中国公共卫生  2009, Vol. 25 Issue (6): 742-744   PDF    
静脉药瘾者多病毒感染与T细胞亚群关系
田昆仑1, 吴建新1, 苏娟1, 杨志华1, 李建蓉2     
1. 大理学院基础医学院, 云南 大理 671000;
2. 华中科技大学同济医学院
摘要: 目的 研究静脉药瘾者(IDU)血源性病毒感染及重叠感染状况、T细胞亚群变化与多重病毒感染的关系。 方法 以406名无肝炎病史的静脉药瘾者为研究对象, 用酶联免疫吸附法、免疫层析法和多聚酶链反应检测血源传播的常见病毒的感染标志物, 用免疫荧光法检测T细胞; 用ELISA和放射免疫法检测诱生的细胞因子和血清的细胞因子。选取同一地区102名健康体检者作对照。 结果 在406例静脉药瘾者中, 乙肝病毒(HBV)、丙肝病毒(HCV)、人类免疫缺陷病毒(HIV)、丁肝病毒(HDV)、戊肝病毒(HGV)和血源传染病毒(HCMV)感染率分别为36.45%, 69.7%, 47.3%, 2.22%, 1.97%和3.45%, 均明显高于对照组, 静脉药瘾者(61.81%)存在2种以上病毒感染。HIV易重叠HCV和HBV等病毒感染, 重叠感染率为83.85%。对照组仅存在HBV感染17.65%(18/102)。静脉药瘾者的CD3+和CD4+细胞比例减少, CD8+细胞比例无明显变化, 单个核细胞诱生的IL-4、IFN-γ以及血清IL-2减少, 血清IL-4增高(P < 0.01)。发生HIV感染或HIV重叠HCV/HBV病毒感染时, 诱生的IFN-γ和CD4+细胞比例进一步降低。HIV合并HBV感染的静脉药瘾者, 51.72%表现HBV-DNA阳性和37.93%的HBeAg阳性; 但无HIV感染时, HBV-DNA阳性率仅为1.68%。 结论 静脉药瘾者易出现多种病毒感染, 主要是HIV、HCV和HBV的感染。静脉药瘾者Th1细胞功能减弱, 出现HIV感染或重叠感染使Th1/Th2细胞平衡紊乱, 进一步证实了HIV可能通过减弱Th1细胞功能, 促进HBV的复制。
关键词静脉药瘾者     T细胞亚群     血源传播病毒     重叠感染    
Study on blood-borne virus co-infection and T lymphocyte subset in intravenous drug users
TIAN Kun-lun, WU Jian-xin, SU Juan, et al     
School of Basic Medicine, Dali University, Dali 671000, China
Abstract: Objective To investigate the features of various blood-borne virus infection and co-infection in intravenous drug users (DU).The correlation of Tlymphocyte subsets and virus co-infection was exam fined. Methods A study population of 406 DU consisted of 383 males and 23 females.All subjects had no clinical manifestation of hepatitis HBV-DNA and HCV-RNA were identified by fluorescence quantitative polymerase chain reaction HBsAg, HBeAg, anti-HCV, HDV-Ag, anti-HCV, anti-HIV, and HCM V-IgM were assayed by enzym e-linked immunosorbent assay (ELISA) and immunochrom atogmphic tests.The levels of cytokines of Th1 and Th2 were measured by EL ISA and radioactive immune assay (RIA).Tlymphocyte subpopulation was detected by means of fluorescence immunoassay.The indices taken from 102 healthy persons served as control. Results The infection rate of the vims among DU was 36.45% for HBV, 69.70 for HCV, 47.3% for HIV, 2.22% forHDV, 1.97% for HGV, and 3.45% for HCMV, respectively.The co-infection rate of blood-borne virus was detected in 255 of 406 (61.81%) subjects Triple infection and fourfold infectionwere detected in the study.More than 80%(161/192) of subjects infected with HIV were co-infected with the other virus (HBV or HCV).In contrast, among the controls, the infection rate was 17.65% for HBV and 0% for other vimses Therewas a profound decrease in the proportion of CD4/CD8 and the percentage of CD3 and CD4, but no decrease in the percentage of CD8 The levels of PHA-induced cytokines (IFH-γ and 1-4) and the level of seaun 1-4 were obviously decreased in DU.On the other hand, the level of seaun 1-4 was increased The level of IFH-γand the percentage of CD4 were continuously decreased when the DU was infected with HIV or HIV co-infection DU with HIV and HBV co-infection was 15.1% and 51.72%.37.93% of the subjects were HBV-DNA positive and HBeAg positive when there was HIV and HBV co-infection Only 1.68% (2/119) of DU without HIV infection were HBV-DNA positive. Conclusion HCV, HBV and HIV infection were comm on in DU.The co-infection led to a high incidence of inpaired Th1 cytokine levels and CD4 lymphyocyte DU with HIV and HBV/HCV co-infection showed both lower expression of Th1 cytokine and enhancement of the Th2 response HIV may be a reason causing HBV rep lication through decreasing Th1 function.
Key words: intravenous drugusers     T lymphocyte subpopulation     blood-borne virus     co-infection    

