中国公共卫生  2012, Vol. 28 Issue (6): 795-796   PDF    
引用本文
潘妹霞, 张彩霞, 肖本熙, 张燕军. 大豆异黄酮及雌激素对去势大鼠体重和ghrelin影响[J]. 中国公共卫生, 2012, 28(6): 795-796.
PAN Mei-xia, ZHANG Cai-xia, XIAO Ben-xi, et al. Effects of soy germ phytoestrogens and estradiol on body weight in ovariectomized rats[J]. Chinese Journal of Public Health, 2012, 28(6): 795-796.
大豆异黄酮及雌激素对去势大鼠体重和ghrelin影响
潘妹霞1,2, 张彩霞3, 肖本熙1, 张燕军1    
1. 广东省人民医院(广东省医学科学院), 广州510080;
2. 香港大学生命科学院;
3. 中山大学公共卫生学院
收稿日期: 2012-01-05.
作者简介: 潘妹霞(1972- ),女,海南万宁人,主治医师,博士,主要从事临床营养工作。
摘要: 目的 探讨大豆异黄酮和雌激素对去卵巢大鼠体重、血脂和生长激素释放肽(ghrelin)水平影响。方法 28只去卵巢SD大鼠随机分为4组,分别给予基础膳食(AIN-93 G),基础膳食+低、高剂量异黄酮(0.4、1.6 g/kg)和雌激素(0.15 g/kg),定期测量大鼠体重。12周后,腹腔麻醉大鼠心脏取血,分离血清,分别测定血清血脂、脂蛋白、gh-relin和脂联素水平;分离脏器计算脏器系数。结果 实验期间,对照组和大豆异黄酮组动物体重均明显增加,而雌激素组动物体重在实验期间相对稳定;高剂量异黄酮组和雌激素组大鼠体重增加量(48.67、2.10g)明显低于对照组(95.29g)和低剂量异黄酮组(89.54g)(P<0.05)。雌激素组大鼠子宫/体重比明显高于对照组(P<0.01);高剂量大豆异黄酮组与雌激素组大鼠血清ghrelin水平分别为(3.54±0.82)和(2.78±0.27)ng/mL,明显低于对照组(5.03±1.49)ng/mL(P<0.05);未发现大豆异黄酮和雌激素对血脂、游离脂肪酸和脂联素水平影响。结论 大豆异黄酮和雌激素均能抑制去卵巢大鼠体重增长,其作用可能与调节血清ghrelin水平有关。
关键词: 大豆异黄酮     雌激素     生长激素释放肽(ghrelin)     血脂    
Effects of soy germ phytoestrogens and estradiol on body weight in ovariectomized rats
PAN Mei-xia, ZHANG Cai-xia, XIAO Ben-xi, et al    
People's Hospital of Guangdong Province, Guangdong Academy of Medical Sciences, Guangzhou City, Guangdong Province, Guangzhou 510080, China
Abstract: Objective To explore the effects of phytoestrogens(soy germ products)and estradiol on body weight, serum lipids,and ghrelin levels in ovariectomized rats.Methods Ovariectomized Sprague-Dawley rats were fed a basic diet,a diet supplemented with phytoestrogens(0.4 g/kg diet or 1.6 g/kg diet),and a diet with 17-βestradiol(0.15 g/kg diet),respectively,for 12 weeks.The serum lipids,low-density lipoprotein-cholesterol(LDL-C),high-density lipoprotein-cholesterol,free fatty acid,ghrelin,and adipokins levels were measured.Results During the experiment,the body weight of control rats and the rats receiving soy germ phytoestrogens increased significantly,whereas the body weight of rats receiving 17-βestradiol maintained in a stable level.The increment of body weight of the rats receiving 1.6 g/kg diet of phytoestrogens(48.67 g)and 17-βestradiol(2.10 g)were significantly lower than those of control rats(95.29 g)and the rats receiving 0.4 g/kg diet of phytoestrogens(89.54 g)(P < 0.05).The uteri index in the rats receiving 17-βestradiol was significantly higher than that of control rats(P < 0.001).The serum ghrelin level in the rats receiving high dose of soy germ phytoestrogens(3.54±0.82 ng/ml)and 17-βestradiol(2.78±0.27 ng/ml)was significantly lower than that of control group (5.03±1.49 ng/ml,P < 0.05).No effect of phytoestrogens and 17-βestradiol on serum lipids,lipoproteins and adipokins levels was found.Conclusion Soy germ phytoestrogens and 17-βestradiol may reduce ghrelin levels and thus decrease body weight increment in ovariectomized rats.
Key words: phytoestrogens     estradiol     ghrelin     serum lipids    

