动脉粥样硬化(AS)斑块不稳定性增加是急性心脑血管事件的主要病理基础,近年来中药复方丹参滴丸对冠心病的治疗受到广泛重视^{〔1, 2〕},但是复方丹参滴丸对动脉粥样硬化斑块形成的影响相关研究较少。本研究通过建立实验性动脉粥样硬化动物模型的方法,应用超声技术结合病理学观察中药复方丹参滴丸对动脉粥样硬化的作用,为相关研究提供科学依据。现将结果报告如下。

(1)实验动物:雄性纯种新西兰大白兔30只(山东省农科院,合格证号:cxk齿20040013),体重1.5~ 2.5kg。(2)动物分组与处理:30只大白兔用球囊拉伤腹主动脉建立实验性动脉粥样硬化动物模型,处理方法和造模成功标准参照文献〔3〕。饲以高胆固醇饲料(1%胆固醇、5%蛋黄、5%猪油、89%普通饲料),每只每天剂量为120 g;12周后,3组均改为普通饲料,把动物随机分为自然变化组、小剂量和大剂量复方丹参滴丸组,每组均为10只。小剂量和大剂量复方丹参滴丸组每天分别给予复方丹参滴丸(天津天士力公司,产品批号:20050108)5,10粒灌胃(均为滴丸,不足10粒者以淀粉做成滴丸形状补足),自然变化组以安慰剂治疗 (以淀粉做成滴丸形状每天10粒灌胃),均持续12周。(3)超声检查:应用H PSonos 7500型彩色多普勒超声血流显像仪 (美国HP公司)分别于实验开始、12周末和24周末在麻醉状态下检测腹主动脉内中膜厚度(IMT)、舒张末期内径(Dd)、收缩末期内径(Ds)和腹主动脉血流峰值速度(Vp),周围血管探头频率为4~10 MHz。调整仪器进入声学密度定量 (AD)检测状态,测定图像平均回声强度(AII),将内中膜平均回声强度(A II-I)与外膜平均回声强度(A II-A)的比值作为内中膜校正的AD值(AIIc%)。(4)病理学检查:24周末,处死动物,常规固定,进行石蜡和冰冻包埋,切片进行苏木素-伊红(H-E)和油红O染色。(5)统计分析:应用SPSS 13.0软件进行配对t检验、单因素方差分析最小显著差异法(LSD)-t检验。

(1)基本情况:整个实验过程中有5只新西兰大白兔意外死亡,其中进行球囊拉伤手术时死亡2只,术后感染死亡2只,麻醉意外死亡1只。最后自然变化组、小剂量和大剂量复方丹参滴丸组分别有大白兔8,8,9只。(2)腹主动脉超声检查(表 1):造膜前大白兔腹主动脉IMT、Dd、Ds、Vp分别为(0.32±0.06),(2.89±0.26),(3.00±0.22) mm,(80.9±9.5) mm/s比较,造模后均明显增大(P < 0.01),而内中膜校正AD值(A IIc%)造模后为(0.63±0.06),较造模前 (0.78±0.05)明显降低(P < 0.01),提示球囊拉伤造模成功。 24周末与自然变化组比较,大、小剂量复方丹参滴丸组IMT明显减小,A IIc%明显增大(P < 0.05)。(3)病理学检查:HE染色结果显示,自然变化组斑块较大,纤维帽比较薄,大、小剂量复方丹参滴丸组斑块较小,纤维帽比较厚;油红O染色结果显示,自然变化组斑块内脂质含量丰富,而复方丹参滴丸治疗组斑块内脂质含量减少,平滑肌和外膜不着色。

表 1

表 1 各组大白兔腹主动脉超声检测结果比较(x±s)

表 1 各组大白兔腹主动脉超声检测结果比较(x±s)

有研究发现,丹参可以抑制兔动脉平滑肌细胞增殖和去皮后的血管内膜增生^〔1〕。本实验结果证实,随剂量增加,复方丹参滴丸可减少腹主动脉内膜中层厚度,一定程度上延缓动脉粥样硬化的发生和进展。AD技术通过反映组织的声学特征,识别组织的结构信息。成模后血管斑块组织中富含脂质成分^〔4〕,故A IIc%降低;应用复方丹参滴丸治疗后血管内膜中脂质含量减少,胶原含量增加,A IIc%增加,相应的组织病理学检测结果也进一步证实,不同干预组斑块内脂质沉积量不同。此外,复方丹参滴丸治疗后腹主动脉血流速度明显降低,斑块表面所受切应力因此而减小,降低了外来的致斑块不稳定因素。因此,复方丹参滴丸通过减少斑块内脂质沉积和斑块表面的血流切应力稳定动脉粥样硬化斑块,具有较高的临床推广应用价值。