S 香椿叶水提物对小鼠炎症抑制作用
  中国公共卫生  2010, Vol. 26 Issue (3): 334-335   PDF    
引用本文
阮志鹏, 陈玉丽, 林丽珊. 香椿叶水提物对小鼠炎症抑制作用[J]. 中国公共卫生, 2010, 26(3): 334-335.
RUAN Zhi-peng, CHEN Yu-li, LIN Li-shan. Anti-inflammation effect and its mechanism of aqueous extract from Toona sinensis[J]. Chinese Journal of Public Health, 2010, 26(3): 334-335.
香椿叶水提物对小鼠炎症抑制作用
阮志鹏, 陈玉丽, 林丽珊    
莆田学院医学院药学系, 福建莆田351100
收稿日期: 2009-07-25.
基金项目: 福建省自然科学基金(C0540025)
作者简介: 阮志鹏(1969- ),男,福建仙游人,副教授,本科,主要从事药物代谢及药理学教学研究。
摘要: 目的 研究香椿叶水提物抗炎作用机制。方法 观察香椿叶水提物对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀、角叉菜胶所致大鼠足肿胀、炎症组织和血清中前列腺素E2(PGE2)、一氧化氮(NO)含量的影响。结果 0.5,1.5 g/kg香椿叶水提物灌胃给药能明显抑制对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀,抑制率分别为33.85%和46.98%;对照组大鼠注射角叉菜胶2,4 h后,足跖肿胀度为(0.68±0.19),(1.12±0.10)mL,6 h时开始恢复;对角叉菜胶所致正常大鼠足肿胀,香椿叶水提物高、低剂量组注射3和2 h后与对照组比较可明显抑制;低、高剂量香椿叶水提物可降低肿胀足爪组织中NO及PG E2含量;低剂量香椿叶水提物可降低血清中NO含量。结论 香椿叶水提物可能通过影响炎症介质释放和减少NO的生成而起到抑制角叉菜胶性大鼠足肿胀作用。
关键词: 香椿     抗炎     一氧化氮     前列腺素E2    
Anti-inflammation effect and its mechanism of aqueous extract from Toona sinensis
RUAN Zhi-peng, CHEN Yu-li, LIN Li-shan    
Pharmacy Department, Putian University, Putian 351100, China
Abstract: Objective To study the anti-inflammatory effect of aqueous extract from Toona sinensis and its mechanism.Methods The contents of prostaglandin EZ(PGE2)and nitric oxide (NO)in seiwn and tissue were detected in rats with xylene-inducedear edema and carrageenin-induced pawedema and treated with gastric gavage of aqueous extract form Toona sinensis.Results Aqueous extmctfrom Toona sinensis showed amarked suppressive efffecton xylene-inducedear edema of mtsw ith the inhibition rotes of 33.85% and 46.98% at the doses of 0.5 and 1.5 g/kg.The Toona sinensis extract reduced the content of NO in seiwn at the dosage of 1.5 g/kg and the contents of NO,PGEZ in inflammatory tissue at the dosages of 0.5 and 1.5 g/kg.Conclusion Toona sinensis has a marked inhibitive effect on carrageenin-induced pawedem a in rots The effect may herelated to the inhibition of inflamm tatory mediators.
Key words: Toona sinensis     anti-inflammatory effect     nitric oxide     prostaglandin E2    

楝科植物香椿(Toona sinens is),又名猪椿、红椿等。是中国著名的药食两用木本植物,其根皮、树皮、芽、叶、果实均可作为中药,已有上千年的药用和食用历史。现代药理学研究表明,香椿的一些成分具有杀菌、抗炎、镇痛、抗癌、抑制血小板聚集、抗氧化、降血糖等作用〔1〕。有研究表明,香椿总黄酮具有明显的抗炎、化痰和免疫增强作用〔2〕。本研究进一步对其抗炎作用及其有关作用机制进行探讨。

