2. 吉林医药学院生物化学教研室;
3. 吉林医药学院实验中心电镜室
研究表明,超过一定能量的微波,尤其是高功率微波可引起机体的神经、生殖等多系统的改变〔1, 2〕。因此,这种新出现的致伤因素-高功率微波(high power microwave,HPM)已引起国内外学者日益关注,大量动物实验研究发现,心脏和肝脏是高功率微波辐射的敏感器官〔3, 4〕。为此,本研究采用100 mW/cm2高功率微波(HPM)辐射大鼠,通过透射电镜观察微波辐射后不同时间点大鼠心肌和肝超微结构变化,分析HPM辐射后大鼠心肌和肝损伤特点、损伤和恢复的时间效应及变化规律,从而为HPM所致的损伤与防护提供病理形态学依据。
1 材料与方法1.1 仪器与试剂日立H7650型透射电镜(日本日立公司);戊二醛(上海国药集团化学试剂有限公司,纯度为25%)。
1.2 实验动物清洁级成年W istar大鼠36只(吉林大学白求恩医学院动物实验中心,SCXK-吉2008-0005),雌雄各半,体重(200±20) g。
1.3 动物分组与处理36只大鼠随机分为空白对照组、微波辐射组,每组18只,雌雄各半,各组大鼠平行饲养,适应性喂养1周后进行实验。微波辐射装置为雷达发射机改装的大功率脉冲微波辐射发射源,出口天线为矩形喇叭天线,峰值功率2 mW。辐射大鼠时,将大鼠置入自制有机玻璃盒内,不含金属物质矩形喇叭天线置于被照大鼠的正上方,辐射参考点为大鼠背部体表,电磁波电场方向与大鼠的长轴平行。辐射强度100 mW/cm2,辐射时间6 min。辐射时,环境温度为(24.0±0.5)℃,相对湿度为(74±1)%。空白对照组与微波辐射组于辐射后1,7和14 d同时处死,每次每组处死6只,冰浴下迅速取出心脏、肝,并取小块心肌的心尖部和肝右叶组织,立即以4%戊二醛固定,进行常规透射电镜(TEM)标本制备,透射电镜下观察其超微结构病理改变。
2 结 果2.1 实验动物数量分析
实验过程中36只大鼠无动物意外死亡或其他原因导致的动物脱失,全部完成实验分析。
2.2 心肌超微结构观察(图 1)![]() | 图 1 微波辐射后1, 7, 14 d大鼠心肌超微组织结构变化 |
空白对照组:核染色质分布均匀;心肌细胞内肌丝排列整齐且紧密,横纹清晰可见,肌小节完整,闰盘较完整;线粒体和糖原颗粒丰富,线粒体排列较为规则,呈圆形、椭圆形或长杆状,嵴清晰可见。微波辐射组:100 mW/cm2辐射后1 d大鼠线粒体和肌丝排列不紧密,有的紊乱,肌小节长短不一、粗细不均,横纹模糊,肌丝明暗带不清晰,部分肌丝溶解、断裂。线粒体数量减少且形态异常,大部分线粒体溶解空化,基质明显肿胀。100 mW/cm2辐射后7 d大鼠心肌细胞内仍可见线粒体形态异常,溶解空化,基质肿胀,心肌纤维断裂和彼此分离、排列杂乱;100 mW/cm2辐射后14 d大鼠心肌细胞内线粒体数量增加,无明显肿胀,心肌纤维断裂和彼此分离仍可见到。
2.3 肝超微结构观察(图 2)![]() | 图 2 微波辐射后1, 7, 14 d大鼠肝超微组织结构变化 |
空白对照组:大鼠肝细胞的形态规则,细胞界板清晰,细胞核圆形或椭圆形,且居中,核仁明显,核染色质分布均匀,细胞质内可见丰富的粗面内质网、线粒体,线粒体排列较为规则,呈圆形、椭圆形或长杆状,嵴清晰可见,基质致密,粗面内质网多平行排列在核周围。微波辐射组:100 mW/cm2辐射后1 d与空白对照组比较,肝细胞核圆形,异染色质增多,细胞器数量减少,被糖原颗粒取代,大部分线粒体形态正常,少部分线粒体嵴模糊,粗面内质网排列紊乱。100 mW/cm2辐射后7 d与与空白对照组比较,肝细胞线粒体疏松溶解、轻微肿胀,可见到髓样小体,粗面内质网排列紊乱,部分断裂、溶解,并有脱颗粒现象,可见散在的糖原颗粒;100 mW/cm2辐射后14 d肝细胞内线粒体无明显肿胀,少部分肝细胞核变形可见核固缩,异染色质趋边,胞质内有脂滴。
3 讨 论流行病学调查显示,一定强度微波辐射可引起心脏植物神经系统功能紊乱和肝功能异常〔5〕。本研究采用100 mW/cm2 H PM辐射大鼠,观察了辐射后1,7和14 d心肌和肝细胞形态学变化。研究发现,辐射后1和7 d心肌细胞大部分线粒体溶解空化,基质明显肿胀,部分心肌纤维断裂,而肝细胞最初只少部分线粒体嵴模糊,辐射后7 d时部分线粒体肿胀。表明高功率微波辐射对大鼠心肌和肝实质细胞有明确的损伤效应,大鼠心肌细胞损伤发生早并且较重,肝损伤发生较晚。在病变中最早而突出改变的是膜性结构损伤,其原因可能是由于大鼠在高功率微波辐射后,体内产生的大量自由基通过脂质过氧化反应引起生物膜结构损伤所致〔6〕。高功率微波辐射后14 d,心肌和肝细胞内线粒体空泡化、细胞肿胀明显减轻,部分心肌纤维仍有溶解断裂,说明高功率100 mW/cm2微波辐射致心脏和肝脏损伤大部分是可逆性损伤,具有可复性,肝细胞较心肌细胞恢复快,可能与肝脏代偿修复机制较强有关。
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2010, Vol. 26


