近年来，随着抗菌药物的广泛使用，细菌耐药情况日益严重，多耐药、泛耐药细菌感染成为临床最为棘手的问题，对抗菌药物的合理应用提出新的挑战。不同地域、不同时期的细菌分布及耐药性具有一定差异与变迁性，了解所在医疗区域内医院感染病原菌的分布与耐药性，对合理使用抗菌药物、减少细菌耐药性十分必要^{[1, 2, 3]}。本研究收集大连医科大学附属第一医院2011—2012年临床送检的各类标本进行病原菌分离及耐药性分析，现将结果报告如下。 1 对象与方法 1.1 菌株来源

大连医科大学附属第一医院2011年1月—2012年12月送检的各类临床标本,包括痰、尿、血液、脑脊液、分泌物及其他体液标本。 1.2 细菌鉴定及药敏

采用美国DADE公司Microscan全自动微生物分析仪进行细菌鉴定及药敏试验，美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦、米诺环素药敏试验采用K-B法。结果判定采用美国临床实验室标准化委员会/临床和实验室标准协会(NCCLS/ CLSI)标准^[4]。 1.3 质控菌株

大肠埃希菌ATCC 25922，铜绿假单胞菌ATCC 27853，肺炎克雷伯菌ATCC700603，金黄色葡萄球菌ATCC 25923、ATCC 29213，粪肠球菌ATCC 29212。 1.4 统计分析

应用WHONET 5 软件对资料进行统计分析。 2 结 果 2.1 细菌分布

2011—2012年共分离出病原细菌9 645株，其中革兰阴性菌7 206株，占74.7%(7 206/9 645)，居前3位革兰阴性病原菌分别为肺炎克雷伯菌占22.1%(1 589/7 206)、鲍氏不动杆菌占21.2%(1 529/7 206)、铜绿假单胞菌占19.3%(1 391/7 206)；革兰阳性菌2 439株，占25.3%(2 439/9 645)，居前3位的革兰阳性菌分别为金黄色葡萄球菌占34.2%(833/2 439)、凝固酶阴性葡萄球菌占33.6%(820/2 439)、屎肠球菌占18.5%(450/2 439)。 2.2 产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率

大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产ESBLs菌株检出率分别为44.9%(618/1 376)、32.2%(512/1 589)，MRSA检出率为55.9%(466/833)。 2.3 细菌耐药率(表 1)

主要革兰阴性菌以大肠埃希菌对环丙沙星耐药率为最高达78.1%(1 075/1 376)，其次为鲍氏不动杆菌对环丙沙星耐药率为76.2%(1 165/1 529)、对头孢吡肟耐药率为75.0%(1 147/1 529)；革兰阳性菌对抗菌药物的耐药率以金黄色葡萄球菌对青霉素G耐药率为最高达97.5%(797/833)，其次为金黄色葡萄球菌对红霉素耐药率为83.2%(693/833)、对四环素耐药率为55.3%(460/833)。

表 1

表 1 主要革兰阴性菌对常用抗菌药物的耐药情况 抗菌药物 肺炎克雷伯菌 大肠埃希菌 鲍氏不动杆菌 铜绿假单胞菌 株数 耐药率(%) 株数 耐药率(%) 株数 耐药率(%) 株数 耐药率(%) 阿米卡星 146 9.2 119 8.6 1 014 66.3 370 26.6 氨曲南 756 47.6 871 63.3 — — — — 环丙沙星 755 47.5 1 075 78.1 1 165 76.2 540 38.8 庆大霉素 658 41.4 827 60.1 1 118 73.1 543 39.0 头孢吡肟 777 48.9 891 64.7 1 147 75.0 394 28.3 头孢曲松 845 53.2 906 65.8 1 103 72.1 — — 头孢噻肟 842 53.0 907 65.9 1 128 73.8 — — 头孢他啶 694 43.7 788 57.3 1 100 71.9 — — 妥布霉素 466 29.3 653 47.4 1 052 68.8 531 38.2 亚胺培南 8 0.5 6 0.5 — — 324 23.3 左氧氟沙星 625 39.3 998 72.6 938 61.3 520 37.4 美罗培南 7 0.4 10 0.8 1 058 69.2 524 37.7 头孢哌酮/舒巴坦 287 18.0 192 13.9 561 36.7 368 26.5 哌拉西林/他唑巴坦 202 12.7 73 5.3 — — 324 23.3 米诺环素 — — — — 398 26.0 — — 注：“—”表示未做药敏。

表 1 主要革兰阴性菌对常用抗菌药物的耐药情况

本研究结果显示，医院感染主要病原菌为肺炎克雷伯菌、鲍氏不动杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌，与文献报道一致^{[5, 6, 7]}。产ESBLs大肠埃希菌和克雷伯菌属在抗菌药物作用下引起质粒耐药基因突变，质粒的传递性导致耐药基因在种属内扩散，表现为多重耐药性^{[8, 9, 10]}；MRSA mecA基因通过R质粒或转座子转入金黄色葡萄球菌，编码青霉素结合蛋白2a，使药物不能阻碍细胞壁肽聚糖层合成，从而表现为多重耐药性^[11]。医院感染对患者生命的威胁及医疗安全的影响不容忽视，而多重耐药菌感染增加了医院感染的难治性，因此应重视抗菌药物的合理使用，既要考虑病原菌的特点及药敏结果，也要注意患者的年龄、病理生理、免疫状况及抗菌药物的药理作用特点，严格遵守预防用药和联合用药指征，减少耐药菌株的出现，降低医院感染；另外也要注意加强重症患者的监测，认真做好消毒隔离，对发现医院感染倾向的患者及时采取相关干预措施预防医院感染的发生，防止耐药菌的交叉感染和传播^{[12, 13]}。