中国公共卫生  2010, Vol. 26 Issue (4): 448-449   PDF    
引用本文
赖晓华, 肖新才, 王鸣. 珠江河口水体及海、水产品致病性弧菌检测[J]. 中国公共卫生, 2010, 26(4): 448-449.
LAI Xiao-hua, XIAO Xin-cai, WANG Ming. Pathogenic vibrios in aquatic products and environment of Pearl River estuary[J]. Chinese Journal of Public Health, 2010, 26(4): 448-449.
珠江河口水体及海、水产品致病性弧菌检测
赖晓华1, 肖新才2, 王鸣2     
1. 广东省广州市南沙区疾病预防控制中心, 511458;
2. 广东省广州市疾病预防控制中心
收稿日期: 2009-07-19.
基金项目: 广州市医学科学基金项目(2008-YB-196)
作者简介: 赖晓华(1974- ),女,江西安远人,主管医师,硕士,主要从事疾病预防控制工作.
通讯作者: 王鸣
摘要: 目的 了解广东省广州珠江河口水网地区霍乱和副溶血弧菌在不同生态环境中的分布情况及其毒力基因携带特征,分析环境中霍乱弧菌与历史病例分布的关系.方法 根据广州珠江河口地区水网特征进行监测,采集水体样品、甲壳类、贝壳类及鱼、蛙等海(水)产品计1 608份,应用PCR检测毒力基因携带情况;采用脉冲电泳场(PF-GE)法对既往暴发疫情病例分离菌株与本研究分离霍乱菌株进行聚类分析.结果 检出霍乱弧菌污染样品3份,总阳性率为0.19%,不携带毒力基因;PFGE聚类分析显示,与既往病例遗传关联度高;检出副溶血弧菌污染样品487份,总阳性率为30.29%,大部分不携带毒力基因;海水污染率高于其他环境水体,与水体深度、潮汐、水温、pH、盐度等有关.结果 广州珠江河口地区海(水)产品、海水等外环境中存在霍乱及副溶血弧菌污染,外环境副溶血弧菌检出率以贝壳类海产品为最高.结论 广州珠江河口地区海(水)产品、海水等外环境中存在霍乱及副溶血弧菌污染,外环境副溶血弧菌检出率以贝壳类海产品为最高.
关键词: 致病性弧菌     霍乱弧菌     副溶血弧菌     食品卫生     海、水产品    
Pathogenic vibrios in aquatic products and environment of Pearl River estuary
LAI Xiao-hua, XIAO Xin-cai, WANG Ming    
Nansha District Center for Disease Control and Prevention, Guangzhou City Guangzhou 511458, China
Abstract: Objective To study the distribution of Vibrio cholerae and Vibrio parahaem olyticus(Vp)in different ecological environment of the Pearl Riverestuary in Guangzhou and to inves tigate the irtox in genes.There lationship between Vibrio cholerae in the environment and the previous cases was also analyzed.Methods According to main characte ristics of water network of Peal River estuary region in Guangzhou,1608 samples of water,shellfish,fish,frog were collected.Tox in genes of the positive strain were detected by real-time PCR.Clustering analysis of strains isolated from previous cases in out-break and outside environment of this study were carried on with PFG E.Results The total positive rate of Vibriocholerae was 0.19%(3/1 608).No toxin gene was found.The total positive rate of Vp was 34.1% and the most of the strains did not carry tox in gene.Conclusion There are contaminations of Vibrio cholerae and Vibriopa rahaem olyticus in aquatic products and environment of the Peal River estuary in Guangzhou.The highes trate of Vibrio parahaemolyticus was observed in shellfish.
Key words: pathogenic vibrio     Vibrio cholerae     Vibrio parahaemolyticus     food hygiene     sea product     aquatic product    

近年来,广东省发生的食物中毒和食源性疾病暴发疫情中,由于进食海、水产品引起的霍乱暴发、副溶血弧菌中毒疫情占很大比例。为了解广州珠江河口地区海、水产品及水体中霍乱弧菌、副溶血弧菌污染状况和菌型特征,为制定海、水产品卫生管理措施和致病性弧菌防控对策提供科学依据,本研究于2007年10月,根据广州珠江河口地区水网主要特征,对监测区水体及海、水产品中霍乱弧菌、副溶血弧菌污染状况和菌型特征进行了监测。结果报告如下。

1 对象与方法 1.1 对象

2007年10月,根据广州珠江河口地区水网主要特征,对监测区内25个采样点的海水、河渠水及10家养殖场、2 家餐厅养殖水样品、4个市场的海(水)产品进行监测。采集水体(河渠水、海水、海、水产品养殖水);甲壳类(虾、蟹、甲鱼)、 贝壳类(蛤、牡蛎、贝壳)及鱼、蛙等海、水产品计1 608份。

1.2 方法

采样方法参照《霍乱防治手册》〔1〕实施,监测期为1年。霍乱、副溶血弧菌的培养、分离鉴定及副溶血弧菌定量分析分别按照国标GB15984-1995和GB/T4789-2003操作;采用PCR方法检测霍乱弧菌、副溶血弧菌毒力基因携带情况;采用脉冲电泳场(PFGE)法对既本次环境分离霍乱菌株进行聚类分析,采用BioNumerics软件对PFGE图谱进行相似度分析。

