流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)是严重危害人类健康的传染病之一,由A、B、C、Y及W ₁₃₅群脑膜炎奈瑟菌引起的病例占95%以上^〔1〕。流脑致病菌具有菌群漂移的特点,一些国家^{〔2, 3〕}的流脑流行曾先后经历了由A群到C群的变迁,自 2000年起,非洲、亚洲及欧洲又不断出现W₁₃₅群引发的疫情^{〔4, 5〕}。为了评价多价流脑疫苗的安全性与免疫原性,江苏省疾病预防控制中心于2007年5-7月在江苏省金坛市对河南依生药业有限公司生产的A、C、W ₁₃₅和Y群脑膜炎球菌多糖疫苗进行人群接种观察,结果报告如下。

采用整群抽样方法,选取金坛市计划免疫工作基础较好的2个乡镇,以知情同意、自愿参加为原则,抽取无流脑感染史、3个月内无流脑疫苗接种史、无疫苗接种禁忌症的 2~30岁健康志愿者,男女不限。共抽取经体检合格,符合条件者990人,其中2~6岁、7~15岁和16~30岁年龄组各 330人。

(1)试验用疫苗:A、C、W₁₃₅和Y群脑膜炎球菌多糖疫苗(河南依生药业有限公司),冻干粉剂,0.5 mL/剂,每剂含A、C、W₁₃₅和Y群多糖抗原各50 μg,批号20060401,有效期至2008年3月31日。经中国药品生物制品检定所检定,符合《A、C、W₁₃₅和Y群脑膜炎球菌多糖疫苗制造及检定规程(草案)》的要求。(2)对照疫苗:因国内尚无同类脑膜炎球菌多糖疫苗,因此选择A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗(兰州生物制品研究所)做为对照疫苗,该疫苗为冻干粉剂,0.5mL/剂,每剂含A、C群多糖抗原各50 μg,批签发合格证号 20050730,有效期至2007年8月8日。

上臂外侧三角肌附着处皮下接种试验疫苗或对照疫苗,每人接种1剂。(1)第1阶段观察:采用开放性设计,均接种试验疫苗,分成人组(16~30岁)、少年组(7~15岁)和少儿组(2~6岁)实施接种,每组20人,计60人。接种后进行72 h安全性观察,对试验疫苗安全性进行初步评价,在安全性确立的基础上进行第2阶段观察。(2)第2阶段观察:采用随机、双盲和类似制品平行对照设计。选择符合试验要求的成人(16~30岁)、少年(7~15岁)及少儿(2~ 6岁)3组健康人各330人,共990人。每组受试者以2:1的比例随机接种试验疫苗和对照疫苗。试验疫苗接种者计660人,对照疫苗接种者计330人。

疫苗接种后安全性观察期为4周,接种后72 h内为安全性观察征集期,对受试者征集局部不良反应 (疼痛、红、肿、硬结等)和全身不良反应(发热、变态反应、头痛、疲倦乏力、恶心呕吐、腹泻和肌肉痛等),进行系统性随访观察;在安全性观察期内采用主动报告与定期随访方式对受试者发生的所有不良反应/事件进行观察;根据国家食品药品监督管理局颁布的《预防用疫苗临床试验不良反应分级标准指导原则》^〔6〕对发生的不良反应/事件分为轻度(1级)、中度(2级)、严重(3级)和有潜在生命危胁(4级)4个严重程度,分析比较不同年龄人群不良反应发生率及严重程度分布特征。

于免疫前第0天和免疫后第28天采集接种对象静脉血,分离血清,-20℃保存;对照组采集有效血清302对,试验组采集有效血清616对。均由中国药品生物制品检定所采用微量杀菌力试验(TTC法)测定流脑杀菌抗体滴度。免疫前抗体滴度< 1:2为阴性,免疫后较免疫前抗体增长倍数≥ 4者为阳转;分析比较不同年龄人群抗体阳转率、免疫后抗体平均几何滴度(GMT)及GMT增长倍数。

使用SAS 9.1软件进行统计分析,采用χ²检验、精确概率法或U检验,均为双侧检验(two-side test),检验水准取=0.05。

第1阶段安全性观察60人中,发生不良反应6例,其中成人组4例,少年组2例,少儿组未发生不良反应。不良反应均为接种部位轻度疼痛,无全身不良反应;表明试验疫苗安全,可进行第2阶段观察。

表 1

表 1 第2阶段安全性观察不良反应分级发生率(%)

表 1 第2阶段安全性观察不良反应分级发生率(%)