植物雌激素是一类具有双酚结构物质,广泛来源于蔬菜、 水果、全谷类、大豆及其制品〔1〕。那晓琳等〔2〕报道,去卵巢大鼠摄食量与对照组相近,但是食物利用率明显升高,而且不同剂量大豆异黄酮对体重的影响与摄食量无关,而与体内对食物利用率有关。提示,去势雌性大鼠体重增长与体内激素水平有一定关系。生长激素释放肽(ghrelin)是具有多种生理功能的脑肠肽,其中的一个重要功能就是参与代谢调节〔3〕。本研究以去势雌性大鼠为对象,观察大豆异黄酮对大鼠体重、血脂水平和ghrelin的影响。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与仪器

大豆异黄酮(荷兰ACATRIS公司) 含异黄酮糖苷267 mg/g (其中大豆甙元152 mg/g,黄豆黄素 80 mg/g,染料木素35 mg/g),全自动生化分析仪(德国贝克曼公司),酶标仪(美国Bio-Rad公司),722分光光度计(上海光学仪器厂),ghrelin和脂联素(adiponectin,ADP)双夹心抗体试剂盒(美国R&D公司)。

1.2 实验动物

本研究通过香港大学动物伦理委员会批准 (1072-05)。选择清洁级3月龄健康SD雌性大鼠(香港大学实验动物中心)28只,平均体重(330.83 ± 11.48) g。饲养条件:温度20~23℃,湿度50%~55%,12 h/12 h昼夜周期。

1.3 分组与处理

大鼠腹腔注射氯胺酮/赛拉嗪麻醉,手术摘除双侧卵巢。将动物随机分为4组(n=7):对照组(基础饲料)、低、高剂量异黄酮组(基础饲料+0.4、1.6 g/kg大豆异黄酮)和雌激素组(基础饲料+0.15 g/kg 17 β-雌二醇)。 基础饲料按AIN-93 G配方配制,饲料中大豆蛋白和大豆油分别以酪蛋白和玉米油替代;动物自由摄食进水,实验期间每周记录动物体重。饲养12周。实验结束后,腹腔注射2%戊巴比妥钠生理盐水麻醉,心脏取血后处死大鼠。以3 500 r/min 离心10 min,分离血清,保存于-80℃备用。分离大鼠肝脏、 脾脏和子宫,称重,计算脏器系数[脏器系数=脏器重量 (mg)/体重(g)]。

1.4 观察指标及方法 1.4.1 血脂、脂蛋白和游离脂肪酸水平检测

血清胆固醇 (cholesterol,Chol)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)采用酶比色法在全自动生化分析仪上检测。游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)采用酶比色法进行检测。

1.4.2 血清ghrelin和脂联素水平检测

采用固相夹心法酶联免疫吸附法分别检测大鼠血清ghrelin和脂联素水平。按照相关试剂盒说明书操作。 1.5统计分析采用SPSS 15.0统计软件包进行统计分析,采用单因素方差分析检验各组间差异,组间比较采用学生化极差分布(SNK)法,P < 0.05表示差异具有统计学意义。

2 结 果 2.1 大豆异黄酮对去势大鼠体重影响(表 1)
表 1 大豆异黄酮和雌激素对大鼠体重增长影响( g，x±s，n = 7)

对照组和不同剂量异黄酮组动物体重均明显增加,而雌激素组动物体重实验期间相对稳定;大鼠喂养12周后体重增加量分别为对照组(95.29 ± 13.63) g,低剂量异黄酮组(89.54 ± 11.94) g,高剂量异黄酮组(48.67 ± 14.13) g,雌激素组(2.10 ± 11.38) g,高剂量异黄酮组和雌激素组大鼠体重增加量明显低于对照组和低剂量异黄酮组(F=10.535,P < 0.05)。

