菊苣(Herba Cichorii)为清热利湿、健脾药物。大量的动物实验及临床观察表明其具有降低血糖、血脂,对糖尿病及其并发症具有一定的防治作用^〔1〕。本研究观察了菊苣多糖对实验性链尿菌素糖尿病肾病大鼠肾脏病理改变和Na⁺/K⁺-ATPase活性的影响,旨在探讨菊苣多糖对链尿菌素糖尿病肾病大鼠的肾脏保护作用及可能的作用机制。

8周龄清洁级SD大鼠30只,雌雄各半,体重190~210 g (沈阳医学院实验动物中心)。实验动物许可证为辽宁省科学技术厅签发,许可证号:SCXK (辽)2003-0016。饲料为繁育鼠全价固体颗粒饲料(沈阳市于洪区前民动物饲料厂)。

链尿菌素(美国Sigma公司);Na⁺/K⁺-ATPase测试盒(南京建成生物工程研究所);菊苣多糖(辽宁省基础医学研究所药物研究室),在实验室用蒸馏水配制成所需浓度的药液应用。

三诺SXT-1快速血糖测试仪及快速血糖测试条(长沙三诺生物传感技术有限公司);UV-265FW紫外分光光度计(日本光电工业株式会社);HF328-U86深冻冰箱(北京力康生物医疗科技控股有限公司)。

应用链尿菌素腹腔注射制作大鼠糖尿病模型。应用0.01 mol/L棕檬酸缓冲液(pH5.0)配制浓度为12.2 mg/mL的链尿菌素,链尿菌素注射量为55 mg/Kg体重。链尿菌素注射1周后检查其血糖,血糖水平超过16.0 mmol/L的大鼠被随机分为2组、每组10只、雌雄各半,分别为菊苣多糖组和糖尿病对照组。菊苣多糖组每天灌胃给予菊苣多糖5 g/kg;糖尿病对照组大鼠每天同样体积生理盐水灌胃,灌胃体积各组均为10 m l/kg体重。另取10只大鼠、雌雄各半作为正常(空白)对照组,应用与注射链尿菌素同样体积的0.01mol/L棕檬酸缓冲液(pH 5.0)对该大鼠腹腔注射,并每天以同样体积生理盐水灌胃。所有大鼠均饲以常规动物饲料和水。连续给药10周后各组大鼠尾静脉取血,用三诺SXT-1快速血糖测试仪检测空腹血糖。12周后取左肾,10%中性福尔马林固定,切片苏木素-伊红(HE)染色病理学检查。取右肾,生理盐水10%肾组织匀浆,3 000 r/m in离心15 m in,取上清液。按照说明书检测肾组织Na⁺/K⁺-ATPase活性。

实验数据以 x±s表示,采用SPSS 12.0软件进行统计分析,2组间比较t检验。

肾脏病理观察可见糖尿病肾病对照组大鼠腹腔均有程度不同的腹水,肾脏外观较正常对照组色泽变浅,质地变硬。光镜下可见肾小球肿胀、充血,基底膜增厚,系膜细胞增生,系膜增厚,肾小囊囊腔变小;肾小管内可见蛋白管型,肾小管上皮细胞广泛存在空泡样变性并有部分脱落;肾间质可见炎性细胞浸润及纤维化,部分小血管玻璃样变性。菊苣多糖干预组10只大鼠中2只有少量腹水,其他病理变化也较糖尿病肾病对照组明显减轻。正常对照组大鼠未见异常病理改变。

表 1

表 1 菊苣多糖对STZ糖尿病大鼠血糖及肾组织Na+/K+-ATPase活性的影响

表 1 菊苣多糖对STZ糖尿病大鼠血糖及肾组织Na+/K+-ATPase活性的影响

糖尿病肾病对照组大鼠空腹血糖高于正常对照组,肾组织Na⁺/K⁺-ATPase活性低于正常对照组;菊苣多糖干预组大鼠空腹血糖低于糖尿病肾病对照组,肾组织Na⁺/K⁺-AT-Pase活性高于糖尿病肾病对照组。

糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是指由糖尿病微血管病变导致肾小球硬化的一种肾脏疾病,又称糖尿病肾小球硬化症。DN是糖尿病最常见的微血管并发症之一,也是糖尿病患者的主要死亡原因之一。DN晚期的肾小球硬化与早期肾细胞过度增殖密切相关^{〔2, 3, 4〕}。本实验表明菊苣多糖干预对DN肾脏的病理变化有明显的治疗作用。Na⁺/K⁺-AT-Pase是生物膜上的一种蛋白酶,它在物质转运、能量转换及信息传递具有重要意义,DN大鼠肾脏组织Na⁺/K⁺-ATPase活性明显降低,菊苣多糖干预可提高DN大鼠肾脏组织Na⁺/K⁺-ATPase活性,改善肾脏组织细胞的机能状态,这可能是菊苣多糖保护肾脏的机制之一。