1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1　实验动物

雄性SD大鼠40只,体重160~180 g;雄性昆明种小鼠40只,体重18~22 g (福建医科大学实验动物中心)。

1.1.2　药品与试剂

角叉菜胶(美国SIGMA公司);醋酸地塞米松片(浙江仙琚制药股份有限公司,批号:071055);阿司匹林(合肥久联制药有限公司,批号:20050702);一氧化氮 (NO)检测试剂盒(南京建成生物工程研究所)。

1.1.3　仪器

自制毛细管放大测量装置;ESJ182-4电子天平 (沈阳龙腾电子仪器有限公司);UV2750-PC紫外可见分光光度计(上海欣茂仪器有限公司)。

1.2 方法 1.2.1 香椿叶水提物制备

于2008年4-5月采香椿叶于莆田市郊,在室温(25~30℃)下晾干15~20 d,加水煎煮2次,时间分别为2 h,合并煎煮液后,静置24 h过滤,浓缩至 1 g生药/mL。

1.2.2 对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响〔3〕

昆明种小鼠 40只,随机分为4组:对照组和3组实验组(香椿叶水提物高、低剂量组和阿司匹林组)。各实验组小鼠每日灌胃给药1次,对照组给等量的生理盐水,连续3 d,末次给药后1 h,各组小鼠右耳涂二甲苯0.05 mL/只,左耳作对照,15 min后处死小鼠,用8 mm打孔器分别在左右耳同部位取耳片,分别称重,以2耳之差作为肿胀度,按文献〔3〕求解抑制率。

1.2.3 角叉菜胶所致正常大鼠足肿胀的影响〔2〕

SD大鼠 40只随机分为4组,香椿叶水提物高、低剂量组、地塞米松组和对照组,每组10只。在大鼠右后足踝处划线,用自制毛细管放大测量装置测定正常情况下大鼠右后足体积。实验前大鼠禁食16 h,香椿叶水提物高、低剂量组每只分别灌胃给药 1.5,0.5 g/kg,阳性对照组每只灌胃5 mg/kg地塞米松,对照组每只灌胃0.2 mL/10 g生理盐水。给药1 h后于后足趾腱膜下注射新鲜配置的1%角叉菜胶0.1 mL致炎。分别在致炎前和致炎后0.5,1,2,3,4,6 h按玻璃容器法测定大鼠右后足爪容积,以各鼠致炎前后足容积的差值为肿胀度。

1.2.4　大鼠血和足爪组织样本

按1.2.3方法致炎,4 h后于股动脉放血处死,血标本3 000 r/min离心10 min,取上清 -20℃冰箱保存待测生化指标。于大鼠右踝关节处取下脚掌去皮后称重剪碎,按20%浓度浸泡于生理盐水中2 h,取上清-20℃保存待测生化指标。

1.2.5　前列腺素E2(PGE2)含量测定

取0.5 mL组织浸泡液和0.1 mL血清样本,加入0.5 mol/L KOH甲醇液2 mL,50 ℃水浴中异构化20 min,用甲醇稀释至5 mL,以岛津UV-260型紫外分光光度仪于278 nm处测定PGE2含量,以吸光度 (A)值表示。

1.2.6 一氧化氮(NO)含量测定

取0.5 mL组织浸泡液和0.1 mL血清样本,按照试剂盒说明书操作。

1.3 统计分析

应用ExcelVBA自编程序进行数据处理,组间均数两两比较采用t检验。

2 结 果

2.1 各组小鼠二甲苯诱发耳肿胀状况(表 1)