静脉药瘾者(Intravenous Drug Usere, IDU)长期摄取海洛因形成躯体和精神上的依赖,同时他们多交叉使用注射器使机体免疫力降低,对各种病原体的易感性增加。本研究对静脉药瘾者T细胞亚群变化与多重病毒感染之间的关系进行了研究。现报告如下。

1 对象与方法 1.1 对象

选择提供知情同意和符合纳入标准的IDU为观察对象,即云南省2002~2003年戒毒所强制戒毒的静脉吸毒人员,共406名,其中男性383名,女性23名。吸毒史1~18年,吸毒量0.1~0.5 g/d。年龄17~61岁,平均年龄32.4岁。49.01%(199/406)有共用注射器史,均无肝炎病史。对照组为同一地区健康体检者,男64人,女38人,年龄18~58岁,平均30.5岁。

1.2 方法 1.2.1 病毒感染标志物检测

采集调查者6 mL静脉血,3 mL分离血清。HBV血清抗原抗体标志物(HBsAg、抗-HBs、抗-HBc、HBeAg和抗-HBe)检测试剂盒和抗-HCV检测试剂盒(上海实业科华生物技术公司); HDV-Ag、HGV-IgG和HCMV-IgM检测试剂盒(郑州博赛生物工程有限责任公司); HCV-RNA检测试剂和HBV-DNA检测试剂盒(郑州华美工程生物和深圳匹基生物工程股份有限公司); HIV-1/HIV-2抗体检测试剂盒(美国雅培制药有限公司); 血清IL-2和IL-4检测采用放射免疫分析测定盒(北京北方生物技术研究所)。

1.2.2 细胞因子的检测

取3 mL肝素抗凝血,按常规分离外周血单个核细胞(PBMC),用含10%小牛血清的RPMI-1640调整细胞浓度,在植物血凝素(PHA-M)刺激下,二氧化碳培养箱中孵育60 h,收集上清,用于诱生的细胞因子(IL-4和IFN-γ)检测。

1.2.3 T细胞亚群检测

采用间接免疫荧光法,CD3、CD4、CD8单克隆抗体(武汉生物制品公司); 羊抗鼠IgG-FITC (华美生物工程公司)。

1.3 统计分析

采用SPSS软件进行χ2检验和t检验。

2 结果 2.1 静脉吸毒者HBV、HCV、HIV、HDV、HGV和HCMV感染情况

在IDU中,HBV、HCV、HIV、HDV、HGV和HCMV等病毒感染率均明显高于对照组,病毒重叠感染率高达62.81%(255/406),可出现2~4种血源性病毒的重叠感染。同时针对HBV和HCV血清学指标阳性者和部分阴性者,分别进行了HBV和HCV的核酸检测,其中有17例HBV-DNA阳性,核酸量为4.59×106 copies/L~5×1010 copies/L,有55例HCV-RNA阳性,核酸量为2.98×105 copies/L~2.25×108 copies/L。未发现HCV-RNA含量与HCV抗体量的相关性; 在抗HCV阴性者和HBcAb阴性者中未检测出HCV-RNA或HBV-DNA。对照组HBV感染率为17.65%(18/102),其余病毒感染指标均为阴性。

