重金属铅(lead) 是一种普遍存在的环境神经毒物，可在神经组织中蓄积，引起神经系统功能(主要是学习记忆功能) 的长期损害^{〔1, 2〕}。随着社会经济发展，特别是汽车保有量迅速增加，使得环境中的铅负荷不断上升，铅对人体健康造成的损害，特别是对脑发育的影响备受关注。环境中铅可通过血脑屏障进入脑中，产生脑损伤^〔3〕，然而，铅致人体脑损伤及学习记忆障碍确切机制尚不完全清楚。本研究通过测定不同剂量染铅大鼠大脑皮层乙酰胆碱酯酶(AChE) 活性，为阐明铅对脑发育的影响及铅的神经毒性机制提供依据。

选用刚断乳Wistar 大鼠(中国医科大学实验动物中心) 20 只，许可证号: SYXK(辽) 2008-0005。动物饲养环境: 温度20 ～ 25 ℃，相对湿度(50 ± 10) %。实验前动物适应性喂养7 d。

AChE 测定试剂盒(南京建成生物工程研究所) 。Morris 水迷宫(上海吉量软件科技有限公司) 。 醋酸铅溶液及其他试剂均为国产分析纯。

将20 只大鼠随机分为对照组，低、中、高剂量染铅组，每组5 只。对照组饮用蒸馏水，低、中、高剂量染铅组分别饮用0.5、2、5 mmol /L 醋酸铅溶液，连续4 周，建立动物模型。

于染毒3 ～ 4 周，大鼠开始进行被动回避反应(passive avoiding response，PAR) 训练，每组训练7 次，训练时间间隔平均1. 28 ～ 1. 43 d，求出各组每次平均值，观察记录其记忆保持时间。将大鼠放入测试装置中，让其自由行走，当大鼠发现黑洞时，本能地钻入洞中，每当其钻入洞中时，则通过电击和强光使其受惊而逃出洞口。每间隔1 ～ 2 d 重复该过程1 次。经数次后，不同浓度铅处理大鼠对洞口产生不同程度的恐惧性记忆。当将其再放入此装置时，产生记忆较强的大鼠即不再钻入洞口或停留较长时间再钻入洞口，而产生记忆较弱的则停留较短时间即钻入洞口。 由此观察对照组和不同浓度铅暴露组大鼠记忆形成和保持时间(s) 差异，从而判断不同浓度铅对大鼠记忆影响。

大鼠染毒结束后进行脑组织匀浆的制备，快速断头处死动物，取大脑皮层组织匀浆，离心后取上清液备用。按照试剂盒说明书方法测定大鼠大脑AChE 活性。

应用SPSS 10.0 统计软件进行统计分析，组间比较采用方差分析，两两比较采用最小显著差法，检验水准α = 0.05。

对照组及低、中、高剂量染铅组AChE 活性分别为(1.77 ± 0.58) 、(1.52 ± 0.22) 、 (0.78 ± 0.34) 、(0.53 ± 0.86) μmol /L。与对照组比较，低剂量组AChE 活性无明显变化(P ＞ 0.05 ) ，而中、高剂量组 AChE 活性明显下降(P ＜ 0.05) 。可见大鼠大脑AChE 活性，随染铅剂量的增加而降低，呈剂量－效应关系。

表 1

表 1 不同浓度铅暴露的小鼠记忆保持时间(x±s，s)

表 1 不同浓度铅暴露的小鼠记忆保持时间(x±s，s)

在初期训练中，低浓度铅暴露组的记忆保持时间略高于对照组，而高浓度铅暴露组的记忆保持时间则低于对照组。但在训练后期 (第5、6、7 次) 高浓度组记忆保持时间均明显低于对照组(P ＜ 0.05) 。

本实验中大鼠记忆行为学测试实验(被动回避反应) 比较直观地反映了大鼠记忆与暴露醋酸铅浓度的关系。实验结果显示，各组大鼠记忆时间随训练次数增加而增加。铅对脑组织的直接作用与铅在脑中的蓄积相关联^〔4〕。铅的蓄积必然引起脑组织出现相应的生物化学改变，本研究发现高剂量染铅可以使脑中AChE 活性降低，脑中神经递质的稳定性影响人类正常的学习功能和行为的变化^〔5〕。乙酰胆碱是胆碱能神经递质，在中枢神经系统内由中枢胆碱能神经末梢释放，是中枢神经重要的递质之一。乙酰胆碱酯酶对乙酰胆碱的水解，是乙酰胆碱酶促水解的最重要途径。乙酰胆碱参与学习记忆，对觉醒和睡眠、摄食和饮水以及体温调节等有着重要的生理功能。本研究提示醋酸铅具有中枢神经毒性，铅致大鼠学习记忆能力损伤机制与大鼠脑组织中AChE 活性改变有关。