2009, Vol. 25
近年来, 随着人们生活质量的不断提高, 肥胖的发病率也越来越高。肥胖容易导致或诱发多种疾病的发生, 如动脉硬化、冠心病、高血压等。因此, 必须寻找一种控制或预防肥胖发生的有效措施。大豆异黄酮是一种植物雌激素, 能够结合雌激素受体α (ERα)和β(ERβ)发挥其雌激素样作用。有研究表明, 大豆异黄酮可以降低肥胖大鼠的体重〔1〕, 改善高脂大鼠的血脂〔2〕, 但其对去卵巢大鼠肥胖的预防作用的研究较少。本研究采用去卵巢模型来模拟绝经后女性, 观察大豆异黄酮对去卵巢大鼠肥胖预防作用及其对血脂、血糖水平的影响, 为降低绝经后女性肥胖发生率、提高其生活质量, 开发大豆异黄酮的生物学功能提供实验依据。
1 对象与方法 1.1 材料 1.1.1 受试样品大豆异黄酮总含量为40%(山东长润生物有限公司)。
1.1.2 实验动物清洁级8周龄雌性SD大鼠42只(上海斯莱克实验动物中心, 批号: SCXK (沪) 2003-0003), 体重为160~180 g。
1.1.3 主要仪器与试剂722型可见光分光广度计(山东高密彩虹分析仪器有限公司)。泰博血糖试纸(台湾泰博科技股份有限公司); 甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)试剂盒(北京中生北控生物科技股份有限公司)。
1.2 方法 1.2.1 动物分组及处理大鼠在哈尔滨医科大学实验动物中心适应性喂养1周后, 根据体重随机分为6组: 1组为单纯开腹术对照组(SHAM), 其他5组在无菌条件下切除双侧卵巢, 分别为:去卵巢对照组(OVX), 大豆异黄酮低剂量组(L-SI)、中剂量组(M-SI)、高剂量组(H-SI)和雌激素对照组(EC)。所有大鼠术前均用2.0%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉[40 mg/(kg·bw)], 术后各组同时给予高脂饲料喂养, 第4周末处死大鼠, 进行各指标检测。
1.2.2 高脂饲料配制以及灌胃剂量的选择在美国推荐动物饲料配方(AIN-93) 〔3〕基础上进行配制, 根据文献〔4〕及预实验结果, 确定大豆异黄酮低、中、高剂量组灌胃剂量(纯大豆异黄酮含量)分别为30, 90, 270 mg/(kg·bw); 雌激素组用乙烯雌酚灌胃, 剂量为30 μg/(kg·bw), 对照组给予等体积的蒸馏水。
1.2.3 检测指标(1)体重:试验期间每周称量体重1次; (2)各脏器重量:第4周末处死大鼠, 采集宫旁脂肪、肾周脂肪、子宫、肝脏、肾脏进行称量; (3)血脂和血糖:第2和4周末时进行甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和血糖的检测。以酶法用722型可见光分光光度计测定血脂水平, 采全血用血糖试纸对血糖进行检测。
1.3 统计分析应用SPSS13.0统计软件进行分析, 组间差异采用方差分析, 各组与OVX比较采用最小显著差法(LSD)-t检验。
2 结果 2.1 大豆异黄酮对去卵巢大鼠体重、肾周脂肪和宫旁脂肪的影响(表 1)
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表 1 大豆异黄酮对去卵巢大鼠体重、肾周脂肪和宫旁脂肪重量影响(x±s) |
由表 1可知, OVX大鼠体重明显高于SHAM (P=0.002);与OVX相比, M-SI、H-SI和EC大鼠体重分别降低了5.6%, 8.5%, 12.9%, 差异均有统计学意义(P < 0.05或P < 0.01);而L-SI大鼠体重无明显变化。M-SI、HSI、EC肾周脂肪和宫旁脂肪重量均明显低于OVX (P < 0.05或P < 0.01); L-SI肾周脂肪和宫旁脂肪重量与OVX相比, 差异无统计学意义。
2.2 大豆异黄酮对去卵巢大鼠各脏器脏/体比值的影响与SHAM比较, OVX大鼠子宫重量明显降低(P=0.023), 萎缩严重。与OVX相比, H-SI, EC大鼠子宫脏/体比值明显增加(P < 0.05), 而L-SI、M-SI无明显变化。大豆异黄酮对所有大鼠肝脏、肾脏的脏/体比值无明显影响。
2.3 大豆异黄酮对去卵巢大鼠血脂的影响(表 2)|
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表 2 大豆异黄酮对去卵巢大鼠血脂的影响(x±s, mmol/L) |
与OVX相比, 第2周末M-SI、H-SI、EC大鼠血清中TC、TG水平均明显降低(P < 0.01), L-SI大鼠的HDL-C水平明显升高(P=0.000);与OVX相比, 第4周末L-SI、M-SI、EC血清中TC水平均明显降低(P < 0.05); H-SI血清中TG水平明显降低, EC血清中TG水平明显升高(P < 0.05或P < 0.01), L-SI、H-SI血清中HDL-C水平明显升高(P < 0.05)。
2.4 大豆异黄酮对去卵巢大鼠血糖水平的影响第2周末时, SHAM、OVX、L-SI、M-SI、H-SI、EC血糖分别为(4.67±1.05), (4.05±0.84), (4.45±0.67), (4.16±0.68), (4.05±0.69), (4.71±0.45) mmol/L。第4周末时, M-SI, H-SI, EC血糖分别为(3.91±0.45), (4.15±0.69), (3.80±0.90) mmol/L, 均明显低于OVX组(5.15±1.35) mmol/L (P < 0.05); SHAM和L-SI分别为(4.78±0.36), (4.49±0.83) mmol/L, 与OVX相比, 差异无统计学意义。与第2周末时比较, 第4周末时OVX血糖升高了14.44%, 而L-SI、M-SI、H-SI血糖分别升高了0.9%, -6.0%, 2.5%, 可见大豆异黄酮具有明显的抑制血糖升高的作用。
3 讨论本研究发现, 去卵巢后大鼠子宫萎缩、重量明显降低, 而体重明显升高, 去卵巢模型建立成功。在利用高脂饲料诱导肥胖的同时给予大豆异黄酮, 以验证大豆异黄酮对肥胖发生的预防作用。结果表明, 大豆异黄酮对去卵巢大鼠体重的增加及腹部脂肪的沉积具有良好的抑制作用, 与以前的研究一致〔5-8〕。Kim HK〔7〕认为其机制是通过诱导脂肪细胞编程性死亡来减轻脂肪的重量。本研究还发现, 大豆异黄酮可以明显降低去卵巢大鼠的血糖水平, 减小血糖增加的幅度; 并且可以改善去卵巢大鼠的血脂水平, 且中期(第2周末)较末期(第4周末)效果好。可能是由于在较长期的大豆异黄酮刺激下, 大鼠产生了适应性的结果。然而大豆异黄酮对去卵巢大鼠血脂长期的影响仍需要扩大试验周期, 进行深入研究。
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