(1)不良反应分级发生率:第2阶段观察期内,对照组与试验组总体不良反应发生率分别为11.21%和13.79%,差异无统计学意义(χ²=1.2965,P=0.2548)。不良反应均主要以1级为主,对照组与试验组 1级不良反应发生率分别为89.19%和82.41%;2级不良反应分别为8.11%和16.48%,3级不良反应分别为2.70%和 0.11%,无4级不良反应发生;对照组与试验组以及不同年龄人群各级不良反应率差异均无统计学意义。(2)全身反应发生率:对照组与试验组全身反应发生率分别为6.06%和 5.30%,差异无统计学意义(χ²=0.2406,P=0.6237);全身反应主要为发热,对照组与试验组发热反应发生率分别为 6.06%和5.00%,差异无统计学意义(χ²=0.4884,P= 0.4846),除少儿对照组1例3级发热反应外,其他均为1级或2级发热反应;对照组与试验组各级发热反应构成比差异无统计学意义(精确概率P=0.2922)。此外,发生3例其他全身反应:少年对照组1例接种后24 h出现发热伴疲倦乏力,接种后48 h出现恶心呕吐,接种72 h后症状消失;少儿试验组1例接种后24 h出现恶心呕吐、腹泻,至接种后48 h消失;成人试验组1例接种后6 h出现疲倦乏力,至接种后24 h消失。(3)局部反应发生率:对照组与试验组分别为6.06%和9.85%,差异有统计学意义(χ²=4.0218,P=0.0449);局部反应主要为接种部位疼痛,对照组与试验组疼痛发生率分别为5.45%和9.24%,均为1级反应,2组疼痛发生率差异有统计学意义(χ²=4.2987,P=0.0381),试验组高于对照组;各年龄人群中对照组与试验组疼痛发生率差异均无统计学意义 (少儿组χ²=3.3914,P=0.0655少年组χ²=0.5255,P= 0.4685成人组χ²=0.8723,P=0.3503)。接种部位红斑发生率也较高,对照组与试验组分别为2.42%和3.18%,2组差异无统计学意义(χ²=0.4440,P=0.5050),对照组与试验组接种部位红斑不同严重程度构成比差异无统计学意义(精确概率法P=0.7160);此外,对照组出现1例接种部位硬结和1例接种部位肿胀,严重程度均为2级以下,均在接种后72 h内消失;试验组出现4例接种部位硬结和5例接种部位肿胀。

表 2

表 2 不同年龄人群抗体阳转率(%)与免疫后抗体GMT水平

表 2 不同年龄人群抗体阳转率(%)与免疫后抗体GMT水平

对照组与试验组比较,A群和C群流脑抗体阳转率差异无统计学意义(A群:精确概率法P=1.0000,C群:χ²=2.7090,P=0.0998),W₁₃₅群和Y群流脑抗体阳转率差异有统计学意义(W₁₃₅群:χ²=724.3100,P < 0.0001,Y群: χ²=532.5566,P < 0.0001),试验组高于对照组。

对照组与试验组比较,免疫后A群和C群流脑抗体GMT差异无统计学意义(A群: U=0.34164 P=0.73262;C群:U=-0.56216 P=0.57401),W₁₃₅群与C群流脑抗体GMT差异有统计学意义(W₁₃₅群: U=-55.9839 P=0;Y群:U=-44.7281 P=0),试验组高于对照组。

对照组A群、C群、W₁₃₅群和 Y群流脑抗体平均增长倍数分别为59.02(95% CI=53.48~ 66.11),78.31(95% CI=66.01~85.61),5.74(95% CI= 4.11~8.14)和10.57(95% CI=5.93~19.02);试验组A群、 C群、W₁₃₅群和Y群流脑杀菌抗体平均增长倍数分别为52.12 (95% CI=50.85~53.46),72.40(95% CI=62.66~79.14),178.47(95% CI=158.14~198.06)和260.74(95% CI=142.76- 329.67)。2组比较,A群和C群差异无统计学意义(A群:χ² =0.4443P=0.5051;C群:χ²=0.0374 P=0.8467),W₁₃₅群和 Y群流脑杀菌抗体平均增长倍数差异有统计学意义(W₁₃₅群: χ²=562.3766 P < 0.0001;Y群:χ²=486.2806 P < 0.0001),试验组高于对照组。

3 讨 论

安全性观察结果表明,试验疫苗接种后总体不良反应发生率为13.79%,主要以1级不良反应为主,1级不良反应占总体不良反应的82.42%,无3级以上严重不良反应发生;不良反应主要以局部反应为主,局部反应发生率为9.85%,全身反应发生率仅为5.30%,且以1级发热为主。与对照组比较虽然试验组接种部位疼痛发生率较高,但均为1级反应,与 2007年Daniel Chandramohan等^〔7〕报道的GSK公司的A、C、 W₁₃₅、Y群脑膜炎球菌多糖疫苗观察结果相似。

免疫原性检测结果表明,试验组与对照组比较A群和C群免疫后流脑杀菌抗体阳转率、免疫后GMT水平与抗体滴度平均增长倍数差异均无统计学意义,A群与C群免疫评价指标与周伟忠等^〔8〕报道的A+C群流脑疫苗研究结果基本一致;试验组与对照组比较W₁₃₅群和Y群流脑杀菌抗体阳转率、免疫后GMT水平与抗体滴度平均增长倍数差异有统计学意义,试验组高于对照组,这主要是由于本研究开始时国内无上市的同类疫苗,采用的是A+C群流脑疫苗做对照,W₁₃₅群与Y群免疫评价指标与伍传宏等^〔9〕报道的A、C、W₁₃₅和Y群脑膜炎球菌多糖疫苗研究结果基本一致。

综上所述,A、C、W₁₃₅和Y群脑膜炎球菌多糖疫苗有较好的安全性;从A群、C群、W₁₃₅群和Y群流脑杀菌抗体阳转率、免疫后GMT水平及流脑杀菌抗体滴度平均增长倍数等方面考虑,A、C、W₁₃₅和Y群脑膜炎球菌多糖疫苗具有较好的免疫原性。