研究表明，蕨类植物中含有较高黄酮类物质^{〔1, 2〕}。蕨菜黄酮在体内外均有抗氧化作用，对细胞氧化系统有保护作用^{〔1, 3, 4〕}。为了探讨蕨菜黄酮对乙醇所致肝损伤的影响，本研究观察了蕨菜黄酮提取物对小鼠急性乙醇肝损伤模型的保护作用，为进一步开发利用蕨菜黄酮提供参考依据。

（1）试剂与药品：蕨菜黄酮提取物，按文献〔1〕提取；三氯乙酸(CP)，芦丁(Rutin, CP)，硫代巴比妥酸(2-Thiobarbitursaure，MERCK)，焦性没食子酸（Pyrogalloricacid CP），谷丙转氨酶（GPT）试剂盒，甘油三酯（TG）试剂盒(南京建成生物工程研究所)；其余试剂均为国产分析纯。（2）仪器：TU-1201紫外可见光分光光度计(北京普析通用仪器设备有限公司)；GL-20G-Ⅱ型离心机（上海安亭科学仪器厂）；RE-520旋转蒸发器(上海浦沪西仪器厂)；SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵、DLSB-5/20型低温冷却液循环泵（郑州长城科工贸有限公司），SHANGPING FA1004电子天平(上海精科天平厂)；可调式取液器（20，100，1000，5000 μl）。（3）动物：昆明种健康小鼠，雄性，体重（20±2）g（南京医科大学实验动物中心），许可证号：SCXK (苏)2002-0031。

参照文献〔1〕制备蕨菜黄酮提取物；按文献〔5〕方法测定蕨菜黄酮提取物中黄酮含量为6.98%。

小鼠正常饲养2 d，随机分成5组，每组12只。其中蕨菜黄酮低、中、高3个剂量组灌胃黄酮的剂量分别为每天30，150，300 mg/(kg·bw)，每天灌胃1次，每周称1次体重。按体重连续灌胃45 d后，再按12 ml/(kg·bw)1次灌胃50%乙醇；乙醇模型组先以20 ml/(kg·bw)连续灌胃45 d纯净水后，再按12 ml/(kg·bw)1次灌胃50%乙醇；空白对照组以20 ml/(kg·bw)连续灌胃45 d纯净水后，再按12 ml/(kg·bw)1次灌胃纯净水。

末次灌胃后禁食16 h，不禁水，称重，摘除眼球取血，分离血清，按试剂盒方法测定血清谷丙转氨酶（GPT）活性；处死小鼠取肝脏，称重，计算肝脏指数[肝重g/(kg·bw)]；用0.2 mol/L, pH 7.4的磷酸盐缓冲液制备20%肝匀浆，按试剂盒方法测定甘油三酯（TG）含量；按文献〔4〕方法测定肝匀浆中丙二醛（MDA）含量，用吸光度（A）值表示。

应用SAS 9.0软件进行统计分析，用单因素方差分析比较组间差异。

表 1

表 1 蕨菜黄酮对小鼠血清谷丙转氨酶（GPT）和肝脏MDA的影响(x±s)

表 1 蕨菜黄酮对小鼠血清谷丙转氨酶（GPT）和肝脏MDA的影响(x±s)

表 1可见，乙醇模型组的GPT高于空白对照组（P＜0.01），也高于蕨菜黄酮各剂量组，表明乙醇对小鼠肝脏的影响明显；而蕨菜黄酮可降低乙醇对小鼠血清GPT影响，对肝脏有一定保护作用。其中以中剂量组最好，可使GPT水平降至空白对照组的水平，提示不同的蕨菜黄酮含量对肝脏的保护效果有一定差异。乙醇模型组小鼠肝脏MDA高于空白对照组（P＜0.05），表明乙醇对小鼠肝脏脂质过氧化作用明显；而蕨菜黄酮中剂量组和高剂量组均可降低肝脏MDA含量（P＜0.05或P＜0.01），其中高剂量组的肝脏MDA含量已低于空白对照组水平。提示蕨菜黄酮对乙醇引起肝脏损伤的保护作用，可随剂量增大作用增强。

表 2

表 2 蕨菜黄酮对小鼠肝脏TG和肝脏指数的影响

表 2 蕨菜黄酮对小鼠肝脏TG和肝脏指数的影响

表 2可见, 与乙醇模型组相比，蕨菜黄酮各剂量的肝匀浆甘油三酯（TG）含量均明显降低(P＜0.05)；其中中剂量组的作用更为明显(P＜0.01)。乙醇模型组和各剂量组的肝脏指数均高于空白对照组（P＜0.05或P＜0.01），表明乙醇可引起小鼠肝脏指数增加；而蕨菜黄酮各剂量组的肝脏指数均未见明显下降（P > 0.05）。

机体摄入乙醇后，在乙醇脱氢酶催化作用下大量脱氢氧化，使TCA循环发生障碍，导致脂肪代谢受到影响，而使脂肪在肝内沉积。同时乙醇激活氧分子，产生氧自由基导致肝细胞膜的脂质过氧化损伤^〔7〕。乙醇及代谢产物丙二醛能够通过增加还原尼克酰胺腺二核甘酸、羟自由基、黄嘌呤氧化酶活性等引发脂质过氧化破坏氧化与抗氧化之间的动态平衡^〔8〕，致使肝细胞凋亡。

本文结果显示，3个剂量蕨菜黄酮提取物均可降低乙醇肝损伤模型的血清GPT活性及肝脏TG含量，其高、中2个剂量还能降低肝脏MDA水平。表明蕨菜黄酮提取物对乙醇肝损伤有保护作用。可以认为，适量摄入蕨菜黄酮提取物能在很大程度上减轻乙醇对肝脏的损害。

本文结果显示，蕨菜黄酮并未使得乙醇引起的肝脏指数增大恢复正常，与文献^〔9〕报道相似，其作用机制尚需进一步研究。