中国公共卫生  2010, Vol. 26 Issue (6): 774-775   PDF    
引用本文
闫书婷, 张锦华, 庄剑波, 景涛, 严祥, 叶华, 梁晓萍, 韩俭. 兰州市幽门螺杆菌临床分离株耐药性分析[J]. 中国公共卫生, 2010, 26(6): 774-775.
YAN Shu-ting, ZHANG Jin-hua, ZHUANG Jian-bo, et al. Antibiotic resistance of Helicobacter pylori isolated from patients in Lanzhou city[J]. Chinese Journal of Public Health, 2010, 26(6): 774-775.
兰州市幽门螺杆菌临床分离株耐药性分析
闫书婷1, 张锦华2, 庄剑波2, 景涛1,3, 严祥4, 叶华1, 梁晓萍1, 韩俭1,3     
1. 兰州大学病原生物学研究所, 甘肃兰州730000;
2. 甘肃省第二人民医院消化科;
3. 甘肃省新药临床前研究重点实验室;
4. 兰州大学第一医院老年病科
收稿日期: 2010-02-03.
基金项目: 甘肃省新药临床前研究重点实验室开放基金项目(GSKFKT-0708);甘肃省重点中医药科研项目(GZK-2009-4);兰州市科技计划项目(2009-1-63)
作者简介: 闫书婷(1980- ),女,河北人,硕士在读,主要从事幽门螺杆菌研究工作。
通讯作者: 韩俭
摘要: 目的 调查甘肃省兰州市临床分离幽门螺杆菌(Hp)对常用抗生素的耐药状况,为临床治疗提供依据。方法 收集患者胃粘膜标本,分离培养和鉴别Hp,采用Kirby-Bauer纸片法检测Hp对阿莫西林、克拉霉素、甲硝唑、呋喃唑酮和左氧氟沙星的耐药性。结果 从197例患者中分离出81株Hp,阳性率41.12%,性别与年龄差异无统计学意义(P＞0.05);消化性溃疡患者的阳性率(56.25%)高于慢性胃炎患者(P＜0.05);Hp对阿莫西林、克拉霉素、甲硝唑、呋喃唑酮和左氧氟沙星的耐药率依次为3.70%,7.41%,67.90%,3.70%和6.17%。结论 兰州市流行的Hp对甲硝唑耐药率高,不应作为治疗Hp的一线药物;呋喃唑酮、阿莫西林等应作为治疗Hp感染的主要药物。
关键词: 幽门螺杆菌     抗生素     Kirby-Bauer药敏纸片法     耐药性    
Antibiotic resistance of Helicobacter pylori isolated from patients in Lanzhou city
YAN Shu-ting, ZHANG Jin-hua, ZHUANG Jian-bo, et al    
Institute of Pathogenic Biology, Lanzhou University，Lanzhou 730000, China
Abstract: Objective To investigate common antibiotics resistance of Helicobacter pylori(Hp) isolated from patients in Lanzhou city and to provide the clinical guidelines for choosing effective agents for Hp eradication therapy.Methods Gastric mucosa tissues of the patients with upper gastroenterol diseases were sampled to isolate and identify Hp.Kirby-Bauer test was performed to test the resistance of isolated Hp strains to amoxicillin,clarithromycin,metronidazole,furaltadon,and levofloxacin.Results Totally 81 strains of Hp were isolated from 197 samples(41.12%) and there was no difference in the isolation rate between the patients with different sex and age(P>0.05).The positive rate of Hp infection in patients with peptic ulcer was significantly higher than that of patients with chronic gastritis(P<0.05).The resistant rate of Hp to amoxicillin,clarithromycin,metronidazole,furaltadon,and levofloxacin was 3.70%,7.41%,67.90%,3.70%,and 6.17%,respectively,and with no difference between isolations form patients with different sex,age and the pathological type.Conclusion Metronidazole should not be used as first-line agent for Hp treatment in Lanzhou area due to its higher resistance rate.Furaltadone and amoxicillin should be used first for Hp treatment.
Key words: Helicobacter pylori     antibiotic     Kirby-Bauer antibiotic susceptibility test     drug resistance    

幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)是慢性胃炎和消化性溃疡的重要致病因子,而且与胃癌和胃粘膜相关性淋巴样组织(MALT)淋巴瘤的发生相关。据流行病学调查,幽门螺杆菌全球感染,在经济落后地区人群感染率更高,在中国人群中的感染率高达40%左右〔1〕。甘肃省许多地区人群Hp感染率高〔2〕,为了掌握兰州市上消化道疾病患者中Hp的耐药状况,为治疗Hp感染提供依据,本研究于2009年4-10月对兰州市197例上消化道疾病患者进行了调查,现将结果报告如下。

1 对象与方法 1.1 对象

选取甘肃省第二人民医院胃镜室胃镜检查快速尿素酶试验均为阳性的上消化道疾病患者197例,其中男性114例,女性83例;年龄18～80岁,平均(51.1±14.7)岁。患者均为兰州市常住人口,检查前1周均未服用抗生素。197例中,慢性胃炎108例,消化性溃疡80例,胃癌9例,患者病变类型由胃镜结合组织病理学检查确诊。

