中国公共卫生  2010, Vol. 26 Issue (4): 392-394   PDF    
引用本文
李翔, 董红军, 方挺, 胡逢蛟, 刘建毅, 劳旭影. 宁波市H1N1型流感病毒监测分析[J]. 中国公共卫生, 2010, 26(4): 392-394.
LI Xiang, DONG Hong-jun, FANG Ting, et al. H1N1 influenza surveillance in Ningbo city, 2004-2008[J]. Chinese Journal of Public Health, 2010, 26(4): 392-394.
宁波市H1N1型流感病毒监测分析
李翔, 董红军, 方挺, 胡逢蛟, 刘建毅, 劳旭影    
浙江省宁波市疾病预防控制中心, 315010
收稿日期: 2009-07-23.
作者简介: 李翔(1981- ),男,山西人,医师,硕士,主要从事传染病预防控制工作.
摘要: 目的 了解浙江省宁波市2004-2008年流感流行状况和H1N1型流感变异情况,探索流行规律并为流感防治提供科学依据.方法 建立监测哨点,采用流感样病例就诊百分比(ILI%)为流行病学监测指标,并对送检的流感样病例咽拭子或含漱液标本进行病毒分离和鉴定.结果 2004年1月-2008年12月,宁波市4家监测哨点医院共报告流感样病例99 333例,流感样病例百分比波动在0.77%~11.66%,平均为4.49%(99 333/2 210 318);共送检流感样病例标本5 784份,分离出流感病毒686株,平均分离率为11.86%(4.14%~22.32%),其中甲1型163株,甲3型492株,乙型31株.宁波市流感活动的季节性规律表现为每年春末(3-4月)和初秋(8-9月)2个ILI%高峰.2006年流行的H1N1亚型与H1N1疫苗株NewCaledonia/20/1999在血凝素蛋白重链(HA1)区氨基酸的差异为7个,2008年流行的H1N1亚型与H1N1型疫苗株Brisbane-59-2007比较,差异已达到6个位点以上.结论 ILI%的异常变化与流感病毒变异活动有关;H1N1型流感毒株变异活动加强.
关键词: H1N1     流行性感冒     流行病学监测     流感病毒    
H1N1 influenza surveillance in Ningbo city, 2004-2008
LI Xiang, DONG Hong-jun, FANG Ting    
Ningbo Municipal Center for Disease Control and Prevention Ningbo 315010, China
Abstract: Objective To understand the trend of influenza epidem is and to explore the variation of the viruses isolated.Methods Surveillance sites were established Data of influenza-like illness(ILI%)was collected and analyzed Throats wab and gargling specie ens collected from influenza-like cases were isolated with MDCK cells and embryonated eggs aged 9-11 days.Results A total of 99 333 influenza-like illnesses were reported from 2004 to 2008,accounted for 4.49%(99 333/2 210 318) of the total outpatients,with 5 784 specie ens collected and 686 virus isolated Among the virusisolation,there were 163 cases of influenza H1N1 virus,492 cases of influenza H3N2 virus,and 31 cases of influenza B Victoria virus The average isolation rate of influenza virus was 11.86%(4.14%-22.32%).The epidemis of influenza was seasonal with two peaks of LI% in the end of spring(March and April) and the beginning of autumn(A ugust and September).When comparing amino acid sequences of HA1 protein domain of H1N1 vimses isolated in 2006 with those of NewCaledonia/20/1999(H1N1)vinrs,it was revealed that there were 7 differences in amino acid sequences bettyeen them.There were 6 differences in amino acid sequences of HA1 protein domain bettyeen H1N1 vimses isolated in 2008 and Bribane-59-2007(H1N1) vims.Conclusion The change of LI% is associated with influenza vims variation The mutation of H1N1 is active
Key words: H1N1     influenza     epidemiological monitoring     influenza virus    

按照《全国流感监测方案》〔1〕要求,2004年浙江省宁波市设立4所流感监测哨点医院,进行流感流行病学和病原学监测。本研究对2004年1月-2008年12月宁波市流感流行以及病毒变异情况进行分析。结果报告如下。

1 对象与方法1.1 对象

选择呼吸道病人就诊较多的宁波市第一医院、宁波市妇儿医院,慈溪市人民医院、宁海县人民医院为流感监测哨点,对内儿科门诊、急诊就诊病例总数和流感样病例(体温 ≥38℃,伴有咳嗽,或咽喉疼痛、全身疼痛等症状的急性呼吸道感染病例)进行监测报告;监测时间为2004年1月-2008 年12月。

1.2 方法 1.2.1 监测采样

由4家监测哨点医院和11家县(市)、区疾病预防控制中心和1家病毒研究室组成监测网络。监测哨点医院指定专人负责,每周逐日对内儿科门诊、急诊就诊病例总数和流感样病例进行统计,并上报宁波市疾病预防控制中心。由监测哨点医院每周采集10~15份流感样病例的咽拭子或含漱液标本,同时填写流感样病人采样登记表,标本4℃ 条件下保存,并24 h内送至宁波市疾病预防控制中心病毒室进行病毒分离和鉴定。

