中国酒精性肝病的发病率近年来呈逐年增加趋势。酒精性脂肪肝作为酒精性肝病的前期病变，可进展为酒精性肝炎、肝纤维化，甚至肝硬化，目前临床尚无特效的治疗和预防药物。因此，研发能够防治酒精性脂肪肝的药物具有重要意义^{〔1, 2, 3〕}。大蒜油为大蒜经水蒸气蒸馏制得的一种挥发油，含有二烯丙基硫、二烯丙基二硫、二烯丙基三硫等多种含硫功效成分^〔4〕，具有拮抗化学性肝损伤作用。本研究采用酒精灌胃辅以高脂饲料建立小鼠酒精性脂肪肝模型，通过观察给予大蒜油后小鼠的生化、病理以及氧化指标，探讨大蒜油对酒精性脂肪肝预防效果。

雄性昆明小鼠(山东大学实验动物中心)90只，SPF级，18～22g，随机分为6组，每组15只，大蒜油(药品级)(河南许昌元化生物科技有限公司);凯西莱(河南省新宜药业股份有限公司);甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)试剂盒(北京中生北控生物科技股份有限公司);丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原性谷胱甘肽(GSH)、游离脂肪酸(FFA)测定试剂盒(南京建成生物工程研究所)。高脂饲料配制:脂肪10%、胆固醇2%、基础饲料88%。

将小鼠随机分为正常对照、模型组、大蒜油低、中、高剂量(20，40，80mg/kg)和凯西莱阳性对照组(150mg/kg)。正常对照组每天喂养基础饲料，其余各组每天喂养高脂饲料并给予3g/kg乙醇灌胃;大蒜油和凯西莱组分别于灌胃乙醇后6h给予相应剂量的大蒜油和凯西莱，正常对照和模型组给予等体积玉米油，连续3周。末次给药后禁食12h，眼球取血分离血清测定TC、ALT、AST、MDA。取适量肝组织制成10%匀浆，测定MDA、TG、TC、GSH、FFA的含量和SOD活力;取肝左叶冰冻切片，苏丹Ⅲ染色，观察脂肪蓄积情况。

采用SPSS15.0软件进行分析，实验数据均以±s表示，各组间比较采用单因素方差分析并用LSD法进行两两比较，P＜0.05认为差异具有统计学意义。

表 1

表 1 大蒜油对脂肪肝小鼠血清生化指标影响(±s，n=15)

表 1 大蒜油对脂肪肝小鼠血清生化指标影响(±s，n=15)

与正常对照组比较，模型组TC、ALT、AST以及MDA含量明显增加(P＜0.01)。大蒜油各组TC、ALT、AST和MDA的水平与模型组比较，明显降低(P＜0.05或P＜0.01)。

表 2

表 2 大蒜油对肝组织中TG、TC、FFA 的影响(±s，n=15)

表 2 大蒜油对肝组织中TG、TC、FFA 的影响(±s，n=15)

与正常对照组比较，模型组小鼠肝脏匀浆中TG、TC、FFA含量均明显升高(P＜0.01);大蒜油组与模型组比较，TG、TC、FFA的水平明显下降，差异具有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01)。

表 3

表 3 大蒜油对肝组织中氧化抗氧化指标的影响(±s，n=15)

表 3 大蒜油对肝组织中氧化抗氧化指标的影响(±s，n=15)

与正常对照组比较，模型组肝匀浆中GSH含量和SOD活力均明显下降，而MDA水平明显升高(P＜0.01);与模型组比较，大蒜油组的GSH含量明显升高，MDA的含量明显降低(P＜0.01)。

肝组织冰冻切片苏丹Ⅲ染色结果显示，实验结束时模型组有大量橙黄色脂滴蓄积，重度脂肪变性。与模型组比较，大蒜油各剂量组脂滴明显减少。凯西莱阳性对照组效果与大蒜油低剂量组相当。

酒精性脂肪肝机制十分复杂，乙醇及其氧化产物对肝脏的损伤以及氧化应激等在发病过程中发挥着重要作用^{〔5, 6, 7〕}。酒精进入机体后转化为乙醛，促进脂质过氧化反应，使谷胱甘肽减少，导致线粒体损伤。乙醇代谢能够导致氧化型辅酶Ⅰ/还原型辅酶Ⅰ(NAD+/NADH)比值下降，可抑制三羧酸循环和脂肪酸的β-氧化，使游离脂肪酸含量增加^〔8〕。此外，乙醇还可以提高细胞色素P4502E1(CYP2E1)，使活性氧增多、进一步促进脂质过氧化反应，从而使血清转氨酶升高、终产物MDA增加，使体内氧化抗氧化机制失衡，最终导致肝脏脂肪的动态平衡被破坏，TG在肝脏沉积^{〔9, 10〕}。

本研究利用酒精灌胃并辅以高脂饲料，成功复制出了酒精性脂肪肝模型，冰冻切片脂肪染色结果显示，模型组小鼠肝脏全部中度或重度脂肪变性。与模型组比较，给予大蒜油组小鼠肝匀浆TG、TC、MDA、FFA、MDA的水平明显下降，GSH、SOD的水平明显升高，表明大蒜油可以部分拮抗酒精性脂肪肝的发生。大蒜油的作用可能与其抗氧化活性有关。大蒜油中的大蒜素、大蒜新素和大蒜烯等多种硫化物，均具有明显的抗氧化活性，可以减轻酒精对线粒体功能的损伤，保护脂肪酸的β-氧化，从而抑制脂肪在肝脏蓄积^{〔11, 12〕}。