清洁级昆明种初成年小鼠 64只 ( 山东大学 实验动物中心 ),体重 20~ 25g,雌雄各半。

UV-2450型紫外可见分光光度计 (日本岛 津公司 ); 万分之一电子天平 ER-182A (日本 A&D 公司 ); 台 式离心机 (上海安亭科学仪器厂 ); BPO (分析纯,天津市大茂 化学试剂厂 ),与食用油配成混悬液,现用现配; SOD、M DA、 GSH-Px、AT P酶试剂盒 (南京建成生物工程研究所 )。

将小鼠按体重随机分为 4组,每组 16只,雌雄各半,分笼饲养。 BPO 低、中、高 3个剂量组和对 照组,灌胃给予 BPO 50、 100 和 200 mg /kg; 对照组食用油灌 胃。 灌胃体积 0.05 m l/ ( 10 g.bw ),连续 6 周,灌胃前禁食 6 h ,自由饮水。 各组小鼠最后 1次灌胃 24 h后处死,取肝脏, 计算脏器系数,制成匀浆,待测。

称取肝脏,用 4℃ 生 理盐水稀释制成 10% 匀浆,3 000 r /m in离心 15 m in ,取上清 液用生理盐水分别稀释成 0.5% ,1 % ,2% 匀浆。 0.5% 匀浆 用于测定 GSH-Px活力,1 % 匀浆用于测定 SOD活力,2 % 匀浆 用于测定总蛋白,10 % 匀浆用于测定 MDA 含量及 ATP酶活 力。 具体操作严格按照试剂盒说明书进行。

采用 SPSS 16.0 软件进行分析。 多组均数 比较采用单因素方差分析,采用最小显著差法 ( LSD ) 进行多 个样本均数间的两两比较。

实验期间小鼠体重无明显变化,BPO 组与对 照组小鼠体重比较差异无统计学意义 (P > 0.05)。 实验结束 时,BPO组小鼠肝脏重量、肝脏脏器系数与对照组比较差异均 无统计学意义 (P > 0.05)。

中、高剂量组 SOD活力明显降低 (P < 0.05或 P < 0.01) 。 BPO组 MDA含量有所升高,且高剂量组与对照组比较差异有统计学 意义 ( P < 0.05)。 BPO各组与对照组比较,GSH-Px活力差异 均无统计学意义 (P > 0.05)。

表 1

表 1 肝脏中 GSH-Px、 SOD 活力和 M DA含量 (x±s )

表 1 肝脏中 GSH-Px、 SOD 活力和 M DA含量 (x±s )

与对照组比较,高剂量组 Mg²⁺ - ATP 活力下降,差 异有统计学意义 (P < 0.05)。 高剂量组 Ca²⁺ - ATP活力与对 照组比较明显降低 ( P < 0.05) ,其余各组与对照组比较差异 无统计学意义 (P > 0.05)。

表 2

表 2 肝脏中 Na+ K+ 、Mg2+ 、Ca2+ - ATP 酶活力 〔μmolPi/ ( mg.prot), x±s 〕

表 2 肝脏中 Na+ K+ 、Mg2+ 、Ca2+ - ATP 酶活力 〔μmolPi/ ( mg.prot), x±s 〕

长期以来,面粉生产行业一直使用增白剂。 面粉是主食 品,人们每天或多或少均食用面制品,因此,面粉增白剂在体 内代谢时能否对肝脏产生影响日益成为关注焦点。 本实验结 果表明,小鼠肝脏组织中 SOD 活力降低,MDA 含量上升, Ca²⁺ - ATP Mg²⁺ - ATP酶活力降低。 其机制可能是 BPO 具 有强氧化性,在肝脏内代谢时氧化细胞膜中的维生素 E等抗 氧化物质 ^〔4〕,同时 BPO也可降低 SOD活力 ^〔5〕,导致过量的自 由基不能清除,引发肝细胞氧化应激,导致脂质过氧化并产生 大量的代谢产物 MDA。 这与 Saleem 等 ^〔6〕人发现 BPO能够消 耗细胞膜和细胞质中的抗氧化物质导致人角蛋白细胞脂质过 氧化具有一致性。 张荣芳等 ^〔7〕 发现氧自由基过度产生是 ATP酶活性降低的主要因素。 大量的自由基与钙调蛋白 ( CaM )结合,使该蛋白结构改变 ^〔8〕,从而抑制 CaM 激活的 Ca²⁺ - ATP、Mg²⁺ - ATP酶的活力 ^〔9〕。 Ca² - ATP、Mg²⁺ - ATP酶活 力降低,使跨膜转运受阻细胞内钙离子增加,导致肝细胞损伤。 并且 ATP酶活力降低和活性氧的过度产生有交互影响^〔10〕,可 能进行性加剧生化反应紊乱,直致细胞死亡。 肝脏中 GSH-Px 活力变化不明显,可能是其在组织氧化性损伤过程中不明显或 者机体具有一定的代偿能力,有待进一步研究。