中国公共卫生  2009, Vol. 25 Issue (7): 795-796   PDF    
深圳市HIV阳性人群HPV病毒载量分析
温贵华1, 刘晋洪1, 黄玲1, 申杰1, 刘婷1, 郭夏娜1, 翁琼琳1, 邓文国2     
1. 深圳市宝安区慢性病防治院检验科, 518133;
2. 广州达安临床检验中心
摘要: 目的 了解深圳市人类免疫缺陷病毒(HIV)阳性及阴性人群中人乳头瘤病毒(HPV)感染情况. 方法 荧光定量PCR法检测HPV感染情况以及病毒载量. 结果 40例HIV阳性组中HPV阳性20例, 感染率为50.0%, 在HIV阴性组中HPV阳性7例, 感染率为17.5%, 差异有统计学意义(P < 0.05);HIV阳性组HPV病毒载量比HIV阴性组至少高1个数量级(P < 0.05);检出16种HPV亚型, 其中包括11种高危型, 5种低危型, 感染率最高的为16型(5例), 其次为52型(4例)、58型(3例). 结论 HIV感染人群中HPV感染率、病毒载量较高, 且多型感染情况较严重.
关键词人类免疫缺陷病毒(HIV)     人乳头瘤病毒(HPV)     病毒分型     病毒载量    
HPV infection status and viral load in HIV positive people in Shenzhen city
WEN Gui-hua, LIU Jin-hong, HUANG Lin, et al     
Baoan District Chronic Disease Control Hospital, Shenzhen 518133, China
Abstract: Objective To research human papilloma virus (HPV) infection status in human immunodeficiency virus (HIV) positive people and in HIV negative people in Shenzhen city. Methods To detect HPV infection status and HPV virus load with fluorescence quantitative PCR. Results In 40 HIV positive persons, there were 20 HPV infections, and the infection rate was 50.0%.In HIV negative persons, there were 7 HPV infections, and the infection rate was 17.5%.There was a significant difference (P < 0.05).The HPV load of HIV positive persons was significantly higher than that of HIV negative persons (P < 0.05).There were 16 types of HPV variants including 11 with high-risk, 5 with low risk.The infection rate was the highest for type-16 (5 people), and type-52 (4 people), third for type-58 (3 people), respectively. Conclusion HPV infection rate among HIV positive people was significantly higher with heavy viral load and multi-type infection condition was serious.
Key words: human immunodeficiency virus     human papilloma virus     virus genotyping     virus load    

人乳头瘤病毒(HPV)是一组小DNA病毒, 主要侵袭皮肤黏膜组织。目前已发现100多种HPV基因型, 其中大约有40种与肛门生殖器区域感染有关, 引起从良性增生到侵袭性癌肿的各种病变。感染人类免疫缺陷病毒(HIV)人群中生殖器部位HPV的感染率较高, 且使宫颈癌和肛门生殖器肿瘤的发生率增加1-2。因此, 本研究采用荧光定量PCR方法对HIV感染者和非HIV感染者的HPV病毒感染情况和病毒载量进行检测。现将结果报告如下。

1 材料与方法 1.1 对象

于2005年1月-2009年1月对深圳市宝安区慢性病防治院性病门诊就诊性病患者血清和生殖器分泌物标本进行HIV抗体初筛和HPV检测, 其中HIV抗体初筛阳性标本送至深圳市疾病预防控制中心艾滋病确认实验室确认。共收集HIV阳性病例有40例(阳性组), 其中HIV和HPV同为阳性20例, 另随机抽取HIV阴性40例作为阴性对照组。

1.2 仪器和试剂

HPV-PCR检测试剂盒以及荧光扩增检测试剂盒(广州达安基因公司); PCR仪(美国Bio-Rad公司); ABI-7000型荧光定量PCR仪(美国ABI公司)。

1.3 方法

按参考文献〔3〕方法, 制备PCR所用引物探针和标记物。

1.4 荧光定量PCR检测病毒载量

待检标本作为模板, 取2 μL加入HPV扩增反应管中, 各反应管放入Lightcycle PCR扩增仪:93℃预变性2 min后, 进入93℃ 5 s, 57℃ 45 s, 40个循环, 然后, 37℃ 1 s。循环结束后, 自动计算读取定量结果。

2 结果 2.1 HPV感染率

HIV阳性组中HPV阳性20例, 感染率为50.0%, 在HIV阴性组中HPV阳性7例, 感染率17.5%, 差异有统计学意义(P < 0.05)。

2.2 HPV病毒载量

HIV阳性组的HPV病毒载量分布区间在(1.00×104~0.99×105)拷贝数/mL有4例, (1.00×105~0.99×106)拷贝数/mL有9例, (1.00×106~0.99×107)拷贝数/mL有6例, ≥1.00×107拷贝数/mL有2例; HIV阴性组的HPV病毒载量分布区间在(1.00×103~0.99×104)拷贝数/mL有1例, (1.00×104~0.99×105)拷贝数/mL有4例, (1.00×105~0.99×106)拷贝数/mL有2例。分析发现, HIV阳性组HPV病毒载量比HIV阴性组HPV病毒载量至少高1个数量级(P < 0.05)。

2.3 HPV感染分型

HIV和HPV同为阳性20例病例中检出单型HPV感染9例, 混合感染HPV (有2或3种亚型)11例。共检出有16种HPV亚型, 其中11种为高危型(16, 18, 31, 33, 35, 45, 52, 56, 58, 68, 73亚型)和5种低危型(6, 11, 42, 44, 54亚型)。在16种亚型中, 感染率最高的为16型(5例), 其次为52型(4例)、58型(3例)。

3 讨论

近年来, 由于荧光定量PCR方法可以实现在封闭环境中完成扩增检测, 有效地降低了PCR污染概率, 且能够精确定量, 已被较多地应用于HPV病毒检测3。本研究结果显示, HIV阳性组HPV感染率约为HIV阴性组的3倍, 提示HIV感染可以促进HPV的感染。HIV阳性组HPV病毒载量比HIV阴性组HPV病毒载量至少高1个数量级, 提示HIV的感染可以加重HPV感染的载量。HPV分型实验结果表明, 感染人群中型别较多, 而且存在多型同时感染。深圳市是一个移民城市, 流动人口占大多数, 是中国性病/HIV感染者人群较多的城市之一4-5。因此, 对HIV患者的HPV感染情况进行监测, 可减少该病的蔓延与传播。

参考文献
[1] Conceico Q, Ana GT, Eduardo S, et al. Prevalence of human papilloma virus in HIV-positive and HIV-negative patients in the State of Bahia:a pilot study[J]. Brazilian Journal of Infectious Diseases, 2004, 8 : 356–362. DOI:10.1590/S1413-86702004000500004
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