心脑血管疾病是一种严重威胁人类健康的疾病,据调查,全世界每年死于心脑血管疾病的人数高达1 500万人,居各种死因的首位^〔1〕。有研究表明,高脂血症患者体内氧化应激水平较高可加速动脉粥样硬化的进程,促使心脑血管疾病的发生^{〔2, 3〕}。叶酸是维生素B族中的一种,是体内一碳单位转移酶的辅酶,可参加嘌呤、胸腺嘧啶核苷酸等多种物质的合成,目前已有研究证实叶酸具有抗氧化作用^{〔4, 5〕}。为了解叶酸对高脂血症人群体内氧化应激水平的影响,为高脂血症患者预防心脑血管疾病的发生提供参考依据,本研究于2010年6-7月在云南省云县人民医院体检人群中招募80例高脂血症男性患者,随机分为干预组和对照组进行叶酸干预,分别在干预前、后对2组患者进行体格检查、问卷调查和实验室检测。结果报告如下。

于2010年6-7月,在云南省云县人民医院体检人群中招募80例高脂血症男性患者,随机分为干预组和对照组2组,每组各40例。高脂血症诊断标准^〔6〕:空腹血清中总胆固醇(total cholesterol,TC)>5.17 mmol/L为高胆固醇血症;总甘油三酯(total triglyceride,TG)>2.30 mmol/L为高甘油三酯血症;高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C) < 0.78 mmol/L (男)为低高密度脂蛋白血症;凡具有TC和/或TG升高、HDL-C降低之一者均诊断为高脂血症。所有患者均排除继发性高脂血症、高血压等需要药物维持者,有严重心脑血管疾病、恶性肿瘤等其他严重疾病者和有食物、药物过敏史或过敏体质者。

(1)体格检查:于干预前后分别对研究对象进行体格测量,每次均由同一人测量,每项指标均测量2次,取均值;如2次测量结果相差超过0.5 mm,则再做第3次测量,取2次接近值计算均值。测量指标包括身高、体重、腰围、臀围。体质指数(body mass index,BMI)=体重(kg)/身高²(m²);腰臀围比(waist-to-hip ratio,WHR)=腰围(cm)/臀围(cm)^〔7〕。(2)问卷调查:采用自行设计的调查问卷,由统一培训的调查员进行面访调查。内容包括:年龄、民族、吸烟、饮酒等一般情况和膳食调查。膳食调查采用食物频率法^〔8〕对研究对象每日摄取的食物种类和摄入量进行调查。(3)实验室检测:研究对象禁食10~12 h后,次日清晨采集2管各3 mL空腹静脉血。一管送云县人民医院检验科进行TC、TG、HDL-C、低密度脂蛋白-胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDLC)、血糖(glucose,GLU)、总蛋白(total protein,TP)、白蛋白(albumin,ALB)、球蛋白(globulin,GLO)、尿酸(uric acid,UA)、叶酸等指标的检测;另一管送云县人民医院检验科实验室离心2 000 r/min × 15 min,分离血清存于-20℃冰箱中,用于8-异前列腺素(8-isoprostane,8-iso-PG)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、总抗氧化能力(total antioxidative capability,T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSHPx)等氧化应激指标的检测。主要仪器与试剂:ELX800酶标仪(美国宝特公司);7080全自动生化仪(日本日立公司);Access2型全自动分析仪(美国贝克曼公司);GF-D800型半自动生化分析仪(山东高密彩虹分析仪器有限公司);TC、TG、HDL-C、LDL-C、GLU、TP、ALB、GLO、UA、叶酸试剂盒(四川迈克科技有限责任公司);8-iso-PG、MDA、T-AOC、GSH-Px试剂盒(南京建成生物工程研究所)。所有检测方法均按试剂盒说明进行操作。(4)干预方法:干预组患者口服叶酸2.5 mg/d,叶酸片(纯度为100%)由医院药房开出,干预时间为3个月;对照组不给予任何药物进行干预。

采用SPSS 16.0软件进行χ²检验、t检验、秩和检验和相关分析;日均营养素摄入量采用中国疾病预防控制中心提供的的营养计算软件(2.1版)进行计算。

40例干预组患者年龄为30~60岁,平均年龄(44.85 ± 7.31)岁;其中汉族27例,占67.5%;吸烟者21例,占52.5%;饮酒者25例,占62.5%;BMI平均值为(25.40 ± 3.50) kg/m²;WHR平均值为(0.90 ± 0.05)。40例对照组患者年龄为30~58岁,平均年龄为(44.58 ± 7.04)岁;其中汉族26例,占65.0%;吸烟者22例,占55.0%;饮酒者20例,占50.0%;BMI平均值为(24.57 ± 3.61) kg/m²;WHR平均值为(0.90 ± 0.06)。2组患者年龄、民族、BMI、WHR、吸烟、饮酒情况比较,差异均无统计学意义(P > 0.05)。

