糖尿病肾病是糖尿病的重要并发症之一,是糖尿病患者死亡的重要原因。早期肾损伤表现为肾小球高滤过状态,继之出现微量蛋白,尿中蛋白含量逐渐增高进入临床蛋白尿期,最后发展成终末期肾功能不全失代偿期。早期判断糖尿病蛋白质来源,了解肾脏的损伤类型及程度,对临床诊断治疗具有重要意义。本研究对糖尿病肾病患者晨尿进行非浓缩尿蛋白电泳(SDS-AGE)分析,并同时检测尿肌酐、尿微白蛋白(UmAIB)及尿al微球蛋白(Ual-MG),以探讨其在早期诊断糖尿病肾损伤的意义。现报告如下。

选取浙江省温州市中西医结合医院门诊及住院的糖尿病患者共120例(其血肌酐及尿素氮均正常),其中男 65例,女55例;年龄43~66岁,平均53.6岁。根据尿蛋白定性试验分为:尿蛋白阴性组45例和阳性组75例。同时设正常对照组20人,为本院体检健康成人。

HYDRASYS全自动电泳仪、配套十二烷基磺酸钠-琼脂糖凝胶和染液(法国SEBIA公司);特种蛋白分析仪(美国贝克曼公司),其配套的贝克曼尿微量蛋白试剂 (海尔生物工程有限公司);C8000全自动化分析仪(美国雅培医疗有限公司),其肌酐试剂(朗道生物制剂有限公司); Ur itest-500B尿十一项分析仪及其配套试管(桂林优利特医疗电子有限公司)。

留取晨尿50 mL,分别进行常规蛋白定性,SDS-AGE尿蛋白电泳,UmAIB,Ua lfMG尿肌酐测定。严格按照试剂说明书进行。尿蛋白经电泳后分为5种类型,以相对分子量为70 kD的白蛋白为界限,分为肾小球型蛋白尿(分子量> 65~70 kD)、肾小管型蛋白尿(分子量< 65~70 kD)、混合型蛋白尿(肾小管及肾小球的蛋白同时并存)、生理型蛋白尿 (少量白蛋白淡染区)、未检出蛋白尿。

采用SPSS 13.0软件进行t检验、χ²检验。

表 1

表 1 糖尿病患者与正常对照组尿蛋白电泳结果比较

表 1 糖尿病患者与正常对照组尿蛋白电泳结果比较

表 2

表 2 糖尿病患者UmA IB和Ual-MG结果 比较[Mg/(mmo·l- Cr) ,x±S]

表 2 糖尿病患者UmA IB和Ual-MG结果 比较[Mg/(mmo·l- Cr) ,x±S]

表 3

表 3 糖尿病患者单项、双项与3项联检阳性率比较( 45例)

表 3 糖尿病患者单项、双项与3项联检阳性率比较( 45例)

糖尿病患者蛋白定性阴性组中尿蛋白电泳出现肾小管型、肾小球型或混合型蛋白尿,判断为尿蛋白电泳阳性,UmAIB/Cr和Ual-MG/C超过正常对照组上限视为阳性。

SDS-AGE利用琼脂糖凝胶的选择性及多孔性,使电泳的迁移率与磨擦系数的反比关系只表现在蛋白分子大小上,根据分子量大小来分离各蛋白组分,可半定量分析多种蛋白条带相对百分含量,该方法无需预浓缩尿液,省时,灵敏度高,最低蛋白检出限可达15 mg/L^{〔1, 2〕},能早期敏感地检测蛋白组分变化及肾脏病变的严重程度和受损部位^〔3〕。UmAIB被认为是肾小球标志性蛋白^〔4〕,正常情况下受电荷屏障作用,绝大部分mA Ib不能通过滤过膜,当早期糖尿病肾小球受损时,则其滤过量超过肾小管重吸收量,致尿中UmA Ib含量升高。近几年有较多研究建议用UmAIb/C r法诊断尿微量蛋白症,其结果与24 h尿白蛋白排泄率有很好相关性^〔5〕。Ual-MG是一种糖尿病,分子量约27 000 kD,由肾小球滤过,几乎全部由肾小管吸收,Ua l-MG增高,反映肾小管早期损害。本研究结果表明,SDS-AGE能全面反映尿蛋白概貌^〔1〕,蛋白SDS-AGE、 UmA1B、U al-MG 3项指标联合检测阳性率高达86.7%,与其他单项或双项检测阳性率比较差异均有统计学意义(P < 0.05),提示联合检测可明显提高检测阳性率。