1.2 方法 1.2.1 材料

(1)试剂与仪器:哥伦比亚琼脂(美国BD公司);布氏肉汤(杭州天和公司);羊血(兰州大学实验动物中心);新生牛血清(杭州四季青公司);万古霉素、两性霉素B(上海生工公司);多粘菌素(美国Sigma公司);甲氧苄啶(加拿大BBI公司);尿素酶试剂(福建三强公司);氧化酶试剂(杭州天和公司);阿莫西林、甲硝唑、左氧氟沙星、克拉霉素药敏纸片(英国Oxoid公司);呋喃唑酮药敏纸片(杭州微生物试剂公司)。厌氧培养罐(广州海太光电公司);洁净工作台、生物洁净安全柜(苏州净化公司);显微镜(日本Olympus公司);电子天平(上海天平仪器厂);-80℃冰箱(美国Thermo公司)。(2)对照菌株:HpNCTC11637(上海消化病研究中心)。

1.2.2 培养基制备

Hp分离培养平板采用哥伦比亚琼脂加选择剂〔万古霉素250mg/L,两性霉素B200mg/L,多粘菌素220mg/L,甲氧苄胺嘧啶(TMP)300mg/L〕和5%脱纤维羊血制成;转运培养基由布氏肉汤加10%蔗糖和10%小牛血清制成。

1.2.3 Hp分离培养、鉴定和保存

用胃镜活检取胃窦小弯侧组织1块,置转运培养基,立即送实验室研磨接种于Hp琼脂平板,采用抽气-换气法形成微需氧条件(5%O2,10%CO2和85%N2),在湿度>95%条件下37℃培养72h。挑选细小无色半透明菌落通过革兰染色、尿素酶试验和氧化酶试验鉴定,-80℃保存。

1.2.4 药敏试验

采用K-B纸片法,选择阿莫西林、呋喃唑酮、克拉霉素、左氧氟沙星和甲硝唑等5种药敏纸片对81株Hp进行药敏试验。刮取纯培养Hp菌落,用0.9%无菌生理盐水调整细菌浓度为1×108CFU/mL,用无菌棉签沾取菌液均匀涂布于Hp琼脂平板上,稍晾后贴上不同药敏纸片,置37℃微需氧环境培养72h,观察并测量抑菌圈大小。以NCTC11637做对照,药敏试验结果的判断标准参照文献〔3, 4〕。

1.3 统计分析

采用SPSS 10.0软件进行±s检验。

2 结 果 2.1 Hp分离鉴定结果

197例上消化道疾病患者中分离到Hp81株,阳性率为41.12%。不同性别与年龄的阳性率差异无统计学意义(P＞0.05)。消化性溃疡患者Hp阳性45例,阳性率为56.25%,高于慢性胃炎患者阳性率31.48%(P＜0.05),也高于胃癌患者阳性率22.22%(P=0.053)。慢性胃炎和胃癌患者间Hp阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。

2.2 药敏试验结果(表 1)
表 1 Hp分离株对5种抗生素的药敏试验结果

表 1可见,Hp分离株对阿莫西林、呋喃唑酮最为敏感,其次为克拉霉素和左氧氟沙星,对甲硝唑耐药率高。81株Hp中,同时耐2种抗生素9株,其中耐甲硝唑和克拉霉素4株,耐甲硝唑和左氧氟沙星5株;同时耐3种抗生素3株(同时耐阿莫西林、甲硝唑和呋喃唑酮)。不同性别、年龄和病理类型分离株的药物敏感性差异无统计学意义(P＞0.05)。

3 讨 论

本研究结果表明,兰州市上消化道疾病患者Hp阳性率为41.12%,其中消化性溃疡患者Hp阳性率高于慢性胃炎患者和胃癌患者。Hp菌株对阿莫西林和呋喃唑酮敏感率高达93.83%,对甲硝唑的敏感率仅为24.69%,耐药率高达67.90%,甚至出现耐多药菌株。

上述耐药趋势与国内外其他地域报道接近,只是耐药率略有差异,可能与样本量大小、试验条件、当地的经济状况等相关。重庆地区Hp对阿莫西林、呋喃唑酮和替硝唑有较好的敏感性,而对甲硝唑和克拉霉素的耐药率分别为91.67%和29.17%〔5〕;西安地区Hp对甲硝唑的耐药率达58.3%,对克拉霉素和左氧氟沙星的耐药率依次为33.3%和21.7%,对阿莫西林和四环素耐药菌株少见〔6〕;上海市人群分离Hp菌株对甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林、呋喃唑酮和左氧氟沙星的耐药率分别为79.0%,23.6%,2.0%,2.0%和33.1%〔4〕。目前临床上治疗Hp感染多采用质子泵抑制剂(protonpump inhibitor,PPI)联合2种抗生素的三联疗法,常用抗生素包括阿莫西林、甲硝唑和克拉霉素等,在一线治疗失败后进行补救治疗中选用呋喃唑酮和左氧氟沙星等药物〔7〕。研究表明,对抗生素出现耐药性是Hp治疗失败的主要原因〔8, 9〕,并且随着抗生素的广泛应用,Hp耐药率逐渐上升,并呈现出地区差异〔10, 11〕。

上述结果提示,甲硝唑不应该作为治疗兰州市Hp感染的一线药物,而阿莫西林和呋喃唑酮敏感率较高,可作为当地Hp感染治疗时的首选药物。

(致谢:感谢甘肃省第二人民医院消化科缪连生,丁向萍,张富花,袁菊霞,陈丽在标本收集中给予的指导和帮助。)

参考文献
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