中国是幽门螺杆菌(Hp)高感染率地区之一，全国各地大部分省市均进行过流行病学调查，但针对学龄期儿童感染状况的较大规模的现况调查和随访研究很少。为了解江苏省赣榆县农村地区小学6~15岁儿童少年Hp感染情况，对赣榆县部分农村小学学生感染状况进行基线调查和新增感染情况的随访研究，为进一步深入调查和实施各项干预措施提供科学依据。

(1)基线调查：于2004年12月以分层整群抽样的方法，抽取江苏省赣榆县3个乡镇19所小学的1~5年级学生。(2)随访观察：基线调查幽门螺杆菌感染为阴性的人群，以知情同意为原则，按学校和班级为单位进行分层整群随机抽样，抽取3个乡镇12所学校部分1~5年级学生为随访队列人群进行为期1年的随访。

血清幽门螺杆菌抗体检测ELISA试剂盒(北京贝尔生物工程有限公司); 口服用¹³C尿素剂(北京嘉汇彬医药技术有限公司); ¹³C呼气质谱分析仪(英国PDZ Europa公司)。

(1)基线调查：采集基线人群的血清用血清特异性IgG抗体ELISA方法和¹³C尿素呼气试验，进行感染状态检测，其中任何一项阳性者均为感染阳性。(2)随访研究：对血清特异性IgG抗体和¹³C尿素呼气试验检测结果均为阴性者，根据知情同意的原则，每4个月对其采用¹³C尿素呼气试验检测; 对¹³C尿素呼气试验阳性者，采集静脉血，并用ELISA方法进行血清学检测; 两者均为阳性者为新发感染病例。

(1)血清幽门螺杆菌抗体检测：将100 μl抗体稀释液加到包被有Hp Cag-A和Hsp-58抗原的微量反应板中，加入5 μl的待检血清，同时设立阳性对照、阴性对照及空白对照，混匀，37 ℃ 30 min; 洗板，加入HRP标记的抗人IgG抗体酶标工作液，洗板; 以四甲基联苯胺(TMB)显色，终止反应后，以空白对照调零，在酶标仪492 nm波长下读取A值，以阴性对照A值+0.10作为临界值，被测孔的A值大于临界值判定为阳性，小于或等于临界值判定为阴性。(2)¹³C尿素呼气试验(¹³C-UBT)：受试者早上空腹或禁食2 h以上，先采集0 min呼气样品，然后以凉饮用水送服尿素[¹³C]，30min后再次收集呼气样品。将收集的0，30 min呼气样品在同位素质谱仪上进行¹³CO₂检测，以30 min时呼气样品中所测13 CO₂的(δ‰千分差值)δ‰计算公式：(¹³C)测定样品的同位素丰度-(¹³C)参比样品的同位素丰度)/(¹³C)参比样品的同位素丰度×1000。阳性判断值≥4.0±0.4时，判定受试者[¹³C]尿素呼气试验阳性。

(1)幽门螺杆菌感染诊断标准：参照2003年在安徽桐城召开的全国幽门螺杆菌共识会议所审核修订的《幽门螺杆菌若干问题的共识意见》的血清大样本流行病学调查标准和科研诊断标准^〔1〕。

发病密度^〔2〕：指在动态队列中，一定时间内某病新发病例数除以同时间内可能发生该病的人时数，本次研究是指出现幽门螺杆菌感染人数除以随访时期内可能发生幽门螺杆菌感染的人时数。

应用Epiinfo 6.0进行数据双份录入。应用SAS 8.0软件进行统计分析; 率的比较用χ²检验或趋势性χ²检验，基线调查的发病影响因素多因素研究应用多因素条件Logistics回归分析。

表 1

表 1 江苏省赣榆县农村地区儿童幽门螺杆菌感染状况的基线调查

表 1 江苏省赣榆县农村地区儿童幽门螺杆菌感染状况的基线调查

基线调查赣榆县3个乡镇共8 161名学生，男女比例为1.50:1，平均年龄(9.78±1.71)岁，其中男性平均年龄为(9.70±1.70)岁，女性为(9.90±1.72)岁。检出幽门螺杆菌感染1 645例, 感染率为20.16%;不同性别及年龄组感染状况比较，差异均有统计学意义(P < 0.01)。不同性别、年龄组、学校性质和乡镇的感染率均不同。

表 2

表 2 农村地区儿童幽门螺杆菌感染多因素分析

表 2 农村地区儿童幽门螺杆菌感染多因素分析

单因素分析结果显示，不同年龄、性别、学校性质、乡镇经济水平与幽门螺杆菌感染率差异均有统计学意义，以是否感染为因变量，选择上述所有因素为自变量进行多因素条件Logistics回归分析。结果显示，在α=0.05的水平下，性别、学校性质、乡镇经济水平、8~15岁年龄组与感染状况有关联。

表 3

表 3 农村地区儿童幽门螺杆菌发病影响因素分析

表 3 农村地区儿童幽门螺杆菌发病影响因素分析

经过筛选，根据知情同意的原则，符合随访纳入标准共计2 232人，其中男性1 366人，占61.20%;女性866人，占38.80%;平均年龄(9.65±1.67)岁; 随访至2005年12月，随访时间为1~12个月，平均11.81个月; 失访107人，占4.79%，其中主要原因为转学，占98.13%。随访期内共新增感染病例51例，平均发病密度为2.32%，其中6岁~、7岁~、8岁~、9岁~、10岁~、11岁~、12~15岁的男性幽门螺杆菌发病密度分别为2.21%，1.90%，1.08%，1.61%，0.73%，3.17%，7.08%，女性不同年龄组幽门螺杆菌发病密度分别为3.45%，3.26%，3.45%，2.83%，2.17%，2.50%，2.90%，男性不同年龄组发病密度差异有统计学意义(P_男=0.026 7)，女性的不同年龄组发病密度比较差异无统计学意义(P_女=0.994 9)。在分析的危险因素中，不同性别、年龄、学校性质以及乡镇经济水平差异均无统计学意义。

幽门螺杆菌是全球最常见的感染源之一，在1994年世界卫生组织将幽门螺杆菌定为Ⅰ类致癌因子^〔3〕。王凯娟^〔4〕的研究显示，目前我国Hp感染在儿童期存在感染率急剧增长现象，高感染率年龄段较早，5~10岁为42.04%，10~20岁已达50%以上，均高于国内研究结果^〔5-7〕，这可能与赣榆地区生吃大蒜的饮食习惯有关^〔8〕，而大蒜素对Hp菌株具有良好的抑制作用^〔9〕。

单因素和多因素分析结果显示，不同性别感染率均有差异，其中女性高于男性。而目前国内外的流行病学调查认为，儿童Hp感染在男性与女性之间基本一致^〔5〕，相关原因有待于进一步研究。随着年龄的增加，感染率在逐步增加，这与国内外的研究结果一致^〔10〕; 镇中心小学的感染率高于乡村小学，这与过去研究认为感染率与经济状况呈反比的情况有所不同，这可能与乡村地区的儿童多吃大蒜有关，而镇中心小学的儿童有更多的机会吃零食有关; 经济水平与感染率呈反比的关系与文献一致^〔11〕。

本次的1年期随访研究表明，6~15岁儿童每个年龄段(岁)的Hp感染年平均增加率为2.32%，不同年龄的年平均增加率无差别，不同性别、学校性质以及乡镇经济水平的年感染平均增加率也无差别。10岁~年龄组的年感染增加率低于其他年龄组，且10岁~年龄组的感染率也低于其临近的年龄组，是否与社会环境、疾病发病规律等因素有关，需要进一步研究。