高脂血症是脂肪代谢异常导致血浆中脂质高于正常水平的一种病症。高脂血症动物模型主要有先天性、转基因和化学物质诱导制备等,采用高脂饲料喂养建立高脂血症动物模型是简便易行的方法,易于重复和操作。草苁蓉为列当科草本植物,因其具有补肾壮阳、润肠止血、滋补强身及延年益寿的功效,在民间被誉为“不老草”。有研究表明,草苁蓉具有清除自由基、抗脂质过氧化、抗肿瘤及增强免疫功能等作用^〔1〕。本研究以甲基羟戊二酰辅酶A还原酶抑制剂辛伐他汀为阳性对照,探讨草苁蓉对实验性高脂血症兔血脂及抗氧化能力的影响,为研究草苁蓉对高脂血症的防治作用提供科学依据。

(1)动物和饲料:40只日本大耳白兔(延边大学医学部动物科);4月龄,体重2.0~2.5 kg,雌雄各半。基础饲料由延边大学医学部动物科提供;高脂饲料含有胆固醇 1%、猪油5%、基础饲料94% ^〔2〕。(2)试剂和仪器:甘油三酯 (TG)试剂盒(日本和光公司);总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)试剂盒(日本荣研公司);总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX) 及丙二醛(MDA)试剂盒(南京建成生物技术研究所)。日本 himac cp 100α超速离心机和U-2010型紫外分光光度仪(日本HITACHI公司)。

将草苁蓉全草切碎后用80%甲醇提取后减压浓缩,获草苁蓉甲醇提取物。将甲醇粗提取物在等量的CH₂C1₂和H₂O中进行萃取分离,取其H₂O层提取物。

40只日本大耳白兔随机分为正常组、 模型组、草苁蓉高(200 mg/kg•d)、低剂量组(100 mg/kg•d)和辛伐他汀(2 mg/kg•d)组,每组8只,雌雄各半,单笼饲养。草苁蓉剂量选定以前期动物实验为依据,阳性对照药物辛伐他汀剂量以药品推荐剂量为依据。除正常组喂饲基础饲料外,其他各组均给予高脂饲料。每天早晨先给予含药高脂饲料,待吃完后再给予高脂饲料,以保证药物的完全摄入。每只兔每天进食总量控制为120 g,自由饮水,共6周。

末次给药后禁食16 h,经耳静脉取血,分离血清。采用比色法测定TG、TC、LDL-C、 HDL-C、T-AOC、SOD、CAT、GSH-Px及MDA等指标。

用SPSS 11.0软件进行方差分析。

表 1

表 1 高脂血症兔血脂水平的变化

表 1 高脂血症兔血脂水平的变化

喂饲高脂饲料6 周后,模型组兔血清TG、TC LDL-C和HDL-C水平均高于正常组(P < 0.01);草苁蓉高剂量组和辛伐他汀组TC和LDL-C水平低于模型组(P < 0.05),草苁蓉高剂量组兔血清TC 下降23%,LDL-C下降30%,辛伐他汀组兔血清TC下降 27%,LDL-C下降36%,降脂百分比2组接近;草苁蓉高、低剂量组和辛伐他汀组与模型组兔血清比较,TG水平均降低,HDL-C水平均增高,但差异无统计学意义(P > 0.05)。

表 2

表 2 高脂血症兔血清抗氧化指标的变化

表 2 高脂血症兔血清抗氧化指标的变化

与正常组比较,模型组兔血清T-AOC、SOD、CAT及GSH-Px活性均低于正常组(P < 0.05);MDA水平高于正常组(P < 0.05); 与模型组比较,草苁蓉高、低剂量组兔血清T-AOC、SOD、 CAT及GSH-Px活性均高于模型组(P < 0.05);MDA水平低于模型组(P < 0.05);草苁蓉高剂量组与低剂量组比较,差异无统计学意义(P > 0.05)。

本研究结果表明,给兔喂饲6周高脂饲料后,兔血清TG、 TC和LDL-C水平均高于正常组,提示兔高脂血症模型建立成功。与模型组比较,草苁蓉高剂量干预可明显降低上述各指标活性,提示草苁蓉对实验性高脂血症兔血脂代谢有良好的调节作用。血清总抗氧化能力是衡量机体抵抗氧化损伤能力的重要指标,主要与血清SOD、CAT、GSH-Px活性等抗氧化酶活性和血清活性氧清除剂含量有关。草苁蓉提取物可降低高脂血症兔MDA的水平,提高SOD、CAT、GSH-Px活性及 T-AOC水平,提示草苁蓉能提高血清抗氧化酶活性,减少自由基的产生,对心血管损伤及动脉粥样硬化具有一定的防治作用。