2.2 T细胞亚群和细胞因子检测(表 1)
表 1 IDU和对照组T细胞亚群的检测(……x±s)

通过检测发现,IDU总T细胞数减少,主要是CD4+T细胞减少,CD8+T细胞没有明显改变,从而导致CD4/CD8比值降低。IFN-γ和IL-4诱生水平均较对照组降低,IDU血清IL-2含量比对照组低,但IL-4含量高于对照组。

2.3 HBV与HIV重叠感染的检测

在IDU 15.1%(29/192)的HIV感染者合并HBV感染,针对HBV和HIV血清学指标阳性者,包括17例HBV-DNA、12例HBeAg和24例HBsAg阳性者,进行HIV和HBV的重叠感染相关分析,结果HIV重叠HBV感染者有51.72%(15/29) HBV-DNA阳性; 37.93%(11/29) HBeAg和58.62%(17/29) HBsAg阳性率。而无HIV感染的IDU,仅有1.68%(2/119) HBV-DNA阳性率。

2.4 病毒重叠感染与T细胞亚群(表 23)
表 2 IDU HIV与HBV合并感染者T细胞亚群变化(……x±s)

表 3 IDU HIV与HCV合并感染者T细胞亚群变化(……x±s)

HIV重叠HBV和HCV的感染率分别为15.1%(29/192)和80.21%(154/192)。根据静脉药瘾者HIV、HBV和HCV的感染情况进行分组,分别检测T细胞亚群的变化,结果主要表现为存在HIV感染时(HIV单独感染或合并感染) CD3+、CD4+细胞数和PBMC诱生的IFN-γ减少,但HBV-DNA或HCV-RNA阳性组和阴性组间,T细胞亚群检测差异无统计学意义。IFN-γ减少与病毒载量无关。

3 讨论

我国HBV、HCV、HGV和HIV等病毒感染率呈逐年上升趋势,静脉注射毒品已成为传播这些病原体的重要途径1。本研究结果显示,在IDU中,HBV、HCV、HIV、HDV、HGV和HCMV等病毒感染率均明显高于对照组,特别是HCV和HIV感染率高达69.7%(283/406)和47.3%(192/406)。此组IDU病毒感染率高达88.92%,可出现2~4种病毒的重叠感染,与其他报道一致2

本研究发现,IDU外周血CD3+和CD4+T细胞百分率明显低于正常人,CD+8T细胞没有明显变化,从而导致CD4/CD8比值低下,表明药物滥用者细胞免疫功能处于抑制状态,与多数学者报道一致3。有研究认为,海洛因所导致免疫系统的明显损害具有剂量依赖性,可通过中枢神经内阿片肽系统和下丘脑-垂体激素系统的功能变化,以及在免疫细胞上存在阿片类受体,从而病态性强化中枢对外源性阿片类物质的依赖程度4

在IDU,HIV与HBV或HCV合并感染较为常见,国外文献报道,HIV感染者中HBV和HCV感染率分别为10%~21%和64%~77%5。而该组IDU显示HIV重叠HBV/HCV感染率较高(分别为15.1%和80.21%)。Chung报道5,由于不同的传播途径,HIV和HBV共感染分别为:同性恋21%,异性恋14%,吸毒者7%和血友病14%。HIV减弱机体细胞免疫功能促进肝炎病毒复制,而HBV通过NF-κB作用于长末端重复系列增强HIV转录6。本研究也证实,HBV活动性感染者(HBV-DNA阳性)大多数(15/17)伴有HIV感染,同时HBeAg检测也为阳性,而无HIV感染者HBV-DNA和HBeAg的检出率很低,反映了HIV具有促进HBV复制的作用。

本研究发现,IDU和HIV单独或合并感染时均表现为CD4+细胞和Th1细胞因子产生进一步减少,使机体细胞免疫功能损伤加重,但研究中未发现病毒载量与Th1细胞因子水平的相关性。

总之,IDU是HCV、HIV和HBV感染的高危人群,他们易出现多重病毒感染,主要是HIV与HCV/HBV的重叠感染。IDU存在Th细胞平衡紊乱,无论是单病毒或多病毒感染均会影响T细胞亚群的数量和功能。因此对血源性病毒感染的高发和高危人群进行干预和增强免疫功能,有利于传染病的控制和防治工作。

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