1.3 统计分析

利用Excel建立数据库,采用SPSS 11.0软件进行统计分析。

2 结 果 2.1 海、水产品及外环境霍乱弧菌污染状况 2.1.1 霍乱弧菌监测阳性率

共监测采样1 608份,检出霍乱弧菌阳性3份,阳性率0.19%;其中海、水产品样本240份,检出2份阳性,阳性率0.83%,均为甲壳类海、水产品(沙虾、 甲鱼),阳性率4.16%(2/48);河渠水样本720份,检出1份阳性,阳性率0.14%;贝壳类72份、鱼类96份、其他海、水产品类24份、海水样本480份、养殖水样本168份,均未检出。 3株霍乱弧菌血清学分型均为O1群稻叶型,毒力基因检测均为阴性,且均为常见的非流行株。

2.1.2 与不同年份暴发疫情分离株聚类分析

2005年9- 12月,珠江河口南部乡镇发生一起稻叶型霍乱疫情暴发,共分离到病例菌株37株、外环境菌株2株(疫点河渠水、海水各 1株),均为O1群稻叶型,噬菌体-生物分型均为1f型。选择其中2株外环境分离株和8株病例分离株,与本次监测获得的3株进行PFGE分型,共获得7,10,11,14等4个型。其中除1株病例分离株为7型外,其余7株病例分离株与本次甲鱼分离株具有相同的PFGE类型,均为11型;疫点河渠水与本次监测河渠水分离株均为10型;疫点海水分离株与本次沙虾分离菌株均为14型,相似度均为100%;7型与11型相差2条DNA条带,相似度为87.2%;11型与10,14型相似度分别为90.2%和82.4%;10型与14型相似度为98.2%。

2.2 海、水产品及外环境副溶血性弧菌(VP)污染状况(表 1)
表 1 珠江口水体及海(水)产品样品副溶血弧菌检出情况

1 608分样品中,检出副溶血弧菌487株,阳性率为30.29%; 海、水产品样品240份中,检出副溶血弧菌阳性114份,阳性率为47.50%;水体样品1 368份中,检出副溶血弧菌阳性373 份,阳性率为27.27%。海、水产品中,菌落平均密度以甲壳类最高,为1 938.4 MPN/100g,其次为贝壳类 1 810.77MPN/100g,鱼类分离株平均密度最低,为1 247.53 MPN/100 g。不同水体副溶血弧菌污染率为海水(63.30%) >河渠水(45.36%)>养殖水(38.29%);菌落平均密度为海水(1 942.7 ±102.9) MPN/100 g >养殖水(1 704.6 ±77.6) MPN/100 g >河渠水(1 308.7 ±81.9) MPN/100 g。对其中65 株副溶血弧菌进行毒力基因检测,从海产品分离株中检出耐热溶血毒素(TDH)阳性1株,其余均为阴性。

3 讨 论

本次监测结果证实,广州珠江河口地区海、水产品、水体常年存在霍乱弧菌和副溶血弧菌的污染;霍乱弧菌以O1群稻叶型为主,不携带毒力基因,环境霍乱弧菌与当地既往流行菌株间存在很强的遗传相关性。霍乱弧菌是外环境水体、尤其入海口水体的定植菌群,在适宜条件下如温度持续较高,存在大量浮游生物等,可能造成产毒霍乱弧菌的大量增殖,然后通过水和食物进入人体引起散发和流行〔2〕。

本次调查发现,环境霍乱弧菌与当地致病株存在遗传相关但不携带毒力基因,推测具有致病性的霍乱弧菌在水体、外环境的多重压力作用下,逐渐丢失了致病毒力基因,并长期存在于外环境中。有研究证实〔3〕,埃尔托型霍乱弧菌越冬中的变异株均有一定的毒力,且在一定的环境条件下能恢复成流行株,因此,持续监测外环境中霍乱弧菌污染情况,并分析毒力基因的变异,对预警和预报霍乱疫情具有重要意义。

本次调查发现,海、水产品的副溶血弧菌(VP)污染率低于内地市售海、水产品〔4, 5, 6〕,推测可能是内地存养过程中交叉污染所致。而养殖水中海、水产品的VP污染率差别较小,提示养殖环境中存在交叉污染的可能。本研究还发现,海水产品污染率明显高于河渠水,也高于养殖水产品,这可能与副溶血弧菌嗜盐生长特性有关,也可能是不同海域、或者相同海域不同地区海、水产品VP污染率不同的原因。

耐热溶血素(TDH)、耐热相关溶血素(TRH)是VP的致病性相关基因,但携带率很低〔7, 8〕。本研究选取65株有代表性菌株,仅发现1株TDH阳性,未检出TRH基因,与文献报道一致〔9〕,表明广州珠江河口地区绝大部分海、水产品、水体等环境中的VP不携带TRH和TDH基因。海、水产品毒力基因携带情况与腹泻病例的关系有待进一步研究。

参考文献
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