中国公共卫生  2009, Vol. 25 Issue (1): 46-47   PDF    
引用本文
王各各, 谷娅楠, 罗兴涛, 刘辉. 高考应激实验指标变化与DQB1基因多态性关系[J]. 中国公共卫生, 2009, 25(1): 46-47.
WANG Ge-ge, GU Ya-nan, LUO Xing-tao, et al. Influences of exam stress on blood-serum biochemistry, immunity indexes and correlations with HLA-DQB1[J]. Chinese Journal of Public Health, 2009, 25(1): 46-47.
高考应激实验指标变化与DQB1基因多态性关系
王各各, 谷娅楠, 罗兴涛, 刘辉     
大连医科大学检验医学院, 大连 116044
收稿日期: 2008-05-15
基金项目: 国家自然科学基金(30770724)
作者简介: 王各各(1982-), 女, 辽宁人, 硕士, 主要从事精神神经免疫方面研究。
通讯作者: 刘辉
摘要: 目的 探讨高考应激对机体的血清生化、免疫指标的影响及其与人类白细胞抗原-DQB1(HLA-DQB1)等位基因的关系。 方法 随机选取沈阳某重点中学27名学生, 高考前1个月作为实验组和某学校开学2个月后的学生作为对照组。测定白蛋白、总蛋白、总胆红素、直接胆红素、尿素、肌酐、尿酸、葡萄糖、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、转肽酶、钙、钠、钾、氯、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、IgG、IgA、IgM、C3、C4。采用全自动生化分析仪完成检测; HLA-DQB1采用PCR法检测。 结果 高考应激组白蛋白(50.1±1.6) g/L, 葡萄糖(4.8±0.3) mmol/L, 碱性磷酸酶(94.6±26.0) U/L, 钙(2.4±0.1) mmol/L, 钾(4.2±0.3) mmol/L, 补体C3(1122.5±169.2) mg/L, 与对照组比较, 均明显升高, 差异均有统计学意义(P < 0.05);直接胆红素(3.3±1.4)μmol/L, 谷草转氨酶(16.3±3.7) IU/L, 总胆固醇(3.6±0.5) mmol/L, 与对照组比较明显降低, 差异均有统计学意义(P < 0.05);HLA-DQB1各等位基因阳性携带和阴性携带者各检测指标水平差异均无统计学意义(P > 0.05)。 结论 某些临床常规血清生化、免疫指标可以作为观察社会心理性应激程度的敏感指标。
关键词： 应激     生化     免疫     人类白细胞抗原    
Influences of exam stress on blood-serum biochemistry, immunity indexes and correlations with HLA-DQB1
WANG Ge-ge, GU Ya-nan, LUO Xing-tao, et al     
College of Medical Laboratory, Dalian Medical University, Dalian 116044, China
Abstract: Objective To explore the influence of the exam stress on blood-serum biochemistry and immunity parameters as well as their correlations with the phenotype of HLA-DQB1 in healthy volunteers. Methods Twenty-seven students of middle school, who would take the exam a month later, and 24 students, who began to study after vacation, were selected as observation group and control group respectively.The blood-serum biochemistry, immunity parameters included albumin (ALB), total protein, total bilirubin, direct bilirubin (D-BIL), urea, creatinine, uric acid, glucose (Glu), alanine amin-otransferase, aspartate aminotransferase (AST), alkaline phosphatase (ALP), γ-glutamyl transpeptidase, potassium (K), sodium, chlorinum, calcium (Ca), cholesterol (Chol), triglyeride, high density lipoprotein, low-density lipoprotein and IgG, IgM, IgA, C3, C4, were measured with automatic analyzer.HLA-DQB1 alleles were individually amplified by PCR. Results Exam stress significantly increased the contents of Alb (50.1±1.6 vs 47.5±2.0 g/L), Glu (4.8±0.3 vs 4.5±0.5 mmol/L), ALP (94.6±26.0 vs 70.9±18.4 IU/L), Ca (2.4±0.1 vs 2.3±0.1 mmol/L), K (4.2±0.3 vs 3.9±0.3 mmol/L) and C3(1122.5±169.2 vs 1015.1±202.4 mg/L) while decreased D-BIL (3.3±1.4 vs 4.2±1.6 μmol/L), AST (16.3±3.7 vs 20.3±8.7 IU/L) and Chol (3.6±0.5 vs 3.9±0.7 mmol/L) in blood-serum (P < 0.05).There was no significant difference in measured values between people with and without each allele at HAl-DQB1. Conclusion Exam stress could induce significant blood serum biochemistry, immunity changes and these indexes may be biomarkers of social psychology stress.
Key words: stress     biochemistry     immunity     HLA    