干预前、后比较,2组患者能量、蛋白质、脂肪、碳水化合物、膳食纤维、视黄醇当量、硫胺素、核黄素、叶酸、维生素C和维生素E等膳食营养素日平均摄入量差异均无统计学意义(P > 0.05)。

表 1

表 1 不同组别干预前、后膳食营养素日平均摄入情况比较(x±s)

表 1 不同组别干预前、后膳食营养素日平均摄入情况比较(x±s)

干预前,干预组患者TC、TG、HDL-C、LDL-C、GLU、TP、A/G (ALU/GLO)、UA水平分别为(5.76 ± 1.12)、(2.55 ± 1.97)、(1.44 ± 0.29)、(3.25 ± 0.60)、(4.73 ± 4.42) mmol/L、(78.80 ± 3.58) g/L、(1.42 ± 0.20)、(376.02 ± 101.07)μmol/L,与对照组的(5.69 ± 0.72)、(2.53 ± 1.69)、(1.33 ± 0.30)、(3.09 ± 0.54)、(4.43 ± 4.07) mmol/L、(77.43 ± 4.74) g/L、(1.46 ± 0.18)、(370.20 ± 90.01)μmol/L比较,差异均无统计学意义(P > 0.05)。干预后,干预组患者TC、TG、HDL-C、LDL-C、GLU、TP、A/G (ALU/GLO)、UA水平分别为(5.46 ± 0.74)、(2.32 ± 1.39)、(1.40 ± 0.23)、(3.01 ± 0.74)、(4.33 ± 3.92) mmol/L、(73.12 ± 4.77) g/L、(1.47 ± 0.18)、(369.92 ± 95.37)μmol/L,与对照组的(5.18 ± 0.75)、(2.45 ± 1.71)、(1.35 ± 0.27)、(2.84 ± 0.70)、(3.90 ± 3.70) mmol/L、(71.58±3.57) g/L、(1.53 ± 0.22)、(362.15 ± 78.26)μmol/L比较,差异均无统计学意义(P > 0.05)。

干预前,2组患者血清8-iso-PG、MDA、T-AOC、GSHPx、叶酸等指标水平差异均无统计学意义(P > 0.05);干预后,干预组患者血清T-AOC和叶酸水平均高于对照组患者(P < 0.05),血清MDA水平低于对照组患者(t=-5.995,P < 0.001),血清8-iso-PG和GSH-Px水平2组间差异无统计学意义(P > 0.05)。

表 2

表 2 不同组别干预前、后血清叶酸含量及氧化应激指标比较

表 2 不同组别干预前、后血清叶酸含量及氧化应激指标比较

相关分析结果表明,血清叶酸浓度与血清MDA水平呈负相关关系(r=-0.536,P<0.001),与血清T-AOC水平呈正相关关系(r=0.239,P=0.033),与血清8-iso-PG、GSH-Px水平均无相关关系(P > 0.05)。

氧化应激是人体内的一种基本保护机制,但是当氧化和抗氧化这种平衡被打破以后,过量的自由基就会引起脂蛋白、脂质、DNA、蛋白质等生物大分子氧化,致使细胞损伤、病变或凋亡,进而组织损伤,疾病发生。MDA是自由基攻击生物膜中多不饱和脂肪酸,产生的脂质过氧化产物;8-iso-PG是细胞生物膜的花生四烯酸经自由基脂质过氧化作用后的特异性产物;T-AOC反映了机体抗氧化防御体系(包括酶促与非酶促两个体系)的抗氧化能力;GSH-Px是机体主要的抗氧化酶^{〔9, 10〕}。本次研究结果表明,与对照组比较,干预组患者进行叶酸干预后MDA水平明显降低,T-AOC水平明显升高,提示叶酸可明显降低高脂血症患者体内的MDA水平,升高TAOC水平;相关分析结果表明,血清叶酸水平与MDA浓度呈负相关关系,与T-AOC水平呈正相关关系,提示叶酸可抑制脂质过氧化,改善机体的抗氧化防御体系,具有降低氧化应激水平的作用。本研究中,叶酸对8-iso-PG和GSH-Px水平均无明显影响,这可能与干预时间较短,短期内叶酸对8-iso-PG和GSH-Px的影响尚未体现有关,也可能与叶酸干预剂量相对较低有关,但具体机制目前尚不清楚,还需进一步深入研究。本研究结果还表明,干预组患者进行叶酸干预后,血脂、血糖等生化指标水平与对照组比较无明显差异,与Racek等^〔11〕研究结果一致,提示叶酸并未影响高脂血症患者体内的血脂、血糖水平。