麦麸是小麦加工的副产品,含有15%以上的蛋白质,是一种潜在的植物蛋白资源^〔1〕。中国麦麸很少进行深加工和再利用,经济价值不高^〔2〕。将麦麸蛋白酶解得到麦麸多肽可进一步开发麦麸资源。科学研究表明,选择合适的蛋白酶,水解蛋白质可以得到大量具有较高生物功能的多肽,该多肽制备操作简单、来源广泛、适合工业化生产,已成为科学研究的新热点^〔3〕。目前,国内外有关麦麸多肽制备和功能研究很少,仅体外实验研究证明其具有较高抗氧化性^〔4〕。本实验通过建立D-半乳糖亚急性衰老小鼠模型,检测麦麸多肽的体内抗氧化活性,为麦麸多肽的进一步研究与开发提供基础依据。

实验室自制麦麸多肽^〔4〕。健康昆明种小鼠50只,雌、雄各半(中国医科大学实验动物中心),体重 (25±2)g。常规喂养,观察1周后使用。丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)测定试剂盒(南京建成生物工程研究所);其他试剂为国产分析纯。

健康小鼠50只,雌、雄各半,随机分为5组,即正常对照组,D-半乳糖氧化损伤模型组,麦麸多肽低、中、高剂量组。除正常对照组每天腹腔注射生理盐水外,其余各组小鼠每天腹腔注射等量D-半乳糖 600 mg/(kg.bw),持续42 d,同时麦麸多肽低、中、高剂量组每天分别按150,300,600 mg/(kg.bw)灌胃;正常对照组及模型组用等量蒸馏水灌胃,每天称重1次。

在第42 d小鼠灌胃12 h后,眼眶取血,4 000 r/min离心15 min,分离血清,检测血清MDA含量、GSH-Px及SOD活性。解剖小鼠,迅速取出肝脏、脾及胸腺,生理盐水冲洗后用滤纸吸去水分,称重后计算脏器指数。取0.3g肝组织,剪碎后置于玻璃匀浆器中,加9倍体积预冷生理盐水,制成10%(W/V)的肝组织匀浆,3 000 r/min离心10 min,取上清液按试剂盒操作方法测定肝细胞MDA含量、GSH-Px及SOD活性^〔5〕。

采用SPSS 11.5软件进行分析。

表 1

表 1 不同组别小鼠体重及脾、胸腺指数比较(x±s)

表 1 不同组别小鼠体重及脾、胸腺指数比较(x±s)

结果显示,D-半乳糖诱发的氧化损伤模型小鼠胸腺指数和脾脏指数明显下降,但经过麦麸多肽灌胃后,其胸腺指数和脾脏指数却有不同程度的升高,表明麦麸多肽具有提高小鼠免疫力,减缓免疫器官的退化,延缓衰老的作用。

表 2

表 2 不同组别小鼠血清MDA 含量及SOD、GSH- Px活性的影响(x±s)

表 2 不同组别小鼠血清MDA 含量及SOD、GSH- Px活性的影响(x±s)

结果显示,麦麸多肽能够促进小鼠血清SOD、GSH-Px值的升高,降低小鼠血清脂质过氧化物MDA值,具有较好的抗血清脂质过氧化作用。300 mg/(kg.bw)~剂量的麦麸多肽能够提高机体抗氧化酶活性,抑制血清脂质过氧化损伤。

表 3

表 3 麦麸多肽对小鼠肝脏MDA含量及SOD、 GSH- Px活性的影响(x±s)

表 3 麦麸多肽对小鼠肝脏MDA含量及SOD、 GSH- Px活性的影响(x±s)

结果表明,麦麸多肽能够降低小鼠肝脏脂质过氧化物MDA值,促进小鼠肝脏SOD、GSH-Px值的升高,300 mg/(kg•bw)~剂量的麦麸多肽具有较好的抑制肝脏脂质过氧化损伤作用。

迄今为止,我国麦麸资源未能得到充分、合理、有效的利用。酶解麦麸蛋白制备具有生物活性的麦麸多肽不失为国内麦麸资源开发利用的重要方法之一。本实验通过D-半乳糖建立氧化损伤模型参照文献表明造模成功。实验结果表明,麦麸多肽可以使衰老模型小鼠最终体重及脾脏指数和胸腺指数明显增高,血清和肝脏中MDA含量明显下降,SOD和GSH-Px活力明显提高。麦麸多肽600 mg/(kg•bw)抗氧化效果比300 mg/(kg•bw)剂量明显增强。表明麦麸多肽抗氧化活性与其浓度有关,推测其抗氧化作用是通过提高机体组织中抗氧化酶如SOD及GSH-Px的活性,从而有效的清除活性氧和自由基。为了使麦麸多肽广泛地应用于功能食品领域,其抗氧化作用的机制有待于进一步研究。