亚洲牛带绦虫(Taenia Saginata asiatica)是近30年来发现的一种新的人体带绦虫。但亚洲牛带绦虫的研究仅局限于从形态学、生物学等方面与传统牛带绦虫进行比较^{〔1, 2, 3〕},有关宿主抗亚洲牛带绦虫感染的研究报道较少。本研究动态观察感染亚洲牛带绦虫的家猪血清白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)含量变化,初步讨论家猪抗亚洲牛带绦虫感染免疫应答机制。现将结果报告如下。

(1)实验虫体来源:用槟榔、南瓜子对贵州省都匀市绦虫病流行区的2例已确诊绦虫病患者进行驱虫,获得的完整虫体经形态学鉴定为牛带虫亚洲亚种。(2)虫卵悬液制备:将上述驱出的绦虫用细小针头剖开孕节子宫,3 000 r/ min离心15 min收集虫卵,用生理盐水离心洗涤4次,调节虫卵浓度至15万/mL。(3)实验动物:20 d龄三元杂交猪10头,雌雄并用,由贵阳市种猪繁殖场提供。经粪检、驱虫和间接血凝实验证明无在囊尾蚴感染。(4)试剂:白细胞介素-4和白细胞介素-10试剂盒(美国Rapid BioLab 公司)。

(1)分组及处理:将20 d龄三元杂交猪随机分为实验组和对照组,每组各5头。实验组每头灌胃1 mL (15万/mL)虫卵悬液,对照组不感染。2组乳猪均使用专用膨化颗粒饲养,隔离圈养,防止自然感染。(2)血清细胞因子含量测定:实验组及对照组分别于感染后第7,15,45和60 d分别抽取5 mL静脉血,离心取血清,置-20℃冰箱保存,用 ELISA法测定血清IL-4和IL-10的含量。

采用SPSS 13.0软件进行分析,2组均数的比较采用方差分析。

表 1

表 1 家猪感染亚洲牛带绦虫后不同时间血清 LI-4含量(A450值)

表 1 家猪感染亚洲牛带绦虫后不同时间血清 LI-4含量(A450值)

对照组血清IL-4含量基本处于稳定水平。实验组血清 IL-4含量在感染第7 d时最高,之后迅速下降,第60 d时再次上升,与对照组比较,实验组血清IL-4含量在感染第7,15,和 60 d时明显升高(P < 0.01)。

表 2

表 2 家猪感染亚洲牛带绦虫后不同时间血清 IL-10含量(A450值)

表 2 家猪感染亚洲牛带绦虫后不同时间血清 IL-10含量(A450值)

对照组血清IL-10含量,基本处于稳定水平。实验组血清IL-10含量在感染第7 d时最高,之后迅速下降,第60 d时再次升高,与对照组比较,实验组血清IL-10含量在感染第7和15和60 d时明显升高(P < 0.01)。

本研究通过观察感染亚洲牛带绦虫的家猪血清IL-4和 IL-10含量的变化,发现亚洲牛带绦虫感染家猪第7和15 d,IL-4和IL-10含量远高于对照组,高含量的IL-4和IL-10可以促进Th 0向Th 2转化,Th 2细胞偏向于分泌IL-4、IL-5、和 IL-10等,与B细胞的增殖、成熟和促进抗体生成有关,由此可见,在家猪感染亚洲牛带绦虫早期,以Th 2细胞应答优势为主。

家猪感染亚洲牛带绦虫第45 d,血清IL-4和IL-10含量与对照组比较差异无统计学意义,提示Th 2细胞应答处于正常水平,其原因可能是牛带绦虫六钩蚴在形成囊尾蚴的过程中释放一种可溶性蛋白诱导宿主产生免疫耐受有关。徐宏秀等^〔4〕在脑囊尾蚴病患者Th 2型细胞因子的研究发现,脑囊尾蚴病患者血清IL-4和IL-10含量明显升高。由于脑囊尾蚴病患者体内虫体以囊尾蚴形成存在,从理论上说应该与亚洲牛带绦虫感染家猪中期的实验结果一致,但实验结果差异较大,这种差异是否为带绦虫寄生的中间宿主不同所造成还有待进一步研究。

许多研究表明^{〔5, 6〕},亚洲牛带绦虫感染家猪第75 d后,病理学显示囊蚴全面钙化,肝组织以肉芽肿和肝纤维化损害为特征。本研究发现感染晚期血清IL-4和IL-10含量再次异常增高,高表达IL-4和IL-10可能与肝纤维化形成有关。徐峥嵘^〔7〕综述表明IL-4和IL-10在组织炎症反应期发挥免疫调节作用是肯定的,由此可能推测IL-4和IL-10在囊尾蚴所致猪肝组织炎症反应起到重要作用,是否在囊尾蚴所致猪肝脏组织纤维化形成中起作用还有待进一步研究。