世界卫生组织(WHO)对健康的定义是躯体、心理和社会适应3方面完满的一种状况, 而不仅仅是指没有疾病或虚弱^〔1〕。已知应激反应是心理、生理、行为的综合表现, 会引起神经、内分泌、免疫机制中介的心理生理反应^〔2〕。因此, 在生物、心理、社会等各种应激源的作用下, 反映躯体健康状况的实验室检测指标也可能发生相应的改变。而HLA-DQB1等位基因与应激免疫有关^〔3〕。因此, 研究探讨心理健康与实验室检测指标的关系, 并且在分子水平研究HLA-DQB1等位基因与心理健康的关系, 旨在了解心理健康状态对躯体疾病发生的影响程度及个体差异的基因基础。

在某大学期末考试前学生及某公司软件开发程序员中随机抽取287人。

采用症状自评量表(SCL-90)^〔4〕评定心理健康状况。施测前由调查员用统一的指导语对问卷进行简单说明, 然后统一发放问卷, 要求受评者根据自己的实际情况独立填写问卷, 当场收回。症状严重程度采用5级评分, 使用心理测量软件(惠诚心理测验软件综合系统5.0版)进行计算。筛选出总分> 160分, 或阳性项目数> 43, 或任一因子分> 2者共50人作为实验组(心理异常组), 其中男性21人, 女性29人, 年龄(27.18±13.04)岁; 在其余237人中(心理正常组)随机抽取37人作为对照组, 其中男性15人, 女性22人, 年龄(30.11±12.53)岁。

采集实验对象静脉全血4 mL, 包括乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K₂)抗凝全血1 mL及促凝血3 mL, 用全自动生化分析仪(日立7600)检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(SST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、白球比(A/G)、肌酐(Cre)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆固醇(Chol)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)及超敏C反应蛋白(hs-CPR)12项血清生化检测项目。

DNA提取:按文献〔3〕传统酚抽提法从EDTA-K₂抗凝全血中提取DNA。针对HLA-DQB1等位基因的PCR扩增:针对HLA-DQB1等位基因第2外显子设计引物, 由宝生物工程(大连)有限公司合成, 采用北京天根生化科技有限公司提供的2 × Taq PCR MasterMix试剂对上述标本HLA-DQB1等位基因* 02、* 03、* 0301、* 04、* 05、* 06cdn9、* 06位点, 参数按文献〔5〕进行扩增。PCR产物以2%琼脂糖凝胶[含0.5 μg/mL溴化乙锭(EB)], 缓冲液为0.5 × TBE, 10 V/cm电压电泳30 min, 置紫外投射仪下观察结果。

应用SPSS 13.0软件进行统计分析。运用χ²检验分析心理健康异常组与对照组之间HLA-DQB1等位基因分布的差异, 运用两独立样本t检验分析心理健康状态对血清生化指标的影响, 并运用一般线性模型分析心理健康状态及基因位点对血清生化指标的影响。

图 1

图 1 HLA-DQB1等位基因凝胶电泳结果

图 1可见, 此标本HLA-DQB1 * 03位点阳性, 且目的条带的序列长度与设计序列长度相符。

心理健康状态异常组与对照组HLA-DQB1等位基因分布频率比较, 可见HLA-DQB1 * 02位点的分布频率升高, 差异有统计学意义(P < 0.05), 而其余位点的分布频率差异无统计学意义(P > 0.05)。

心理健康状态异常组与对照组比较, 可见HDL降低, 分别为(1.11±0.29) mmol/L, (1.35±0.35) mmol/L, LDL/HDL升高, 分别为(2.02±0.51), (1.71±0.62), 差异有统计学意义(P < 0.05)。

运用一般线性模型分析心理健康状态及基因位点对血清生化实验室检测项目的影响, 心理健康状态异常组与对照组比较, 可见HLA-DQB1 * 02和* 03位点及心理健康异常使A/G升高, 分别为(1.81±0.25), (1.72±0.23), 差异有统计学意义(P < 0.05); HLA-DQB1 * 02和* 06位点及心理健康异常使GLU降低, 分别为(4.90±0.98), (5.15±1.79) mmol/L, 差异有统计学意义(P < 0.05); HLA-DQB1 * 06位点及心理健康异常使HDL降低、LDL/HDL升高, 差异有统计学意义(P < 0.05);而HLA-DQB1 * 04和* 05位点及心理健康异常对所测血清生化检测指标的影响, 差异无统计学意义(P > 0. 05)。

本研究发现, 心理健康状态异常可以导致实验室检测指标的变化, HDL升高、LDL /HDL降低, 可能是由于应激反应刺激下丘脑-垂体-肾上腺皮质系统的激活, 从而刺激促肾上腺皮质激素和肾上腺皮质激素的释放, 导致心理的、躯体的和内脏的功能改变^〔6〕, 这可能是心理健康异常导致躯体疾病的实验基础; 而从分子水平研究可见, 由于HLA-DQB1等位基因参与分析后, 对血清生化检测指标在心理健康状态异常与正常者之间的统计分析结果有所改变, A/G、LDL/HDL升高, HDL、GLU降低。因此, 认为HLA-DQB1等位基因对血清生化检测指标也存在影响, 即存在个体差异。因此, 实验室指标变化过程可能是心理因素导致某些疾病的致病环节, 而HLA-DQB1等位基因位点也可能是影响心理健康状态的因素之一。据此, 认为心理健康状态的测评可以通过部分实验室检测指标提供客观的诊断依据, 并且与HLA-DQB1等位基因表型有关。但由于本研究实验室检测指标都在正常范围内, 升高或降低都是相对而言, 因此若要作为心理健康状况的诊断参考依据, 需进一步确定其参考标准。