近年来，频发的酒后交通事故日渐引起人们对饮酒的重新审视，虽然长期过量饮酒会造成人体胃肠、脑、肝、心等各器官的毒性作用，对机体影响是多系统的，但胃是酒精首当其冲的承接者，而且酒后交通事故引发的出血性休克可造成体内血液的重新分布，引起不同程度的胃组织缺血损伤。胃肠道黏膜是人和动物体内最易受损的器官之一^{〔1, 2〕}，本实验研究饮酒对大鼠缺血再灌注胃黏膜损伤的影响，旨在探讨慢性饮酒对胃黏膜损伤与修复的影响，为进一步探讨酒精对创伤后组织器官的影响作用提供依据。

丙二醛(malondialdehyde，MDA) 、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD) 试剂盒(南京建成生物工程研究所) ，缺口末端标记法(TUNEL) 原位凋亡检测试剂盒 (美国CHEMICON 公司) 。

成年健康SD 大鼠(徐州医学院实验动物中心) ，体重200 ～ 250 g，雄性。实验前禁食24 h，自由饮水。

将动物随机分为6 组，每组6 只。假手术组，开腹后仅分离腹腔动脉而不夹闭; 饮酒假手术组; 胃缺血再灌注1、2 h 组; 饮酒胃缺血再灌注1、2 h 组。大鼠胃缺血再灌注模型制备^〔3〕: 采用无创伤血管夹夹闭腹腔动脉30 min，去除动脉夹恢复血流，于再灌注后1 或2 h 处死动物，快速取材并观察胃黏膜损伤指数。慢性饮酒大鼠模型制备: 参照文献〔4〕。记录胃黏膜损伤指数，一部分胃刮取胃黏膜置于-80 ℃冰箱保存备用，另一部分胃固定于10%的中性福尔马林作常规石蜡切片。

参照文献〔5〕方法，以局限于胃上皮的点状糜烂、溃疡和出血灶的长度累积计分，每组大鼠损伤分数的平均值为损伤指数。

分别采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥法，严格按照说明书操作。

采用TUNEL 法检测。高倍镜 (40 × ) 视野下观察10 个视野，计数凋亡阳性细胞，并计算凋亡率，凋亡率=凋亡细胞数目/总细胞数目× 100%。

验数据应用SPSS 13.0 软件进行统计学处理，2 组比较采用t 检验，组间比较采用单因素方差分析，以 P ＜ 0.05 为差异有统计学意义。

表 1

表 1 饮酒对大鼠缺血再灌注后胃黏膜损伤及 细胞凋亡影响(x±s，n = 6)

表 1 饮酒对大鼠缺血再灌注后胃黏膜损伤及 细胞凋亡影响(x±s，n = 6)

正常大鼠胃黏膜组织上皮层、黏膜下层与腺区散在分布一些凋亡阳性细胞; 胃缺血再灌注后，胃黏膜细胞凋亡率明显升高，并密集分布于黏膜上皮层和腺区。与假手术组比较，饮酒假手术组胃黏膜损伤指数与细胞凋亡率明显升高 (P ＜ 0.05) ; 饮酒与未饮酒大鼠胃缺血再灌注后均引起胃黏膜损伤指数与细胞凋亡率升高。与缺血再灌注1 h 组比较，饮酒缺血再灌注1 h 组大鼠并未明显加重胃黏膜损伤(P ＞ 0.05) ; 缺血再灌注1 h 时胃黏膜损伤及细胞凋亡率较高，随着再灌注时间延长至2 h，在机体自身修复作用下，胃黏膜凋亡率有所下降(P ＜ 0.05) ，但饮酒大鼠再灌注2 h 后胃黏膜损伤减轻不明显(P ＞ 0.05) 。

表 2

表 2 胃黏膜MDA 含量和SOD 活性变化(x±s，n = 6)

表 2 胃黏膜MDA 含量和SOD 活性变化(x±s，n = 6)

与假手术组比较，饮酒假手术组胃黏膜内MDA 含量未明显升高(P ＞ 0.05) ，而SOD 活性明显降低(P ＜ 0.05) ，所有缺血再灌注大鼠胃黏膜内MDA 含量明显升高、SOD 活性明显降低(P ＜ 0.05) ; 与缺血再灌注1 h 组比较，缺血再灌注2 h 组大鼠胃黏膜组织中MDA 含量降低、SOD 活性升高(P ＜ 0.05) ，饮酒缺血再灌注1、2 h 组胃黏膜内MDA 含量及SOD 活性与缺血再灌注1 h 组比较无明显差异(P ＞ 0.05) 。

本研究结果表明，正常健康大鼠长期饮酒后，胃黏膜损伤指数增加，证明乙醇可直接对胃黏膜产生一定的刺激损伤。 虽然有研究认为低浓度酒精可提高胃黏膜前列腺素水平进而保护胃黏膜^〔5〕，但长期过量饮酒却可以引起胃黏膜的损伤。 胃缺血再灌注可以引起黏膜损伤^〔6〕，但缺血后再灌注2 h 与再灌注1 h 比较，胃黏膜损伤指数与细胞凋亡率明显降低，说明恢复血液灌流后，随着时间延长，机体在逐渐修复损伤。饮酒可以直接损伤胃黏膜，虽然本研究饮酒组大鼠经历胃缺血再灌注1 h 后损伤并未明显加重，但饮酒大鼠再灌注2 h 与再灌注1 h 组比较，胃黏膜损伤指数及细胞凋亡率无明显降低，表明乙醇减弱了胃黏膜的损伤修复机能。

结果显示，饮酒大鼠胃黏膜SOD 活性较未饮酒大鼠明显下降。器官的再灌注损伤主要也是一种氧化应激反应^{〔7, 8〕}，缺血再灌注1 h 后胃黏膜SOD 活性明显降低，脂质过氧化水平(MDA) 明显升高，随着再灌注时间延长至2 h，SOD 活性又有所升高，MDA 明显降低。然而，饮酒大鼠再灌注2 h 时胃黏膜SOD 活性与MDA 水平无明显变化。由此可见，长期过量饮酒可导致具有清除自由基作用的SOD 活性下降，进一步加剧机体内氧化和抗氧化平衡失调，脂质过氧化产物含量升高，使机体自身修复损伤能力降低。