240)，符合 Hardy-Weinberg平衡(χ2=0.081，P=0.960)。缺血性脑卒中的病例组D/D、I/D、I/I 3种基因型频数分别为118、41、7，而对照组则分别为61、50、9，病例组I/D基因型比率及 I等位基因频率均小于对照组(χ2=12.20，P=0.001)，携带D/D基因型个体患缺血性脑卒中的风险为I/I型和I/D型基因型携个体的2.38倍(95%CI=1.463～3.872)和2.78倍(95%CI=1.914～4.167)，差异有统计学意义(χ2= 12.20，P=0.001)。 2.3 缺血性脑卒中危险因素logistic分析(表 2)

以是否患有缺血性脑卒中为因变量，以单因素分析中有统计学意义的吸烟、血脂异常、ACE基因I/D多态性与BMI 4个因素进行逐步法logistic回归分析。吸烟、血脂水平、ACE基因I/D多态性以及BMI均是缺血性脑卒中的独立危险因素。

表 2 缺血性脑卒中影响因素logistic回归分析
3 讨 论

人类ACE基因位于常染色体17q23，基因长度大约为21 Kb，由26个外显子和25个内含子组成，人群中有3种不同基因型，DD型、ID型和II型。研究表明，个体间血浆ACE活性的28％～44％归因于ACE基因I/D多态性，D等位基因共显性与血浆ACE活性密切相关[10]。本研究结果表明，缺血性脑卒中的病例组携带D/D基因型个体患缺血性脑卒中的风险为携带至少一个I等位基因的基因型携个体的2.38倍，并且多因素非条件logistic回归分析结果同样显示，调整吸烟、血脂水平异常及BMI等因素后，ACE基因I/D多态性仍是缺血性脑卒中的独立危险因素(ORI/I=2.094和ORI/D=2.243)。

参考文献
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