表 1可见,香椿叶水提物高、低剂量组肿胀度与对照组比较,差异均有统计学意义(P < 0.01),表明香椿叶水提取物对二甲苯诱发的小鼠耳肿胀有抑制作用。

表 1 各组小鼠二甲苯诱发耳肿胀状况( ± s , n = 10)
2.2　各组大鼠角叉菜胶所致足肿胀状况

　结果表明,角叉菜胶注射后可引起大鼠足爪肿胀反应,对照组注射角叉菜胶后 2 h,大鼠足跖肿胀度为(0.68 ±0.19) mL,4 h的时候炎症反应最为严重,肿胀度为(1.12 ±0.10) mL,6 h时开始恢复。香椿叶水提物对角叉菜胶所致正常大鼠足肿胀有抑制作用,低剂量给药组鼠足跖肿胀度与对照组比较,0.5 h时开始下降,3 h后差异有统计学意义(P < 0.01);高剂量给药组与对照组比较,0.5 h时开始下降,2 h后差异有统计学意义(P < 0.01);地塞米松组与对照组比较,0.5 h开始下降,1 h后差异有统计学意义(P < 0.01)。

2.3 各组大鼠血清和足爪组织中PGE2和NO含量(表 2)

表 2可见,与对照组比较,地塞米松组、香椿叶水提物高剂量组肿胀足爪组织中PGE2含量明显降低(P < 0.01或P < 0.05),而各组血清中PGE2含量未见变化。与对照组比较,地塞米松组、香椿叶水提物高、低剂量组肿胀足爪组织中NO含量明显降低(P < 0.01或P < 0.05),地塞注松组、香椿叶水提物高剂量组血清NO含量明显降低(P <0.01)。

表 2 各组大鼠血清和足爪组织中PGE2 和NO含量( ± s, n = 10)
3 讨 论

香椿是一种药食兼用的植物,香椿叶含有黄酮、苷类、挥发油等多种成分。黄酮类化合物多具有抗炎、抗病毒、利胆、强心和镇痛等作用〔4〕。本研究表明,香椿叶水提物高剂量组可明显抑制二甲苯致模型小鼠耳肿胀,香椿叶水提物高、低剂量组均有明显抑制角叉菜胶所致足肿胀模型大鼠足爪的肿胀程度,表明其对急性炎症有抑制作用,可能与黄酮类化合物有关,具体成分有待进一步研究。

角叉菜胶致大鼠足肿胀模型发生炎症的原因与注射位 PGE2的升高有关〔5〕。本研究表明,香椿叶水提物能明显降低大鼠足爪局部炎症组织中PGE2含量,提示其抗炎机制与减少炎症组织中PGE2合成有关。各组大鼠血清PGE2含量均未有明显变化。这是由于血清中PGE2主要来源于血小板、血管内皮细胞等细胞,炎症反应中这些细胞没有受到明显刺激,血清中PGE2含量就没有明显变化,而局部炎症组织因致炎物质的刺激使PGE2合成增多。

研究表明,炎症介质是通过信号转导产生的〔6〕,急、慢性炎症的发生均与NO有关〔7〕。本研究中,香椿叶水提物可明显抑制足肿胀,表明其具有抗炎作用,与地塞米松一样能明显降低大鼠足爪局部炎症组织和血清中NO的含量,提示香椿叶水提物抗炎机制与抑制NO生成也有关。

参考文献
〔1〕 陈玉丽,阮志鹏,林丽珊,等.香椿的化学成分及药理作用研究进展[J].长治医学院学报,2008,22(4):315-317.
〔2〕 薛玲,李长峰.香椿芽总黄酮的初步药效学实验[J].山东中医杂志,2004,23(11):686.
〔3〕 徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M].3版.北京:人民卫生出版社,2002:882-915.
〔4〕 邓家刚,郭力城.抗炎中药活性成分的研究进展[J].现代医药卫生,2007,23(2):201.
〔5〕 肖百全,朱少璇,杨威,等.角叉菜胶致大鼠足肿胀模型探讨及其机制研究[J].中国实用医药,2008,3(23):65.
〔6〕 罗炳德,吕阳,谭飞,等.青蒿琥酯地脂多糖诱导RAW264.7细胞保护作用[J].中国公共卫生,2008,24(1):54-55.
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