1.2.2 病毒分离与鉴定

参照文献〔2〕采用狗肾细胞对病例的咽拭子或含漱液标本进行流感病毒分离,检测阳性毒株。 对收获的病毒液采用红细胞凝集抑制试验(WS 285-2008) 进行流感病毒鉴定。

1.2.3 病毒HA 1区基因序列测定

随机选择分离鉴定毒株由上海英骏生物技术有限公司进行血凝素蛋白重链HA 1区核苷酸序列测定并推导相应氨基酸。WHO推荐疫苗株的 HA 1基因序列,从美国国立卫生研究院国家生物技术中心 (NCB I)的GenBank上下载。

1.3 序列分析

应用BLAST软件与WHO推荐的疫苗株A/ New Caledonia/20/1999 Vaccine〔3〕氨基酸序列进行对比。

2 结 果 2.1 流感样病例就诊百分比变化(表 1)
表 1 宁波市2004 - 2008年流感样病例就诊百分比( %)年

2004年1月- 2008年12月,宁波市4个监测哨点医院共报告流感样病例 99 333例,流感样病例百分比为4.49%,波动在0.77%~ 11.66%。线性相关分析表明,2004,2006-2008年3,4月,流感样病例百分比出现明显高峰,8,9月高峰并不明显,呈一定的正相关趋势;但2005年流感样病例百分比从8月开始到 2006年3,4月持续处于较高水平,与其他4年呈负相关趋势。

2.2 流感病毒不同型别分离时间(表 2)
表 2 宁波市2004 - 2008年流感病毒主要型别分离时间分布(株)型

2004-2008年4 个监测哨点医院共送检流感样病例标本5 784份,分离到流感病毒686株,分离率4.14%~22.32%,平均为11.86%。 其中甲1型(H1N1)163株,甲3型(H3N2)492株,乙型(B) 31株。2004年170株,未分离到H1N1型;2005年270株,其中H1N1型36株,占13.33%;2006年116株,其中H1N1型 93株,占80.17%;2007年87株,其中H1N1型3株,占 3.45%;2008年43株,其中H1N1型31株,占72.09%。表 2 可见,2004-2005年流感病毒分离株以H3N2型为主;从 2005年9月开始持续到2006年9月,流感病毒分离株以 H1N1型为主。这一变化与同期流感样病例就诊百分比对照,提示2005年下半年甲1(H1N1)型流感毒株活动增强,疑似发生变异。

2.3 流感病毒基因氨基酸序列分析

氨基酸序列分析结果显示,2006年H1N1亚型流感病毒是2005年9月以后流行株的延伸,但与2005年上半年的H1N1型(6株)不同。2006年流行的H1N1亚型与H1N1疫苗株New Caledonia/20/1999在 HA1区氨基酸的差异表现为:第82位的苏氨酸变成了赖氨酸、第94位的酪氨酸变成了组氨酸、第146位的精氨酸变成了赖氨酸、第166位的缬氨酸变成了丙氨酸、第209位的精氨酸变成了赖氨酸、第252位的色氨酸变成了精氨酸、第267位的苏氨酸变成了天冬酰胺。表明H1N1亚型流感病毒的抗原性差异较大。

2008年H1N1亚型流感病毒与H1N1型疫苗株Brisbane -59-2007比较至少有6个位点发生变化,分别为第47位的异亮氨酸变成了赖氨酸、第68位的谷氨酸变成了甘氨酸、第 83位的赖氨酸变成了精氨酸、第140位的谷氨酸变成了赖氨酸、第188位的赖氨酸变成了蛋氨酸、第193位的苏氨酸变成了赖氨酸。表明2008年的H1N1型流感病毒已经发生较大的变异,可能为2008年的H1N1型流感病毒的流行强于 H3N2型的原因。

3 讨 论

监测结果显示,L I%的异常变化与流感病毒变异活动有关,2005年H1N1变异较大时,L I%也比往年异常升高,与相关研究结果一致〔4〕,这一时期流感病毒优势株也主要以 H1N1型为主,而往年优势株则为H3N2。病毒基因序列分析结果提示,2005年9月-2006年的H1N1型流感病毒开始出现抗原性上的差异,到2008年下半年已经发生较大变异。华东地区江苏省的监测结果显示,2005年1-4月的主要分离毒株为B型(Yamagata系),9月开始分离到H1N1型毒株(该亚型毒株在江苏省已经2年多未监测到),自此H1N1型流感流行呈上升态势,成为9月以后流感暴发的主要毒株〔5〕。深圳市的监测结果也表明,2006年的流行株发生较大化,H1N1 亚型活动逐步加强,H3N2活动明显减弱〔6〕。研究显示,流感病毒基因的突变,导致氨基酸序列替换≥4个,且同时分布在 ≥2个抗原决定簇区,才具有流行病学意义〔7〕。本研究限于条件,尚无法探究H1N1病毒变异的全貌,但结果提示,2005年以来,宁波市流感病毒H1N1毒株变异明显增强。

参考文献
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