2.2 大豆异黄酮对去势大鼠脏器系数影响

雌激素组子宫/ 体重比(1.4 ± 0.3)显著高于对照组(0.25 ± 0.1)(F=79.81,P < 0.01)。高剂量异黄酮组和雌激素组动物肝脏系数分别为 (29.2 ± 2.7,29.6 ± 4.4),明显高于低剂量异黄酮组(25.9 ± 4.4)(F=3.82,P < 0.05)。

2.3 大豆异黄酮对去势大鼠血脂和脂蛋白水平影响

在正常膳食下,大豆异黄酮和雌激素组去势雌性大鼠的血清 Chol、TG、LDL-C、HDL-C和FFA水平与对照组比较,差异无统计学意义(P > 0.05)。

2.4 对能量代谢相关激素水平影响(表 2)
表 2 各组大鼠血清ghrelin 和脂联素 水平变化( ng /mL，x±s，n = 7)

与对照组比较,大豆异黄酮和雌激素组去势大鼠血清ghrelin水平明显降低 (F=6.069,P < 0.05),各组大鼠血清脂联素水平未见明显变化(F=3.333,P > 0.05)。

3 讨 论

本研究结果显示摘除双侧卵巢后大鼠体重明显增长,而大豆异黄酮与雌激素可明显延缓去势雌性大鼠体重增长,提示妇女绝经后体内雌激素水平降低可导致体重增加,而大豆异黄酮可延缓雌激素水平降低导致的体重增长,其作用随着大豆异黄酮剂量增加而增加。研究表明,大豆异黄酮对体重影响与食物利用率有关〔2〕,而己烯雌酚比异黄酮更能抑制动物的食物利用率〔4〕。提示去势雌性大鼠体重增长与体内激素水平有一定关系。

Ghrelin是生长激素促分泌物受体的内源性配体,具有很强的促生长激素释放和调节能量与糖代谢等作用〔5〕。大豆异黄酮可降低去卵巢大鼠体重增长,减少食物摄入量,降低 ghrelin和神经肽Y水平〔6〕;降低绝经后妇女血清ghrelin水平〔7〕。也有不同报道,大豆异黄酮对健康绝经期妇女的体重、能量摄入以及ghrelin水平无影响〔8〕。本研究结果表明雌激素和大豆异黄酮可降低大鼠血清ghrelin水平。提示大豆异黄酮可能通过调节ghrelin水平发挥作用,但是ghrelin作用通路及各种异黄酮单体的作用机制有待进一步研究。

大豆异黄酮可降低去卵巢动物高脂膳食模型的血脂和血糖水平〔9〕。但分离大豆异黄酮对健康绝经后妇女的血脂、脂蛋白水平和胰岛素敏感性无影响〔8〕,本研究也未发现其对血脂、脂蛋白、游离脂肪酸和脂联素等水平的影响,推测在正常膳食条件下血脂水平无出现异常时,大豆异黄酮血脂调节作用不明显。

参考文献
〔1〕 Patisaul HB.Phytoestrogen action in the adult and developing brain [J].J Neuroendocrinol,2005,17:57-64.
〔2〕 那晓琳,刘秀梅,陈文华.大豆异黄酮对去卵巢大鼠体重及食物利用率的影响[J].卫生研究,2005,34(4):433-435.
〔3〕 张兴渝,杨刚毅.Ghrelin与能量代谢和肥胖的关系[J].世界华人消化杂志,2005,13(17):2125-2127.
〔4〕 胡建伟,赵晓慧,张玉梅,等.大豆异黄酮对二甲基苯蒽诱导的大鼠乳腺肿瘤发生的影响[J].北京大学学报:医学版,2010,42 (3):288-292.
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〔8〕 Weickert MO,Reimann M,Otto B,et al.Soy isoflavones increase preprandial peptide YY(PYY),but have no effect on ghrelin and body weight in healthy postmenopausal women[J].J Negat Results Biomed,2006,5:11.doi:10.1186/1477-5751-5-11.
〔9〕 张云波,那晓琳,李丽娜,等.大豆异黄酮对去卵巢大鼠血糖及血脂的影响[J].中国公共卫生.2009,25(9):1127-1128.