高温是烧伤发生所处的常见环境,高温或烧伤单因素对机体脏器功能的影响已引起广泛关注,而高温复合烧伤对机体脏器的影响研究较少,关于高温复合烧伤对心肌损伤的影响已见报道[1]。为进一步阐述高温复合烧伤对兔内脏的损伤程度、病理过程、转归及治疗,本研究通过模拟高温复合烫伤环境,探讨高温复合烫伤对兔肝肾功能的影响,结果报告如下。
1 材料与方法 1.1 主要试剂与仪器丙氨酸氨基转移酶( alanine aminotrans ferase,ALT ) 、天门冬氨酸氨基转移酶 ( aspartate aminotransferase,AST) 试剂盒( 上海科华公司) ,肌酐( creatinine,Cr) 试剂盒( 四川新成生物公司) ,尿素氮试剂盒( blood urea nitrogen,BUN) ( 日本协和医药株式会社) ; 日立7600 全自动生化分析仪( 日本日立公司) ; SSW 型电热恒温水槽( 上海博迅实业有限公司) ; RXZ 智能型人工气候箱( 宁波江南仪器厂) 。
1.2 实验动物及分组选用健康雄性新西兰大耳白兔( 南昌大学医学院实验动物科学部) 18 只,体重 ( 2.2 ± 0.1) kg,许可证号: SCXK( 赣) 2009-0001。 实验动物随机分为常温组、高温组、高温习服组,每组6 只。
1.3 动物模型建立常温组: 常温喂养9 d,烫伤,烫伤后常温下喂养,干球温度( 24 ± 1) ℃,相对湿度 ( 55 ± 5) %。高温组: 常温喂养9 d,烫伤,烫伤后高温下喂养。高温习服组: 高温暴露9 d,测定热适应前后肛温变化,至进入高温环境肛温升高不超过 0.5 ℃,心率升高不明显即认为达到习服[2],烫伤,烫伤后高温下喂养。高温暴露条件: 干球温度 ( 38 ± 1) ℃,相对湿度( 65 ± 5) %,时间2 h[3]。烫伤前12 h 禁食,自由饮水,以100 g /L 硫化钠背部及臀部脱毛,称重后用氯胺酮注射液40 mg /kg 肌肉注射麻醉。将动物背部及躯干两侧置于92 ℃恒温水槽中烫20 s,制成烧伤总面积( Total Body Surface Area,TBSA) 30%Ⅲ度烧伤模型[4]。伤后创面涂擦碘伏,经静脉注射复方乳酸钠林格液复苏。
1.4 标本采集与测定各组分别于伤前及伤后1、 3、6、12、24、48 h 取静脉血2 mL,离心( 1 000 r /min) 10 min,按试剂盒说明使用日立7600 全自动生化分析仪测定ALT、AST、Cr、BUN; 伤后48 h 将动物处死,取动物肝肾标本于10%中性甲醛溶液中分别固定,用于观察病理形态。
1.5 统计分析实验数据以 x ± s 表示,采用SPSS 17.0 统计软件进行重复测量的方差分析,P < 0.05 为差异有统计学意义。
2 结果 2.1 各组动物生存情况观察烫伤后,高温组有3 只兔分别于伤后6 ~ 12 h( 死亡2 只) 及36 ~ 48 h 间死亡; 高温习服组有1 只于伤后12 ~ 24 h 间死亡; 常温组伤后2 d 内无死亡。
2.2 烫伤后不同时段肝功能变化( 表 1)| 表 1 各组兔ALT 测定值(x ± s ,U /L) |
烫伤前,高温习服组ALT、AST 明显高于常温组和高温组 ( F = 22.48、81.35,P < 0.01) ; 伤后,高温习服组和高温组ALT 值在各时相点均明显高于常温组( F = 1 252.56、2 133.17,P < 0.05) ; 伤后与高温组比较,高温习服组ALT、AST 明显降低( F = 9.42、 49.22,P < 0.05) 。
2.3 烫伤后不同时段肾功能变化( 表 2)| 表 2 各组兔Cr 测定值(x ± s ,μmol /L) |
烫伤前,高温习服组Cr、BUN 明显高于常温组和高温组 ( F =6.29、6.08,P <0.05) ;烫伤后,高温习服组和高温组Cr、BUN 值在各时相点均明显高于常温组 ( F =93.04、94.75,P < 0.01) ,与高温组比较,高温习服组Cr、BUN明显降低( F =145.97、34.70,P <0.01) 。
2.4 肝肾病理形态观察 2.4.1 肝组织病理改变( 图 1)常温组兔肝脏组织中仅部分肝小叶可见中央静脉扩张充血,肝细胞无明显变化( 图 1A) ; 高温习服组改变主要表现为肝细胞局部轻度肿胀、变性( 图 1B) ; 高温组则表现为肝包膜下片状或点状的充血、水肿( 图 1C) 。
![]() | 图 1 烫伤48h后兔肝组织病理学改变(HE染色) |
常温组兔肾组织中肾小管上皮细胞也可见水肿,但明显较高温组轻 ( 图 2A) ; 高温习服组则表现为小部分结合管部轻度水肿( 图 2B) ; 高温组改变主要表现为较广泛肾小管上皮细胞严重水肿,间质也有水肿( 图 2C) 。
![]() | 图 2 烫伤48h后肾组织病理学改变(HE染色,×400) |
本研究结果显示,高温组和高温习服组兔均存在死亡,而常温组未见死亡,病理观察结果也显示常温组肝肾损伤相对较轻,表明高温复合烫伤应激较单纯烫伤对机体的影响明显。烫伤后机体若仍处于高温条件下,皮肤血管扩张,腹腔内脏血管收缩,造成循环血容量进一步减少及对各脏器缺血缺氧性损害加大,加重烫伤休克或延迟休克的复苏。烫伤前生化指标比较结果显示,高温组、高温习服组ALT、 AST、Cr、BUN 均明显高于常温组,表明高温对肝肾功能有明显损害作用。
烫伤后组间比较结果显示,高温习服组和高温组各指标逐渐高于常温组,表明烫伤复合高温的双重应激加重了对肝肾的损害。高温环境下,肾血流量减少,肾小球滤过率下降,尿液浓缩,肾脏负荷加重以及高热状态对氧的需求增加等,均可导致肾组织缺氧,加上大面积重度烧伤所致休克、肾毒性物质等因素,又进一步造成肾实质损害。而当机体长时间处于高温环境时,肝脏中丙二醛含量增高,自由基产生过多或机体抗氧化功能下降,而对肝细胞产生一定损害作用[5]。
本研究结果显示,高温习服组各生化指标值相对低于高温组。有报道认为,经过热习服训练的个体,较未经热习服训练个体更能耐受外界较高的环境温度,热习服动物应激反应程度明显轻于热应激动物[6]。这可能是因为经过高温习服,在相同应激条件下,体内的保护性因素一热休克蛋白70 ( heat shock protein 70,HSP70) 基础值较高及应激后持续升高时间长,利于机体组织器官的保护[7]。
| [1] | 孙俊锋,詹剑华,游浩元,等.高温复合烫伤对兔早期心肌损伤影响[J].中国公共卫生,2011,27(11):1453-1454. |
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| [7] | 张旭辉,裴国献,魏宽海.高温高湿环境犬肢体火器伤后HSP70含量变化的实验研究[J].南方医科大学学报,2001,21(6):408-410. |
2012, Vol. 28





