长期以来中国蔬菜、水果、茶叶等农产品农药残留或残留量超标普遍存在^{〔1, 2〕},而大多数农药均有遗传毒性和细胞毒性,例如溴虫腈对小鼠DNA有损伤作用^〔3〕,鱼藤酮可改变细胞形态,抑制细胞增殖,影响基因表达水平^〔4〕,咪鲜安可诱导人乳腺癌细胞株细胞增殖^〔5〕。辛硫磷是一种高效低毒、广谱有机磷杀虫剂,目前应用于防治水稻、小麦、花生、玉米、棉花、蔬菜、果树、茶、桑等重要农作物的害虫,甚至用于防治仓库害虫、卫生害虫和渔业害虫,应用十分广泛。本研究以小鼠为观察对象,检测辛硫磷对小鼠骨髓细胞增殖的影响。现将结果报告如下。

辛硫磷(phox im),商品名:利尔杀(山东东泰农化有限公司);每1 000 g含辛硫磷(有效成分)400 g,批号: 20050609。

健康昆明种小鼠(武汉生物制品研究所实验动物中心),体重(20.4 ± 1.8) g。动物合格证号:00003418。

受试动物分为阴性对照、4个辛硫磷剂量组^{〔6, 7〕}〔160,80,40和20 mg/(kg·bw)〕和环磷酰胺阳性对照组,每组12只,雌雄各半。溶剂为蒸馏水,使用浓度分别为16,8,4和2 mg/mL,新鲜配制,以0.1 mL/(10g·bw)一次性经口灌胃染毒小鼠。阳性对照组用环磷酰胺以40 m g/(kg·bw)剂量一次性灌胃给药。动物自由进食饮水。

给药22 h后,按1 mg/(kg·bw)剂量腹腔注射秋水仙素,2 h后用颈椎脱臼法处死小鼠,按文献〔8〕方法制备骨髓细胞滴片标本。

每只动物观察2张切片,每张切片观察25个视野,观察5 000个左右细胞,分别计数分裂细胞数和细胞总数。细胞增殖指数=分裂细胞数÷细胞总数×100%。

采用Excel 2003软件进行t检验。

辛硫磷对小鼠骨髓细胞增殖抑制作用见表 1。结果表明,160,80,40 mg/(kg·bw)辛硫磷可不同程度降低小鼠骨髓细胞增殖指数,雄性小鼠较雌性小鼠对辛硫磷的毒性更加敏感。在高、中、低3个剂量组中,雌性小鼠骨髓细胞增殖指数分别为3.61%,3.90%和5.01%,较对照组分别下降 39.62%,34.78%和16.22%;雄性小鼠的细胞增殖指数分别为2.71%,3.45%和4.38%,较对照组分别下降54.98%,42.69%和27.24%。160 m g/(kg·bw)组雄性小鼠细胞增殖指数明显低于雌性小鼠(P <0.05)。20 m g/(kg·bw)辛硫磷对雌雄小鼠骨髓细胞增殖指数均无抑制作用(P > 0.05)。

表 1

表 1 辛硫磷对小鼠骨髓细胞增殖的影响(%, ± s )

表 1 辛硫磷对小鼠骨髓细胞增殖的影响(%, ± s )

辛硫磷对细胞增殖的作用报道较少,且结果不一致。赵忠桂等^〔9〕认为,氰戊菊酯与辛硫磷混合杀虫剂促进小鼠外周血淋巴细胞增殖。另有研究表明,辛硫磷刺激或促进细胞增殖的作用不明显^〔10〕。本研究结果表明,辛硫磷对小鼠骨髓细胞增殖具有抑制作用,并表现出3个特点:(1)无作用剂量 〔为20 mg/(kg·bw)〕与国家谷类、蔬菜、水果辛硫磷残留标准 (为0.05 m g/kg)相差400倍;(2)在作用剂量范围内,剂量越高抑制作用越强,但不呈直线相关关系;(3)雄性小鼠细胞增殖指数的下降幅度均大于雌性小鼠。提示雌性动物较雄性动物对辛硫磷毒性有更强耐受性。此结果与雌性小鼠辛硫磷半数致死量高于雄性小鼠半数致死量一致。辛硫磷抑制骨髓细胞增殖的机制尚未明确。基于部分有机磷农药遗传毒性机制的研究,认为磷酰化是该类农药遗传毒性机制之一。 Choudhary S等^〔11〕研究表明,敌敌畏能促进微管蛋白和微管相关蛋白的磷酰化,从而改变微管蛋白的生物物理特性和稳定性,干扰微管聚合或解聚过程,进而干扰有丝分裂过程。