近年研究发现,酶解后的蛋白质会产生一些无毒副作用、安全可靠、具有广泛生物学活性的多肽,已成为当前国内外研究热点之一^{〔1, 2, 3, 4, 5〕}。小米是中国北方地区主要的杂粮作物之一。虽然种植面积高于其他杂粮,但是其深加工程度较低^〔6〕。小米营养丰富,含有多种维生素、脂肪、糖类及钙、磷、铁等人体所必需的营养物质,其中蛋白含量较高,占干重的9.7%左右,是一种良好的蛋白质来源,可经过酶解制备功能性多肽,这对于提高小米的综合利用率,充分利用小米资源具有重要的意义。目前国内外有关小米多肽制备和功能研究的报道较少,通过前期研究结果表明,小米多肽具有较好的抗氧化性^〔7〕,在此基础上,本次实验研究小米多肽抗疲劳作用,从而为小米多肽的研究与开发提供理论基础和实验依据。

实验室自制小米多肽^〔7〕。健康昆明种小鼠120只,雌、雄各半〔中国医科大学实验动物中心,动物合格证号:SCXK(辽)2003-0009〕,体重(22±2)g,常规喂养,观察1周后使用。血尿素氮(BUN)试剂盒(南京建成生物工程研究所);其他试剂为国产分析纯。

健康小鼠120只,随机分为3组,分别进行3个指标测定,每组分为4个小组,即正常对照组、小米多肽低、中、高剂量组。小米多肽低、中、高剂量组每天分别按0.2、0.4、0.8g/(kg·d)灌胃;空白对照组用等量蒸馏水灌胃,灌胃量为0.1mL/10g。灌胃30d后,进行抗疲劳指标测定。

(1)负重游泳实验^〔8〕:末次给予受试样品30min后,置小鼠在游泳箱中游泳。记录小鼠自游泳开始至死亡的时间,即为小鼠负重游泳时间(min)。(2)肝糖原测定^〔8〕:蒽酮法测定糖原含量。(3)血清尿素测定^〔8〕:血尿素氮试剂盒法测定血清尿素氮(BUN)含量。

采用SPSS 11.5软件进行t检验,实验数据以x ± s表示。

结果表明,与对照组比较,小米多肽各剂量组明显延长小鼠的游泳时间。低、中、高剂量组比空白对照组的小鼠游泳时间分别增加了1.64,4.45和10.51min,且中、高剂量组与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01)。

结果表明,与对照组比较,中、高剂量组小鼠口服小米多肽后,小鼠肝糖原储备明显增加(P＜0.01)。

结果表明,与对照组比较,小米多肽各剂量组的血尿素氮含量浓度均有所降低,低剂量组与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),中、高剂量组与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01)。

表 1

表 1 小米多肽对小鼠负重游泳时间、肝糖原和血清尿素氮影响(x ± s)

表 1 小米多肽对小鼠负重游泳时间、肝糖原和血清尿素氮影响(x ± s)

疲劳是涉及许多生理生化因素的综合性生理过程,是人体脑力或体力活动到一定阶段时必然出现的一种正常的生理现象^〔9〕。疲劳的产生是多方面的,乳酸积累、糖原不足、能源物质的消耗是产生疲劳的重要原因。小鼠游泳时间、肝糖原储备量、血清尿素氮含量等是评价受试物是否具有抗疲劳作用的客观指标^〔10〕。负重游泳实验是观察动物抗疲劳能力的公认观察指标。本实验结果表明,小米多肽可以延长小鼠的运动时间;另外通过肝糖原和血清尿素氮的测定,小米多肽组能明显增加小鼠体内肝糖原含量,减少运动过程中的血清尿素氮含量,表明小米多肽可提高受试动物运动耐力和影响疲劳有关生理生化指标,从而表现出抗疲劳作用,且具有明显的剂量-效应关系。因此,小米多肽具有良好的抗疲劳作用,其抗疲劳作用的主要机制还有待于进一步研究。