2. 韶关学院英东生物工程学院;
3. 华南师范大学生命科学学院
研究显示,中国环境介质中多环芳烃(PAH s)的污染程度相对较高〔1〕,其对人体健康的影响已受到国内外学者关注〔2〕。儿童是PAH s易感人群〔3〕,一些儿童疾病如哮喘、神经发育障碍、免疫功能低下等可能与PAH s暴露有关〔4〕。了解儿童PAH s内暴露水平,对相关儿童健康风险评价十分必要。本研究于2007年11月采用高效液相色谱-荧光检测 (HPLC FLD)法,分析南方某市幼儿园儿童尿中1-羟基芘 (1-HOP)的浓度水平,并对影响尿液中1-HOP浓度的可能因素进行探讨。结果报告如下。
1 材料与方法 1.1 尿样采集及问卷调查采集中国南方某城市中心区域幼儿园80名4~6岁儿童晨尿。采样时均请家长按要求填写调查表,内容包括性别、身高、体重、饮食习惯、是否被动吸烟、每天交通所需时间等。
1.2 仪器与试剂HP1100型高效液相色谱仪、荧光检测器 (美国Agilent公司);十二孔固相萃取装置(美国Supeclo公司);C18 ENVI固相萃取visiprepTM小柱(美国Supeclo公司);氮吹仪(美国Pierce公司);Agilen Zorbax SB-C18液相色谱柱 (250 mm×4.6mm,5.0μm);0.2μm聚四氟乙烯膜滤头(上海安谱科学仪器有限公司)。1-HOP标准品(美国Sigma公司);色谱纯甲醇等有机溶剂(德国Merck公司);β-葡萄糖苷酸-芳基硫酸酯酶(每毫升中含122 400单位β-葡萄糖苷酸酯酶和3 610单位芳基硫酸酯酶,美国Sigma公司)。
1.3 尿样前处理尿肌酐值的测定及尿样的前处理过程按文献〔5〕进行,所测尿液中1-HOP的浓度均以肌酐值校正。
1.4 高效液相色谱条件采用甲醇-水梯度洗脱。进样量为10μL;流速0.6 mL/min。流动相切换程序:0~5 min,甲醇 60%;5~14 min,甲醇60%~78%;14~21 min,甲醇78%~ 85%;21~30 min,甲醇85%~100%;30~35 min,甲醇 100%;35~39 min,甲醇60%~100%;39~45 min,甲醇 60%。荧光激发波长/发射波长为239/392 nm。
1.5 检出限与加标回收率1-HOP在0.56~143μg/L浓度范围内呈现良好线性关系,线性方程为Y=0.140X-0.233,R2为0.998。检出限为0.234μg/L (按3倍信噪比计)。采用基质加标测定1-HOP回收率,其中高浓度(85μg/L,n=6)为 (91±12.7)%;低浓度(4.25μg/L,n=6)为(88±8.9)%。样品前处理过程中,每6个样品用1个基质加标样品进行质量控制;H PLC仪器分析过程中,每运行10个样品做1个标样控制。
1.6 统计分析使用SPSS 13.0软件进行分析。组间比较采用Mann-Whitney U检验,P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结 果 2.1 儿童一般情况在80名儿童中,男童47名,女童33名。男童平均年龄(5.0±0.78)岁,身高(110.3±7.1) cm,体重(19.3±4.68) kg,尿肌酐浓度(5.8±2.6) mmol/L;女童平均年龄(5.0±0.8)岁,身高(109.7±6.0) cm,体重(18.4±3.1) kg,尿肌酐浓度(5.5±5.6) mmol/L。性别间各指标差异无统计学意义(P > 0.05)。
2.2 儿童尿液中1-羟基芘含量儿童晨尿中1-HOP检出率达100%,1-HOP浓度范围为0.10~1.64μmol/mol肌酐,浓度中位数为0.38μmol/mol肌酐(95% CI=20.38~0.51)。
2.3 不同特征儿童体内1-羟基芘含量比较(表 1)| 表 1 不同特征儿童尿液中1-羟基芘浓度比较(μmol/mol肌酐) |
个体差异和交通时间长短对受试儿童尿液中1-HOP浓度均无明显影响。被动吸烟儿童尿液中1-HOP浓度中位数比非被动吸烟儿童高26%,近期食用油炸烧烤食品的儿童比未食用的儿童高17%,但差异均无统计学意义。
3 讨 论本研究受试儿童尿液中1-HOP的检出率为100%,明显高于赵振华等〔6〕研究结果,比沿海地区中学生1-HOP检出率高1倍〔7〕,比东北〔8〕和北京〔9〕的一般人群尿1-HOP浓度高近 3倍;明显高于美国、德国等同年龄儿童〔10, 11, 12, 13〕。目前尚无儿童1-HOP的生物暴露限值(biolog ic exposure limits,BEL),若参照国内外学者提出的一般人群BEL值〔14, 15〕(0.11,0.24μm ol/mol肌酐),本研究分别有近100%和75%的儿童超过此限值,表明该人群可能处于较高PAH s暴露风险。
由于个体实际PAH s暴露量具有不确定性,因此,个体差异对PAH s内暴露水平的影响难以评判。研究显示该城市大气环境具有较高浓度的PAH s〔1〕,这可能是本研究儿童尿液中1-HOP检出率达100%的主要原因。至于不同暴露途径对受试儿童PAH s内暴露水平的影响还有待进一步研究。
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2010, Vol. 26

, 盛国英1, 傅家谟1 