高考属重大生活应激事件, 可以引起学生心理状况发生变化, 免疫功能下降, 感染疾病机率增多[1-3]。为了解高考学生心理应激时, 机体生化与免疫系统发生的变化, 并探讨这些变化与人类白细胞抗原-DQB1 (HLA-DQB1)等位基因多态性的关联, 进行了本研究。结果报告如下。

1 对象与方法 1.1 对象

随机选取沈阳某重点高中毕业班学生27人, 男生15人, 女生12人, 年龄18~20岁, 高考前1个月采集血样, 作为实验组; 随机挑选某大学入学新生24人, 男生12人, 女生12人, 年龄18~22岁, 开学2个月后采集血样, 作为对照组。2组学生均获得知情同意, 身体健康, 女生非月经期, 对照组学生近期均无重大生活事件发生。

1.2 方法 1.2.1 标本采集

于同一天早8: 00~9: 00, 空腹状态下肘静脉穿刺采集血样3.5 ml, 置于分离胶促凝剂管中, 轻轻混匀, 3 000 r /min离心10 min, 用于生化检测。分离血清, 用于血液生化及免疫指标检测。-80 ℃冻存血清待检。

1.2.2 血清学指标检测

血清充分溶解, 室温平衡, 用全自动生化分析仪(日立7600 -110)进行同批检测, 测定指标包括:白蛋白(Alb)、球蛋白(Glob)、总蛋白(Tp)、白球比(a/g)、总胆红素(Tbil)、直接胆红素(Dbil)、尿素(Urea)、肌酐(Cre)、尿酸定量(Ua)、葡萄糖(Glu)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(Alp)、转肽酶(V-gt)、钙(Ca)、钠(Na)、钾(K)、氯(Cl)、总胆固醇(Chol)、甘油三酯(Tg)、高密度脂蛋白(Hdlch)、低密度脂蛋白(Ldlch)。用全自动免疫检测仪检测IgG、IgA、IgM、C3、C4。

1.2.3 HLA2DQB1等位基因检测

按文献[2]方法, 从血凝块中提取基因组DNA; 采用人类白细胞抗原(HLA)-DQB1试剂盒(德国PROTRANS公司) SSP-PCR法扩增和检测HLA-DQB1, 实验条件按说明书执行。观察血清生化及免疫指标与HLA-DQB1等位基因的关联(只观察阳性率≥10%的HLA-DQB1等位基因)。

1.3 统计分析

采用SPSS软件进行统计分析。血清生化与免疫指标检测结果进行独立样本t检验。

2 结果 2.1 生化与免疫指标比较(表 1)
表 1 不同组别学生血清生化、免疫指标比较(x±s)

葡萄糖、碱性磷酸酶、钙、钾和补体C3实验组较对照组明显升高, 差异有统计学意义(P < 0.05);直接胆红素, 谷草转氨酶和总胆固醇在实验组较对照组明显降低, 差异有统计学意义(P < 0.05)。

2.2 高考应激学生白细胞抗原-DQB1等位基因分布(表 2)
表 2 HLA-DQB1等位基因多态性分布

54名高考学生的HLA-DQB1等位基因检测频率与文献报道的基本一致[4]; HLA-DQB1各等位基因阳性携带和阴性携带者各检测指标差异均无统计学意义(P > 0.05)。

3 讨论

当内环境稳定受到威胁时, 机体对应激原将产生反应, 考试学生是一种典型的应激人群, 高考人群所承受的应激强度更大, 观察这种应激强度对机体的影响是本文的主要目的。研究发现, 高考应激可以引起白蛋白、葡萄糖、碱性磷酸酶、钙、钾和补体C3的明显升高, 差异有统计学意义(P < 0.05);直接胆红素、谷草转氨酶和总胆固醇在应考期较一般学习期明显降低, 差异有统计学意义(P < 0.05)。说明高考应激对临床常用生化和免疫指标有可检出的影响, 这些指标对精神-神经-内分泌的调控敏感。一般认为, 不同个体对应激反应差异较大, 前期研究发现, 这种差异与HLA基因座位等位基因多态性关系密切[2, 5, 6], 因此, 检测应激人群HLA-DQB1的多态性, 比较携带不同HLA-DQB1等位基因检测指标的变化是否相同。实验未发现HLA-DQB1各等位基因阳性携带和阴性携带者各检测指标水平差异有统计学意义(P > 0.05), 说明应激反应的个体差异可能受更多的基因调控。本研究提示, 由应激所引起血清生化、免疫指标的改变, 其生理或病理意义还须深入研究, 但这些指标变化可以作为应激反应, 特别是社会心理应激反应的生化标志物, 对社会心理应激反应进行客观评价, 为进一步定量研究不同应激对健康损伤和亚健康流行病学研究具有重要意义。

参考文献
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